王寒阳
- 作品数：8 被引量：21H指数：2
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- E-64对绵羊卵母细胞体外成熟过程中caspase表达规律的影响被引量：1
- 2016年
- 为了研究E-64对绵羊卵母细胞体外成熟过程中caspase表达的影响,从而探究E-64抑制卵母细胞凋亡的基本途径。本试验利用双夹心ELISA方法,研究体外成熟过程中绵羊卵母细胞内caspase-3,caspase-8以及caspase-9的蛋白表达水平及酶活水平的变化规律,以及成熟液中添加E-64对其产生的影响。结果表明:caspase-3、caspase-8和caspase-9的蛋白表达水平均呈先升高后降低的变化规律,caspase-3和caspase-9的活性与其蛋白表达的变化规律相一致,而caspase-8的活性则呈逐渐升高的变化规律;成熟液中添加E-64,对caspase-3、caspase-8和caspase-9的蛋白表达水平均无显著性(P>0.05)影响,但可以降低caspase-8和caspase-9的酶活性(P<0.05),而对caspase-3的酶活性无显著性影响(P>0.05)。表明E-64通过在酶活性水平上下调死亡受体途径中caspase-8的活性和线粒体途径中caspase-9的活性,从而降低了卵母细胞体外成熟过程中的细胞凋亡刺激。
- 李捷鑫刘爱菊王寒阳王春霞苏欣李文瑞曹慧田树军孙树春
- 关键词：CASPASE-8CASPASE-9CASPASE-3凋亡
- 绵羊精液低温保存稀释液新配方研究
- 孟娜娜王寒阳刘梦鹤苏文龙田树军李俊杰孙树春
- 绵羊卵母细胞发育过程中核相变化及皮质颗粒分布特征研究
- 卵母细胞在体内的发育是个极其复杂的过程。到目前为止，对于绵羊卵母细胞成熟调节的机制尚未完全清楚，从而制约了绵羊卵母细胞体外成熟培养质量的进一步提高。本研究通过对绵羊有腔卵泡中的卵母细胞及其在体外成熟过程中细胞核核相及皮质...
- 王寒阳
- 关键词：绵羊卵母细胞皮质颗粒
- 文献传递
- 不同直径的绵羊卵泡中卵母细胞核相及皮质颗粒分布特征分析被引量：3
- 2016年
- 为了探讨绵羊体内卵母细胞的核相及皮质颗粒的分布特征,本研究根据绵羊卵泡直径将绵羊有腔卵泡分为早期有腔卵泡（l mm≤直径≤2.5 mm）与中期有腔卵泡（2.5 mm＜直径≤7.5 mm）两组,用地衣红染色方法观察两组绵羊卵泡中卵母细胞的核相特征及所占比例,用FITC-PNA、Hoechst 33342双染方法观察两组绵羊卵泡中的不同核相时期的卵母细胞的皮质颗粒分布特征.结果表明,绵羊早期有腔卵泡中的卵母细胞大部分处于GV1期,其核膜边缘不整齐,染色体呈细丝状,紧贴于核膜下均匀分布或集中于核膜下某处分布,皮质颗粒在胞质中密集、均匀的分布.绵羊中期有腔卵泡中的卵母细胞,大部分处于GV3～GV4期,其核膜边缘清晰、着色较轻,染色体短而粗,在核质中均匀分布,核质明显脱颗粒化,皮质颗粒开始向细胞膜迁移,部分卵母细胞的皮质颗粒在细胞膜下形成一圈密集的带状区域.由此可见,绵羊早期与中期有腔卵泡中的卵母细胞大部分处于GV期的不同阶段,其胞质中皮质颗粒开始发生迁移的时间早于生发泡破裂（GVBD）期.
- 王寒阳李捷鑫李文瑞刘爱菊曹慧郝永兰苏欣王春霞孙树春田树军
- 关键词：绵羊卵母细胞卵泡皮质颗粒
- 卵母细胞体外成熟过程中CTSB、CTSS和caspase 3活性与表达量的变化被引量：1
- 2015年
- CTSB、CTSS和caspase 3对细胞凋亡具有重要作用,其活性和蛋白表达量可反映细胞内、外环境对卵母细胞的凋亡刺激。本研究利用双夹心ELISA方法测定绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3在IVM 0、8、16、24 h的活性与蛋白表达量,研究其在IVM过程中的变化、与卵母细胞质量的相关性及E-64对其产生的影响。结果表明:质量差组卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3活性与CTSB蛋白表达量均极显著高于正常质量组(P<0.01);CTSB、CTSS活性和蛋白表达量在IVM过程中无显著变化(P>0.05),caspase 3活性呈现先降低后升高的趋势,蛋白表达量无显著变化(P>0.05);5μmol/L和10μmol/L E-64显著或极显著降低了CTSB、CTSS和caspase 3活性(P<0.05 or P<0.01),10μmol/L E-64显著提高了CTSB蛋白表达量(P<0.05)。结果显示,CTSB、CTSS和caspase 3的活性及CTSB蛋白表达量与卵母细胞质量呈负相关,E-64可降低CTSB、CTSS和caspase 3活性,并提高CTSB蛋白表达量。
- 刘梦鹤李捷鑫田树军苏文龙苏文龙孟娜娜王寒阳李俊杰
- 关键词：卵母细胞组织蛋白酶CASPASEELISA
- 绵羊精液4℃液态保存的稀释液配方优化研究被引量：13
- 2015年
- 本试验旨在通过改变绵羊精液低温保存稀释液组成成分,探讨添加脱脂奶粉替代牛奶和大豆卵磷脂替代卵黄在精液低温保存的可行性。试验一在绵羊精液稀释中,添加不同浓度的(4%、7%、10%、13%)脱脂奶粉替代鲜牛奶作为试验组,对照组添加牛奶。结果表明:10%的脱脂奶粉替代牛奶,随着绵羊精液4℃液态保存时间的延长,其精子活力、存活率、顶体完整率与牛奶组差异均不显著(P>0.05),添加4%、7%和13%脱脂奶粉组的上述指标则随着精液保存时间的延长呈现显著下降趋势(P<0.05)。在试验一的基础上,试验二用不同浓度(0.375%、0.75%、1.5%、3%)的大豆卵磷脂取代稀释液中的卵黄,进行绵羊精液低温保存试验。结果表明以0.375%的大豆卵磷脂取代绵羊精液低温保存稀释液中的卵黄时,对精子保存效果最好,随着保存时间的延长精子活力、存活率、顶体完整率与对照组差异均不显著(P>0.05)。
- 孟娜娜孙树春王寒阳田树军李俊杰苏文龙刘梦鹤李捷鑫李璐
- 关键词：精液脱脂奶粉大豆卵磷脂绵羊
- 绵羊卵丘细胞细胞周期同步化对核移植胚胎发育的影响被引量：1
- 2015年
- 供体细胞周期同步化是影响体细胞核移植成功率的重要因素之一。试验分别对绵羊卵丘细胞采用血清饥饿和接触抑制的方法进行细胞周期同步化处理,使用流式细胞仪检测各组细胞周期的分布。结果发现,与对照组相比,卵丘细胞经血清饥饿24~72h后,显著地增加了G0/G1期细胞的百分比（P〈0.05）;接触抑制24~72h,G0/G1期细胞所占比例与血清饥饿组无显著差异（P〉0.05）,但显著高于对照组（P〈0.05）;用经血清饥饿与接触抑制的供体细胞进行核移植后,重构胚卵裂率、桑椹胚率和囊胚率差异不显著（P〉0.05）,但二者囊胚率显著高于对照组（P〈0.05）。上述结果证实,血清饥饿和接触抑制均能使绵羊卵丘细胞周期同步化至G0/G1,均可用作绵羊体细胞核移植的供体细胞细胞周期同步化处理。
- 苏文龙李璐孟娜娜刘梦鹤王寒阳李捷鑫曹慧田树军孙树春李俊杰
- 关键词：绵羊卵丘细胞体细胞核移植
- Zebularine处理绵羊核供体卵丘细胞对其细胞周期和核移植胚胎发育效果的影响被引量：2
- 2014年
- 本研究旨在探讨甲基转移酶抑制剂Zebularine处理供体细胞的适合浓度,提高绵羊克隆胚胎的发育水平,为提高核移植效率提供理论基础。实验分别利用0、2.5、5、10 nmol/L的Zebularine处理绵羊卵丘细胞,首先将不同处理的绵羊卵丘细胞作为核供体进行体细胞核移植,比较核移植胚胎体外发育水平的不同;然后利用流式细胞仪分析处理后卵丘细胞的周期分布。结果表明:各处理组的卵裂率与对照组之间差异不显著(P>0.05),5 nmol/L Zebularine处理组桑椹胚率显著高于对照组(P<0.05),但囊胚率均高于对照组,其中5 nmol/L处理组的囊胚率显著高于对照组和其他处理组(P<0.05);经流式细胞仪检测,卵丘细胞经过5 nmol/L的Zebularine处理后处于G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,但与对照组差异均不显著(P>0.05)。结果说明,以5 nmol/L Zebularine处理的绵羊卵丘细胞为供体细胞进行核移植可显著提高胚胎的囊胚发育率。
- 苏文龙李璐孟娜娜刘梦鹤王寒阳李捷鑫曹慧田树军孙树春李俊杰
- 关键词：ZEBULARINE卵丘细胞细胞周期绵羊
