邵忠伟
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 多房棘球绦虫apomucin基因qPCR引物的筛选及潜在应用被引量：2
- 2016年
- 目的 筛选多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis）apomucin基因（Em-apo）的qPCR最佳引物，探索该基因的表达水平。 方法 根据GeneDB中4种Em-apo序列，设计引物并通过荧光定量PCR（qPCR）对引物进行分析，确定每对引物的特异性、PCR扩增效率。利用筛选得到的最佳引物，分别检测经阿苯达唑（5 μg/ml）和胰岛素（100 ng/ml）培养处理的多房棘球绦虫原头节（1 000个）Em-apo表达水平的变化，用稀释阿苯达唑的DMSO和胰岛素的PBS作为各自的对照。 结果 筛选分别得到了Em-apo-1、Em-apo-2/3、Em-apo-4和内参基因actin的特异引物各1对，qPCR熔解曲线分析结果显示，每对引物的扩增产物只出现单峰，且扩增效率均为95%～101%。qPCR分析结果显示，与DMSO对照组（1.00）相比，多房棘球绦虫原头节经阿苯达唑处理后，Em-apo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表达水平均有所上升，分别为1.51±0.27、1.39±0.30和1.14±0.18，三者差异无统计学意义（P〉0.05）；与PBS对照组（1.00）相比，原头节经胰岛素处理后，Em-apo表达水平的变化不一，其中Em-apo-1的表达水平基本不变，Em-apo-4的表达水平有所下降，而Em-apo-2/3明显下调（0.73±0.09），但三者差异无统计学意义（P〉0.05）。 结论 本实验筛选确定的Em-apo基因的qPCR引物特异，可用于Em-apo基因表达水平的检测。多房棘球绦虫原头节经阿苯达唑和胰岛素处理后，对Em-apo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表达水平有一定的影响。
- 苏梦郭小腊杨静邵忠伟丁军涛项海涛骆学农郑亚东孙晓林
- 关键词：多房棘球绦虫阿苯达唑胰岛素
- emu-miR71类似物对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响
- miRNAs是一类非编码性小RNA分子,可与靶标mRNA 3'端非编码区结合,抑制其翻译或诱导其降解.miRNAs可通过外泌体(exosome)参与细胞间的信号传递,以及天然免疫反应.miR-71在线虫、吸虫和绦...
- 何伟张学勇邵忠伟郭小腊郑亚东
- 关键词：MIRNA巨噬细胞多房棘球绦虫
- mmu-miR-222靶标基因SOCS1的鉴定
- 目的为了研究多房棘球蚴病的免疫机理,用多房棘球蚴抗原处理小鼠巨噬细胞,结果发现小鼠巨噬细胞的mi R-222的表达量下降,而它的其中一个靶标分子SOCS1基因的表达量上升。推测SOCS1为mi R-222的真正靶标分子。...
- 杨静邵忠伟苏梦郭小腊郑亚东
- 关键词：SOCS1
- 文献传递
- 具有E3泛素连接酶功能的痘病毒蛋白质被引量：1
- 2015年
- 泛素化是蛋白质的翻译后共价修饰过程,可以调节蛋白质的稳定性,涉及多种生理功能。痘病毒在进化过程中形成了扰乱和操纵宿主细胞泛素系统的多种机制,包括编码多种能干扰宿主泛素系统的病毒蛋白质。近年的研究表明痘病毒编码许多具有泛素连接酶活性的蛋白质,如膜相关RING-CH(MARCH)结构域蛋白、p28/Really Interesting New Gene(RING)finger蛋白、锚蛋白重复序列/F-box蛋白、Bric-a-Brac Tramtrack Broad complex(BTB)/Kelch蛋白及APC家族蛋白等。作者在本文着重阐述了痘病毒编码的E3泛素连接酶功能蛋白的研究概况。
- 陈轶霞邵忠伟李贵华王聪
- 关键词：痘病毒E3泛素连接酶功能蛋白
- emu-miR71类似物对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响
- 目的:通过对miRNAs和外泌体(exosome)的学习,研究存在于外泌体中的mi R-71,在寄生虫天然免疫反应中发挥的作用。方法:利用多房棘球绦虫emu-mi R-71类似物转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过Gr...
- 何伟张学勇邵忠伟郭小腊郑亚东
- 关键词：MIRNA巨噬细胞多房棘球绦虫
- 文献传递
- 绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达被引量：3
- 2015年
- 通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的ORF90核蛋白、ORF112融合蛋白、ORF117糖蛋白、ORF55膜蛋白和基因组末端的ORF134宿主范围相关基因的6段T、B细胞优势抗原表位,以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头,串联合成1条全新的多表位嵌合基因mE,将其克隆到原核表达载体pET-32中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pET32-mE质粒;用IPTG在不同条件下诱导表达,确定最佳表达条件,表达产物经SDS-PAGE分析。结果表明,重组蛋白是分子质量为41ku的融合蛋白。在IPTG浓度为0.5mmol/L,温度为37℃、诱导4h时目的蛋白的表达量最大,约占菌体的32%。Western-blotting试验表明,目的蛋白可被羊痘血清识别。
- 陈轶霞王明明龙玲邵忠伟刘俊林
- 关键词：绵羊痘病毒抗原表位多表位嵌合基因原核表达
- ova-miR-34a-5p在山羊痘病毒感染过程中的动态表达及其靶标基因的鉴定被引量：1
- 2016年
- 为了研究ova-miR-34a-5p在山羊痘病毒感染过程中的生物学功能,利用q PCR、双荧光素酶报告基因检测系统等方法,筛选了ova-miR-34a-5p的q PCR引物,分析了它在山羊痘病毒感染后不同时期的动态表达谱,筛选并验证了其靶标分子。结果显示,与山羊痘病毒感染前(0 h)相比,ova-miR-34a-5p的表达水平在感染后第0.5、4和10小时没有明显变化(P>0.05),而在感染后第24小时明显升高(P<0.05),之后在感染后第48小时又有所下降(P>0.05),这可能与病毒的DNA合成有一定的联系。在预测的ova-miR-34a-5p靶标分子中,有一些是转录因子包括mycn。荧光素酶报告基因检测结果显示,mycn-WT(野生型)+ova-miR-34a-5p类似物共转染组与mycn-WT(野生型)+阴性共转染对照组相比差异极显著(P<0.01),其相对表达量约为对照组的0.65,而mycn-mut(突变型)+ova-miR-34a-5p类似物共转染组与对照组相比差异不显著(P>0.05),表明ova-miR-34a-5p可以抑制转录因子mycn的表达。以上研究结果说明,ova-miR-34a-5p可能通过调节mycn基因的表达水平影响病毒DNA合成,但其具体机制还需要进一步研究。
- 邵忠伟郭小腊高泽乾张学勇何伟骆学农郑亚东陈轶霞
- 关键词：山羊痘病毒MYCN基因
