孙庆国
- 作品数:10 被引量:12H指数:3
- 供职机构:吉林省肝胆病医院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 核包膜蛋白gp210自身抗原基因的克隆、表达、纯化及其临床应用被引量:3
- 2007年
- 目的研究核包膜蛋白gp210基因在大肠杆菌中的稳定表达、纯化和免疫学活性鉴定。方法从人外周血单个核细胞中提取细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增gp210蛋白中含优势表位的基因片段。将该段基因克隆入PET-30a表达载体并转化到大肠杆菌BL21中表达。融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE电泳及ELISA方法进行鉴定。结果在原核表达载体中成功构建了PET30a-gp210重组体。重组体诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子量大约69 kD处有gp210融合蛋白的高效表达,经纯化获得纯度达90%的表达蛋白。ELISA检测结果显示该重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。结论应用基因工程方法,获得了gp210重组蛋白,为检测抗gp210抗体提供了特异性抗原,也为临床将抗gp210抗体作为PBC的特异性诊断指标奠定了基础。
- 孙庆国李永哲刘镭孙国军李军红
- 关键词:原发性胆汁性肝硬化GP210基因表达重组蛋白
- 肝衰竭大鼠血清诱导间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究被引量:1
- 2007年
- 目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长,肝特异性标记物逐渐出现和成熟。AFP在7天时高表达,培养142、1、28天表达逐渐减弱;白蛋白、CK-18和糖原随着诱导时间的延长,表达逐渐增强。结论密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,是一种较为有效的分离纯化方法。肝衰竭大鼠血清者血清能诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞。
- 孙庆国赵文静王日中彭慧杰
- 关键词:骨髓间充质干细胞肝衰竭
- 体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究被引量:3
- 2012年
- 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)是骨髓中一类具有多分化潜能的干细胞,在一定诱导条件下不仅可分化为中胚层的骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞,而且能分化成外胚层的神经元、神经胶质细胞及内胚层的肝细胞[1-4]。MSCs向心肌细胞的分化为扩张性心肌病、心肌梗死等的治疗带来了新的希望[5]。
- 孙庆国赵文静王日中陈锋
- 关键词:干细胞分化心肌样细胞体外定向神经胶质细胞扩张性心肌病
- 免疫细胞化学法检测咽拭、尿残渣麻疹病毒抗原试剂的研究
- 范庆杰孙国军张淑芹赵文静王莹孙庆国陈亚洁叶冬霞刘薇刘淑荣杨景华李新虹
- 该研究采用免疫细胞化学法检测长春地区麻疹患者咽拭、尿残渣麻疹病毒抗原,结果显示咽拭子麻疹病毒抗原的阳性率为73.5%,特异度为100%;尿残渣麻疹抗原的阳性率为为80.9%,特异度为100%。χ2检验统计结果显示咽拭子、...
- 关键词:
- 关键词:麻疹病毒抗原检测
- 自体间充质干细胞治疗慢性肝衰竭的研究
- 孙国军张淑芹赵振国赵文静刘薇孙庆国李军红王莹高宏英刘淑荣李秋莲
- 该研究分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,尾静脉注射入肝衰竭动物模型体内,并对注入的细胞体内定位示踪,摸索注入细胞的数量,注入细胞的功能,动物肝功能恢复情况,恢复时间,副作用,在体外动物实验基础上,选择慢性肝衰竭患者3-5例,...
- 关键词:
- 关键词:肝衰竭治疗骨髓干细胞移植治疗
- BriCyte E6和FACSCanto Ⅱ流式细胞仪在淋巴细胞亚群分析中的对比研究被引量:5
- 2014年
- 流式细胞术是在上个世纪70年代逐渐发展起来的一种集光学、电子、流体力学、计算机、生物学等多个学科,能够对细胞的物理和化学特性进行检测和分析的一种技术。最初,流式细胞仪的应用范围主要限于细胞生物学、免疫学、遗传学、植物学等基础研究领域。
- 孙庆国赵文静匡玉吉李炜周翠红董丽芳张宝华
- 关键词:淋巴细胞亚群流式细胞仪细胞生物学E6化学特性
- 肝病患者血清诱导人间充质干细胞分化为肝细胞的实验研究
- 张淑芹王莹赵文静刘薇孙庆国刘淑荣张娜叶冬霞李新虹王一歌蔡雨含
- 1.密度梯度离心、贴壁培养和消化时间相结合分离培养人、大鼠骨髓MSCs。2.从细胞形态、分化潜能、细胞表面标记三方面鉴定分离培养的骨髓MSCs。MSCs体积小,呈梭形,核浆比例大,表达MSCs的特异性标记CD105、CD...
- 关键词:
- 关键词:血清肝细胞肝病患者
- 革兰阳性球菌引起腹腔感染的耐药状况分析
- 2012年
- 2005年1月至2010年12月7年间从我院门诊和住院病人腹腔感染患者中分离到的1200株病原菌,因我院为肝病的专科医院,所以肝腹水合并感染的患者很多,而且多为混合感染。在所有分离的病原菌中,大肠埃希菌占有比例最高,可达907株(75.6%),390株(32.5%)为革兰阳性球菌(包括单独感染及合并革兰阴性杆菌感染)。用法国梅里埃分司的ATB半自动微生物鉴定仪鉴定到种,
- 孙庆国王日中彭慧颉陈锋
- 关键词:革兰阳性球菌腹腔感染耐药状况革兰阴性杆菌感染大肠埃希菌住院病人
- 荧光PCR定量检测外周血GGTmRNA-H亚型试剂盒的研制
- 周正群张立江张锐张翠萍付立波高俊芬孙庆国杨景华张丽荣王桂荣李新虹王日中王莹范宝晶王一歌
- PCR是在引物介导下,在Taq酶作用下,反复进行“热变性—复性—延伸”而扩增DNA的循环过程。荧光定量PCR是在PCR基础上采用一条相邻的荧光杂交探针检测PCR扩增产物的数量。引物序列:正义链:5´-GGATTCTCCC...
- 关键词:
- 关键词:外周血荧光PCR
- 念珠菌引起血流感染的耐药性研究分析
- 2012年
- 目的了解念珠菌引起血流感染的地位及其耐药性。方法采用科玛嘉念珠菌显色培养基及法国梅里埃公司的API20C板条做念珠菌的鉴定;用法国梅里埃公司的ATBFUNGUS3板条做念珠菌的药物敏感性实验。结果在念珠菌引起导管源性血流感染中,白念珠菌所占比例最高,其次为光滑念珠菌、近平滑念珠菌等。白念珠菌和热带念珠菌对氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑的敏感性为100%,光滑念珠菌对氟康唑为浓度依赖性敏感,克柔念珠菌对氟康唑天然耐药。结论各种念珠菌的耐药谱不同,临床一定要鉴定到种。
- 孙庆国王日中段穷陈峰彭慧颉
- 关键词:念珠菌血流感染