张晓洁
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶表达及其与衰老的相关研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)在肾小管上皮细胞转分化过程中的作用及其对衰老进程中细胞外基质(extracellular matrix,ECM)积聚增加的影响。方法分离培养3、24月龄 Wistar 雄性大鼠的原代肾小管上皮细胞,分别给予0、5、10、20～40μg/L 不同浓度的转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)刺激24h 后,用免疫细胞化学或免疫荧光方法检测细胞α-SMA、ILK、F-actin 表达;Western-blot 法检测两组细胞中纤维连接蛋白和 ILK 的表达水平;体外转录获得大鼠 ILK-c RNA 探针,检测两组细胞经刺激后 ILK mRNA 的变化。结果在0浓度 TGF-β刺激下,肾小管上皮细胞中 ILK 和 F-actin 表达水平24月龄组均比3月龄组高,但两组细胞α-SMA 表达水平均很低,且没有差别;随 TGF-β刺激浓度的增加,ILK、F-actin 和α-SMA 表达水平显著上调,其中 F-actin 与 ILK 表达增多相一致;FN 和 ILK 蛋白表达水平24月龄组分别为0.438±0.024和0.826±0.051,明显高于3月龄组的0.246±0.018和0.673±0.035(P<0.05)。结论随着肾小管上皮细胞转分化程度不断增高,ILK 表达增多,并可能通过调节 F-actin 的重排介导了转分化的过程;随增龄肾小管上皮细胞中 ILK 和 FN 表达增多,且 F-actin 表达随之增多,提示衰老肾脏的肾小管上皮细胞在应激状态下更易于发生转分化。
- 洪权冯哲陈香美付博张晓洁王建中吕杨
- 关键词：肾小管整合素类细胞外基质
- 高糖对肾小球系膜细胞间通讯功能的影响被引量：2
- 2005年
- 目的研究高糖对肾小球系膜细胞间隙连接蛋白(connexin43)表达和细胞间通讯功能的影响。方法分离培养大鼠肾小球系膜细胞,调整培养液葡萄糖浓度为以下3组:正常葡萄糖组(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(30mmol/L葡萄糖)和渗透压对照组(5.5mmol/L葡萄糖加24.5mmol/L甘露醇),于37℃5%CO2条件下培养24、48h后,利用激光共聚焦显微镜和荧光漂白恢复(FRAP)技术检测细胞间通讯功能,并应用Northern印迹和细胞免疫化学、Western印迹方法检测connexin43mRNA和蛋白质表达,比较3组之间的差异。结果正常葡萄糖浓度培养下系膜细胞表达丰富的connexin43,细胞间通讯功能良好。高糖培养的系膜细胞细胞间通讯功能下降,荧光淬灭后的恢复比例和速度显著低于正常糖组(P<0.05)。同时高糖环境下培养的系膜细胞connexin.43mRNA和蛋白质表达均较正常糖组显著下降(P<0.05)。渗透压对照组与正常糖组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论高糖可抑制connexin43的基因和蛋白质表达及细胞间通讯功能,可能是糖尿病肾病系膜细胞表型和功能异常的重要原因之一。
- 张晓洁陈香美冯哲傅博刘维萍蔡广研
- 关键词：高血糖症信号转导系膜细胞
- 一种荧光响应的自愈性水凝胶及其制备方法
- 本发明提供了一种荧光响应的自愈性水凝胶及其制备方法。该制备方法包括：在90℃‑100℃下，将聚乙烯醇、壳聚糖、脂多糖溶于水中，得到溶胶，加热1.5h‑4h，其中，溶胶中聚乙烯醇的质量浓度为20％‑40％；向溶胶中加入小分...
- 许猛徐泉田煜李明李维军张晓洁杨晨
- 肾小球系膜细胞间通讯在高糖引起的衰老相关表型改变中的作用
- 目的观察高糖培养条件下系膜细胞衰老相关表型改变,并探讨细胞间隙连接通讯在此病理生理改变过程中的作用和意义。方法分离培养3月龄大鼠肾小球系膜细胞,分为以下六组:低糖组(5.5mM葡萄糖)、高糖组(30mM葡萄糖)、渗透压对...
- 张晓洁陈香美付博冯哲王建中
- 文献传递
- 抑制细胞间通讯功能可加速人成纤维细胞的衰老被引量：3
- 2007年
- 目的 研究间隙连接蛋白connexin43在人成纤维细胞衰老过程中的调节作用。方法 设计并合成针对人connexin43的双链RNA（siRNA），抑制人二倍体成纤维细胞WI-38细胞的connexin43表达和细胞间通讯功能，观察对其衰老相关β-半乳糖苷酶（SA—β-gad染色阳性率、细胞增殖能力、细胞周期调节蛋白P27、P21表达水平等衰老表型的影响。结果 我们合成的siRNA—cx43可高效、特异的抑制connexin43 mRNA和蛋白质表达及细胞间通讯功能。转染WI-38细胞后，细胞增殖能力降低、细胞SA—β-gal染色阳性率（75．32±5．17）较对照组（32．48±3．94）和转染siRNA—con组（37．81±4．12）细胞升高（P〈0．05），P27、P21表达增加，转染siRNA—cx43的WI-38细胞增殖能力显著降低，细胞变扁平、肥大，细胞SA—β-gal染色阳性率达100％，细胞提前出现衰老。结论 间隙连接蛋白connexin43对WI-38细胞的衰老进程有重要的调节作用，其表达减少和细胞间通讯功能降低，可以促进WI-38细胞衰老进程。
- 刘维萍陈香美孙雪峰张晓洁洪权冯哲
- 关键词：连接蛋白43细胞间通讯细胞衰老
- 整合素连接激酶对鼠肾小球系膜细胞及人成纤维细胞衰老的影响
- 目的探讨整合素连接激酶(Integrin-linked kinase,ILK)对鼠肾小球系膜细胞及人成纤维细胞衰老的影响,揭析ILK在衰老中的作用。方法采用3个月、26个月龄雄性Wistar大鼠肾小球系膜细胞及人成纤维细...
- 李志辉陈香美傅博张晓洁吴镝洪权
- 文献传递
- 抑制线粒体膜枸橼酸转运蛋白表达可显著降低高糖所导致的大鼠系膜细胞过度分泌细胞外基质
- 目的目前认为糖尿病的器官损伤大部分是由于高血糖导致的线粒体呼吸链中产生的活性氧所引起的。因此抑制线粒体的呼吸链而又不影响细胞功能的方法,可能成为抑制高糖所致的损伤的新手段。本文用RNAj方法及利用枸橼酸的竞争性抑制物1,...
- 吴镝洪权陈香美张晓洁冯哲傅博丁瑞张萍
- 文献传递
- 人肾尿酸转运蛋白1基因克隆、抗体制备及其在肾小管上皮细胞中的定位被引量：5
- 2005年
- 目的制备人尿酸转运蛋白1(hURAT1)多克隆抗体并利用该抗体检测hURAT1在肾组织中的表达及亚细胞定位。方法用RT PCR方法从人肾组织中扩增出hURAT1基因全长及其抗原表位区,分别构建绿色荧光蛋白hURAT1pEGFP融合表达载体和GST融合表达载体pGEX5X1。诱导表达并纯化GST融合蛋白,利用改良的蛋白免疫法制备多克隆抗体;Westernblot及免疫组化方法观察人肾组织的hUART1基因产物的表达。将hURAT1pEGFP重组质粒转染细胞,激光共聚焦显微镜动态观察hU RAT1pEGFP在肾小管上皮细胞LLC PK1细胞膜的定位及表达。结果成功获得高效特异的hURAT1抗体,利用该抗体证实hU RAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘,Westernblot证实hURAT1蛋白在肾组织中表达。激光共聚焦显微镜动态观察显示hURAT1pEGFP定位于LLC PK1细胞膜。结论制备的hURAT1抗体及其全长基因可用于hURAT1基因的生理功能及病理研究,hURAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘。
- 吴镝张萍陈香美洪权许国双张晓洁冯哲丁瑞侯剀
- 关键词：尿酸荧光抗体技术抗体
- 一种荧光响应的自愈性水凝胶及其制备方法
- 本发明提供了一种荧光响应的自愈性水凝胶及其制备方法。该制备方法包括：在90℃‑100℃下，将聚乙烯醇、壳聚糖、脂多糖溶于水中，得到溶胶，加热1.5h‑4h，其中，溶胶中聚乙烯醇的质量浓度为20％‑40％；向溶胶中加入小分...
- 许猛徐泉田煜李明李维军张晓洁杨晨
- 文献传递
