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致倦库蚊GSTe1和CYP9J40的时空表达特点被引量：1: 2014年; 【目的】细胞色素P450单加氧酶(P450)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是生物降解外源有毒物质的重要解毒酶家族,在昆虫适应杀虫剂选择的过程中发挥重要的作用。以往在致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus对硫磷抗性研究中,发现了一个Epsilon GST基因(GSTe1)和一个P450 CYP9家族基因(CYP9J40)在抗性品系中高表达。研究它们在蚊虫中的时空表达模式对理解它们的生物学功能有重要意义。【方法】本研究利用实时定量PCR和原位杂交的方法探讨了这两个解毒酶基因在蚊虫中的时空表达。【结果】定量PCR显示GSTe1和CYP9J40在对硫磷抗性蚊虫中的转录水平分别是敏感蚊虫的4.2倍和1.9倍,它们在蚊虫整个生活周期的表达模式相似,均为幼虫期表达量相对较低,从蛹期开始表达量显著升高,到成虫期雌虫达到顶峰,而雄虫与幼虫期表达量相当。原位杂交结果表明这两个基因在肌肉、消化道和卵巢中都有表达,且CYP9J40的表达更广泛,在脑和胸部神经节也有明显表达。【结论】基因表达的发育阶段特异性和广泛的组织分布说明GSTe1和CYP9J40除了参与蚊虫对杀虫剂的抗性,还可能具有其它生理功能,如对雌虫发育有重要的影响。; 王炜陈少良崔峰; 关键词：致倦库蚊解毒酶 P450 GST 抗药性

唾液腺蛋白Armet和ACE在豌豆蚜与植物互作中的功能研究: 蚜虫和寄主植物之间的相互作用是复杂的。在长期的进化过程中,植物逐渐形成了一套组成性和诱导性的防御机制来应对蚜虫取食,而蚜虫则通过取食、增殖等行为降低植物的防御机制对其影响。蚜虫通过唾液腺分泌具有效应子作用的蛋白去调控植物...; 王炜; 关键词：豌豆蚜调控蛋白取食行为唾液腺

小立碗藓GPX基因家族的功能分化与催化特性研究: 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase，GPX)作为一种清除活性氧的关键酶，在植物抵御外界生物及非生物胁迫的过程中发挥着重要的作用。以往对GPX的研究主要集中于被子植物，而对植物中另一大类群-苔...; 王炜; 关键词：小立碗藓谷胱甘肽过氧化物酶基因表达

小立碗藓GPX家族的功能分化与催化特性研究: 2015年; 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)在植物抵抗氧化胁迫中发挥重要作用。该研究从小立碗藓(Physcomitrella patens)基因组中挖掘到3个GPX基因,分别命名为PpGPX1、PpGPX2和PpGPX3。其中PpGPX1和PpGPX3只含有1个外显子,而PpGPX2含有6个外显子。表达模式分析发现PpGPX1和PpGPX2在检测的所有条件下均表达,而PpGPX3在检测的所有条件下均不表达。蛋白亚细胞定位分析发现,PpGPX1蛋白定位在细胞质,而PpGPX2蛋白定位在叶绿体。在大肠杆菌中表达并纯化了PpGPX1和PpGPX2蛋白,酶学性质分析发现,PpGPX1和PpGPX2蛋白均只能利用Trx电子供体系统,而不能利用GSH电子供体系统;PpGPX2蛋白对过氧化物底物的催化活性和催化效率均高于PpGPX1。基因结构、表达模式、亚细胞定位和蛋白酶学性质的差异预示小立碗藓GPX基因家族成员发生了功能分化,将PpGPX2蛋白的Pro158、Phe167和Phe172氨基酸残基均突变为Ala,发现突变体蛋白对底物催化活性降低,说明这3个氨基酸位点对PpGPX2蛋白具有重要催化活性。; 王炜杨志灵杨海灵; 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶小立碗藓亚细胞定位酶学性质分析

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王炜