李洋
- 作品数:34 被引量:127H指数:6
- 供职机构:武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B-叉头框蛋白信号通路在盆腔脏器脱垂中的表达被引量:2
- 2017年
- 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)-叉头框蛋白(forkhead box O1,FOXO1)信号通路在盆腔脏器脱垂(pelvic organ prolapse,POP)中的表达及其在POP中的发病机制。方法选取2013年1月至2015年1月因POPⅢ度、Ⅳ度于武汉大学人民医院行全子宫切除术的患者20例(POP组)和同期因其他良性妇科疾病行全子宫切除术的患者20例(对照组),采用蛋白质免疫印记检测骶韧带组织中Akt、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylation protein kinase B,p-Akt)、FOXO1、磷酸化(phosphorylation,p-)FOXO1、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase1,GPX1)、锰超氧化物歧化酶(manganesesuperoxidedismutase,Mn-SOD)蛋白表达情况。结果 POP组较对照组,骶韧带组织中p-Akt/Akt、p-FOXO1/FOXO1表达比例明显上调,抗氧化蛋白GPX1、Mn-SOD表达下调。结论POP组织中PI3K-Akt-FOXO1信号通路被激活,并下调抗氧化蛋白GPX1、Mn-SOD表达,这一分子机制可能参与POP发生发展。
- 李秉枢洪莉程丽薇郭文珺刘成汤建明李洋李新
- 关键词:盆腔器官脱垂MN-SOD
- 利用慢病毒载体建立过表达Nfe2l2基因的L929细胞株实验研究
- 2018年
- 目的利用慢病毒载体建立过表达Nfe2l2基因的L929细胞株,为探讨Nfe2l2基因在结缔组织成纤维细胞细胞外基质(ECM)重构中的作用奠定实验基础。方法 2014年12月—2015年5月,通过双酶切将Nfe2l2目的基因连接到GV341载体(Ubi-MCS-3FLAG-SV40-puromycin),经扩增、转化、验证、测序、质粒抽提,将携带目的基因的工具GV341载体质粒及病毒包装辅助质粒Helper1.0、Helper2.0转染293T细胞,完成慢病毒包装及质量检测后获取慢病毒工具载体LV-Nfe2l2,病毒感染L929细胞72 h后筛选稳定表达的细胞株L929/LV-Nfe2l2,采用Realtime qPCR测定Nfe2l2的表达。结果经比对,构建的LV-Nfe2l2阳性克隆序列与目的基因Nfe2l2相符;L929细胞达到80%感染效率的最佳感染条件为:在ENi.S培养基中进行感染,设定感染复数(MOI)为8~10,感染时间为72 h。Real-time qPCR结果显示,经筛选的L929/LV-Nfe2l2细胞中Nfe2l2基因表达丰度为高(ΔCt值≤12)。结论本研究成功构建了一种过表达Nfe2l2基因的慢病毒载体;LV-Nfe2l2感染L929细胞后可实现目的基因的高表达,经筛选的L929/LV-Nfe2l2细胞株可用于后续实验研究。
- 刘成汤剑明李洋杨将李倩男刘耀丹洪莉
- 关键词:转染慢病毒属成纤维细胞细胞外基质
- 盆底功能障碍性疾病的非手术治疗研究进展被引量:11
- 2015年
- 随着人口老年化盆底功能障碍性疾病(PFD)越来越成为困扰中老年女性的突出问题。目前,主流观点认为仅中重度患者适于手术治疗,轻度患者一般不主张手术治疗,并且手术治疗尚存在创伤大、复发率较高及治疗成本高等不足。由此,非手术治疗在轻中度PFD患者治疗策略中愈发受到关注。本文综述了现有的多种非手术治疗方法,探讨其治疗机制,并比较不同疗法的优势与不足,简要概括主要疗法的应用与优缺点,总结非手术治疗的价值所在。
- 李洋洪莉
- 关键词:盆底肌肉训练功能性电刺激生物反馈
- 氧化应激对盆底器官脱垂患者子宫旁韧带组织细胞细胞外基质代谢的影响被引量:15
- 2016年
- 目的检测盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫旁韧带组织中基质代谢相关Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COL1)、弹性蛋白(elastin)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP-9)以及氧化损伤相关8-羟基脱氧鸟苷酸(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine urine,8-OHdG)含量的变化,检测人子宫旁韧带成纤维细胞在氧化应激作用下基质代谢相关以上各项指标的变化,为研究氧化应激在POP发生发展中的作用机制提供实验基础和理论依据。方法选择2012年10月至2014年10月在武汉大学人民医院因盆腔脏器脱垂Ⅱ-Ⅳ度(POPⅡ~POPⅣ)行子宫全切术的患者50例(POP组)和因其他良性妇科疾病行子宫切除术患者40例(对照组),采用免疫组化方法检测患者的宫旁韧带(子宫骶韧带、子宫主韧带)组织中COL1、elastin、MMP-9、8-OHdG的表达;过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)处理人子宫旁韧带成纤维细胞,建立氧化应激细胞模型,Western blot检测该模型细胞中COL1、elastin和MMP-9蛋白表达。结果免疫组化结果显示,与对照组相比,POP患者宫旁韧带组织中COL1、elastin表达均降低,MMP-9和8-OHdG表达升高;Western blot与免疫组化具有相一致的结果。结论氧化应激可以引起宫旁韧带成纤维细胞细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分改变,可能参与POP的发生发展。
- 杨青刘成李秉枢张琦钒李洋胡鸣赵杨洪莉
- 关键词:盆腔器官脱垂弹性蛋白8-羟基脱氧鸟苷氧化应激
- 人子宫旁韧带成纤维细胞机械力作用下线粒体形态与细胞衰老的研究被引量:2
- 2015年
- 目的探讨人子宫旁韧带成纤维细胞在机械力作用下线粒体形态及细胞衰老水平的改变。方法选取10例武汉大学人民医院收治的因宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)II-III级行阴式全子宫切除术患者的宫旁韧带(主韧带、骶韧带),进行原代培养,使用四点弯曲细胞力学加载系统对细胞进行力学加载,加力时间设定为4 h,加力大小为0、1 333μstrain(1 mm)、5 333μstrain(4 mm),把不加力的细胞设为对照组。采用新型透射电子显微镜HT 7 700观察5 000倍视野下线粒体形态变化,采用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老。结果随着机械力大小的增加,细胞的线粒体形态发生改变,线粒体出现空泡化,细胞骨架结构改变,细胞内出现凋亡小体,染色呈蓝色的细胞数量增多,细胞衰老率增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定范围内的机械力可导致人子宫旁韧带成纤维细胞的线粒体发生损伤性改变,并促进细胞衰老。
- 胡鸣洪莉洪莎莎闵洁赵杨杨青张琦钒汤剑明李洋
- 关键词:成纤维细胞线粒体细胞衰老盆腔脏器脱垂
- 间充质干细胞衰老机制的研究进展
- 2018年
- 间充质干细胞(MSCs)具有多向分化潜能,然而随着年龄的增加,其数量和功能会相应下降,从而影响机体生物学功能,最终导致衰老和死亡。因此,为了进一步阐述MCSs细胞衰老的特性,本文就MSCs分化与其衰老表现最新进展,MSCs衰老过程中的内在改变如端粒缩短、表观遗传表型改变、基因和信号通路及其免疫特性变化,以及延缓MSCs衰老的手段等进行总结。以期为深入认识MSCs衰老本质,对合理临床应用提供理论依据和启示。
- 刘耀丹洪莉李洋
- 关键词:间充质干细胞衰老抗衰老
- 不同程度机械力作用下人子宫旁韧带成纤维细胞8-羟基脱氧鸟苷及丙二醛水平变化的研究被引量:2
- 2015年
- 目的探究不同程度机械力作用下人子宫旁韧带成纤维细胞DNA氧化损伤产物8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG)及脂质过氧化产物丙二醛水平变化。方法选取2014年3月至2014年9月武汉大学人民医院妇产科收治的因非盆腔脏器脱垂(POP)的子宫良性疾病行阴式全子宫切除术患者的宫旁韧带(主韧带、骶韧带)组织标本制备的传代细胞为研究对象。根据对细胞是否加力,将其分为研究组(n=6,对黏附在爬片上的细胞进行加力)与对照组(n=3,对黏附在爬片上的细胞未加力),研究组再按照不同的加力大小,进一步分为研究A亚组(n=3,加力大小为1 333μ)和研究B亚组(n=3,加力大小为5 333μ)使用四点弯曲细胞力学加载系统对细胞进行力学加载,加力大小分别为0,1 333,5 333μ,加力频率为0.1 Hz,加力时间为4h。采用细胞免疫荧光法检测3组细胞内8-OhdG水平,硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞脂质过氧化产物丙二醛水平。结果 1研究B亚组细胞内8-OhdG相对荧光强度(0.087±0.006)较研究A亚组(0.074±0.005)增强,两组分别与对照组(0.010±0.004)比较,差异均有统计学意义(t=11.286,19.633;P<0.05)。2研究A亚组细胞内丙二醛水平[(11.95±2.07)nmoL/mgprot]较对照组[(3.18±0.50)nmoL/mgprot]无明显升高,两组比较,差异无统计学意义(t=1.509,P>0.05);而研究B亚组细胞内丙二醛水平[(65.98±11.43)nmoL/mgprot]较对照组显著升高,两组比较,差异有统计学意义(t=10.800,P<0.05);研究A组丙二醛水平与研究B亚组比较,差异有统计学意义(t=9.290,P<0.05)。结论一定范围内的机械力可诱导人子宫旁韧带成纤维细胞内DNA氧化损伤产物8-OhdG及脂质过氧化物丙二醛水平增加。
- 赵杨洪莉李秉枢洪莎莎胡鸣杨青汤剑明李洋张琦钒
- 关键词:盆腔脏器脱垂成纤维细胞8-羟基脱氧鸟苷丙二醛
- 超声造影结合参数图像处理在诊断卵巢恶性肿瘤中的应用价值被引量:13
- 2014年
- 目的探讨超声造影结合参数图像处理在卵巢肿瘤的诊断及良恶性鉴别中的应用价值。方法随机选取50例卵巢肿瘤的患者,根据其后期临床病理诊断结果分为良性肿瘤组与恶性肿瘤组。术前进行超声造影检查,记录其超声造影检查结果以及各病例时间—强度曲线(TIC曲线),并结合参数图像处理定量分析TIC曲线各指标,最后判断超声造影结合参数图像处理的应用价值。结果 50例患者与术后病理检查结果相比较,常规超声的良性肿瘤检出率为51.85%,恶性肿瘤检出率为39.13%;超声造影结合参数图像处理的良性符合率为77.78%,恶性符合率为73.91%,良恶性检出率比较差异有统计学意义。良恶性肿瘤造影的图像有差异,其定量分析良恶性肿瘤TIC曲线的指标:达峰强度(Imax)、始增时间(RT)、达峰时间(TTP)、平均渡越时间(m TT)差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论超声造影检查能较好显示卵巢良恶性肿瘤之间的差异,结合参数图像处理软件能进一步提高良恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断价值。
- 胡鸣洪莉陈璐洪莎莎赵杨杨青张琦钒汤剑明李洋
- 关键词:卵巢肿瘤超声检查造影剂
- 湖北省京山县乡镇卫生院妇女健康保健工作现况调查被引量:1
- 2015年
- 目的:了解湖北省京山县乡镇卫生院妇产科的预防保健工作和计划生育工作开展的现况,为提高其预防保健工作和计划生育工作能力提出建议。方法:采取随机抽样方法在湖北京山县14所乡镇卫生院中随机抽取7所进行回顾性研究,并进行描述性统计分析。结果:预防保健工作现况调查显示京山县乡镇卫生院妇科疾病检出率与全国妇科疾病检出率相比明显较低,孕妇保健手册建立率低,高危孕妇转诊率高;计划生育工作现况调查显示7所乡镇卫生院生育手术数量较多。结论:应结合乡镇卫生院与当地居民卫生健康需求,提升京山县乡镇卫生院妇女健康保健工作的效能,提高重大妇科疾病的检出率,加强孕产妇保健工作,进一步提高京山县乡镇卫生院的服务能力。
- 赵杨洪莉李秉枢吴德斌洪莎莎胡鸣杨青汤剑明李洋张琦钒
- 关键词:乡镇卫生院妇女健康预防保健计划生育
- 8-羟基脱氧鸟苷和4-羟基壬烯醛在盆底器官脱垂患者子宫骶韧带中的表达被引量:3
- 2015年
- 目的探讨盆底器宫脱垂患者子宫骶韧带8一羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)及4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)的表达情况,并分析其与盆底器官脱垂(pelvicorganprolapsed,POP)的发病关系。方法选取2012年6月至2014年6月在武汉大学人民医院59例行子宫全切术患者资料,分为Non—POP组20例(对照组)、轻度POP组17例(POPI—Ⅱ)、重度POP组22例(POPⅢ~Ⅳ)3组,于术中切取患者部分子宫骶韧带组织,通过免疫组化的方法检测8-OHdG和4-HNE的表达情况,比较其在各组的差异并作相关性分析。结果8-OHdG和4-HNE在POP组中的表达高于对照组,其中重度POP组最高,各组比较差异有统计学意义(P〈0.05),并且两者在POP组表达呈正相关(P〈0.05)。结论氧化损伤随脱垂程度的加重而增加,子宫骶韧带组织细胞的氧化损伤可能是POP的发病机制之一。
- 李洋洪莉刘成洪莎莎杨青汤剑明张琦钒
- 关键词:8-OHDG盆底器官脱垂