江军
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省农业科学院科技创新能力提升工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立被引量：1
- 2014年
- 在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的Tet B基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因Tet B的引物,对PCR反应条件进行优化,以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板,未出现非特异性扩增条带,PCR扩增条带单一。将Tet B基因克隆至p MD 19T载体,以重组质粒为标准品,确定了最低检测拷贝数,经测定,最低检测拷贝数为1.54×103。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板,确定了最低细菌检出量,经测定,最低检测细菌数量为4.6×103个。该方法为建立临床快速检测副猪嗜血杆菌耐药性奠定了基础。
- 江军李军星康磊袁秀芳徐丽华王一成
- 关键词：副猪嗜血杆菌PCR检测
- iscR基因缺失对副猪嗜血杆菌荚膜多糖合成基因簇中部分相关基因表达的影响被引量：1
- 2016年
- 为研究iscR基因对副猪嗜血杆菌(HPs)荚膜多糖(CPS)合成相关基因表达的影响,本研究利用荧光定量PCR方法检测野毒株(290A1-WT)和iscR基因缺失株(290A1-△iscR)内构成CPS基因簇相关基因funA、wbgY、capD、wza和funK的表达量变化;并利用透射电镜观察两菌株体外培养和与猪血清作用后菌体表面荚膜的差异。结果显示:体外培养时,iscR基因缺失株wza的表达量一直高于野毒株的表达量,在OD_(600nm)值为0.2时差异显著(p<0.05),而capD在OD_(600nm)值为0.2时表达量显著降低(p<0.05);其他基因表达量无明显差异。当菌株与猪血清作用后,iscR基因缺失株中的capD、wza和funK的表达量均显著高于野毒株(p<0.05);在血清作用10 min时,funA的表达量显著低于野毒株(p<0.05);在血清作用20 min后,wbgY的表达量显著高于野毒株(p<0.05)。透射电镜结果显示,与血清作用前两菌株均无明显荚膜生成,与猪血清作用10 min后野毒株荚膜厚度达到100 nm,而iscR基因缺失株仍无明显荚膜生成,该结果说明iscR基因可能在一定程度上会促进HPs表面荚膜的生成。本研究结果为HPs CPS合成相关基因功能及其表达调控研究提供一些新的依据。
- 江军王一成姜平李军星袁秀芳徐丽华吴旺霞
- 关键词：副猪嗜血杆菌荚膜多糖基因表达
- 浙江省副猪嗜血杆菌血清型调查及其潜在毒力相关基因分析被引量：12
- 2016年
- 为了掌握浙江省近几年副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPs）的血清型流行情况,通过PCR扩增的方法来鉴定浙江省2010—2015年从113个猪场中分离鉴定的副猪嗜血杆菌血清型,同时检测6个可能与副猪嗜血杆菌毒力相关的基因（B14、D45、nha C、fhu A、hhd A、hhd B）,并分析其与血清型的相关性。结果显示：浙江省副猪嗜血杆菌近几年的优势血清型为5/12型、4型、13型和14型,未检测到3型、9型、11型和15型;2010—2015年副猪嗜血杆菌的主要血清型流行趋势并未发生明显改变,部分猪场存在2种血清型菌株共感染现象;对潜在毒力基因的检测结果表明,D45基因在毒力菌株中出现的比例（82.4%~87.5%）高于其在无毒力菌株中的检测比例（50%）;fhu A基因在强毒力菌株中的检测比例（55%）却低于其在中等毒力和无毒力菌株中的检测比例（70.6%~90%）;其他4个毒力基因（B14、nha C、hhd A、hhd B）在所有菌株中均有较高的比例。提示：副猪嗜血杆菌潜在的毒力基因与血清型之间并没有明显的相关性。
- 江军姜平王一成李军星袁秀芳徐丽华吴旺霞
- 关键词：副猪嗜血杆菌血清型毒力相关基因
