刘顺
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 供职机构：宁波大学生命科学与生物工程学院教育部应用海洋生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划浙江省大学生科技创新项目宁波市科技创新团队项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学天文地球医药卫生更多>>
- 拟穴青蟹血卵涡鞭虫病的流行病学分析
- 为解析拟穴青蟹血卵涡鞭虫病的流行病学特征,本研究于2012年4月-11月采用跟踪监测和实地调查的方法,结合病原分离鉴定及病蟹的病理学观察,统计分析了浙江省温州地区养殖拟穴青蟹血卵涡鞭虫病的流行情况.结果表明,患病拟穴青蟹...
- 刘顺戴瑜来周素明郑晓叶王国良
- 关键词：拟穴青蟹血卵涡鞭虫流行病学
- 三疣梭子蟹Toll样受体信号通路关键元件的分子克隆及表达分析
- Toll样受体(TLR,Toll like receptor)是近年发现的一类重要的模式识别受体,在抗病免疫应答过程中发挥重要作用。本研究从三疣梭子蟹血淋巴的cDNA中克隆到了一种Toll分子(Pt-Toll)以及Tol...
- 周素明刘顺李猛袁雪梅王国良
- 三疣梭子蟹Toll样受体基因的克隆及表达分析
- 目前，各种病害的频发已经成为制约我国三疣梭子蟹养殖业健康发展的重要因素。因此，对三疣梭子蟹免疫系统的研究将有助于在疾病的防治、预防、品种选育及三疣梭子蟹免疫抗病机理等领域的研究和阐明具有重要意义和价值。 Toll样受体...
- 刘顺
- 关键词：三疣梭子蟹基因克隆基因表达
- 可口革囊星虫Phasolosma esculenta体腔液的抗菌活性研究被引量：6
- 2015年
- 可口革囊星虫Phasolosma esculenta为我国特有的一种可食用海洋经济动物.本文以可口革囊星虫为研究对象,利用琼脂径向扩散、涂板计数等方法研究其体腔液中物质的抗菌活性以及理化特性.研究结果表明,可口革囊星虫体腔液中存在抗菌活性物质,并且该物质对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus等3种革兰氏阳性细菌具有明显的抗菌效果,但对大肠杆菌Escherichia coti等3种革兰氏阴性细菌以及葡萄牙假丝酵母Candida lusitaniae抗菌效果不明显.结果还发现：（1）不同提取方式出现明显不同的抗菌效果,与体腔液上清液和2％乙酸提取体腔液所得提取物的抗菌效果相比,超声破碎处理提取物的抗菌效果最为明显.（2）理化特性研究发现该抗菌物质抗菌效力持久,抗冻融,并且在5～30℃范围内最适抗菌温度约为25℃;该物质不耐高温,60℃处理10 min后该物质的抗菌作用完全消失;此外,该物质的抗菌作用不依赖金属离子的存在.（3）超滤管过滤截留琼脂扩散结果表明该抗菌物质的分子量在100 kDa以上.
- 梁倩蓉于曙光刘顺王国良郑晓叶彭雪美惠周素明
- 关键词：可口革囊星虫体腔液抗菌物质理化特性
- 香鱼假单胞菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了香鱼假单胞菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包括SYBR Premix Ex Taq<Sup>TM</Sup>II试剂10.0μl，浓度为10μM的上游引物溶液、下游引物溶液各0.8μl；检测方法...
- 王国良张继挺刘顺周涛
- 文献传递
- 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)血卵涡鞭虫病的流行病学分析被引量：5
- 2014年
- 为解析拟穴青蟹(Scylla paramamosain)血卵涡鞭虫病的流行病学特征,于2012年4—11月采用跟踪监测和实地调查的方法,结合病原分离鉴定及病蟹的病理学观察,统计分析了浙江省温州地区养殖拟穴青蟹血卵涡鞭虫病的流行情况。结果表明,患病拟穴青蟹的肝胰腺、肌肉、鳃等组织病理显示有大量血卵涡鞭虫侵染,并能用PCR方法快速检出。温州地区养殖拟穴青蟹血卵涡鞭虫病在每年5—11月均有发生,7—9月为集中发病时间,死亡高峰出现于8—9月之间,年份间(2010—2012)与发病率无相关性,而不同月份对病害的发生有极显著影响(P<0.01)。不同发育阶段以脱壳期的发病率相对较高,发病蟹的规格主要以50g以下的幼蟹和250g以上的成蟹为主。拟穴青蟹血卵涡鞭虫病的发生与水温(r=0.756)和盐度(r=0.631)变化关系较密切,夏、秋季节受梅雨、台风影响而引起水温和盐度的剧烈变化可能是暴发血卵涡鞭虫病的诱发因素。
- 刘顺戴瑜来周素明郑晓叶王国良
- 关键词：鞭虫病青蟹肝胰腺血淋巴
- 三疣梭子蟹B型清道夫受体蛋白的原核表达及细胞、组织分布被引量：2
- 2018年
- B型清道夫受体是清道夫受体超家族成员,可识别多种配体,在机体脂类转运及免疫防御过程中发挥重要作用。为深入研究三疣梭子蟹B型清道夫受体(Pt-SRB)的功能,本实验在前期工作基础上构建了Pt-SRB胞外结构域原核表达载体,并成功获得了重组蛋白rPt-SRB。利用亲和层析方法获得纯化的rPt-SRB,并将纯化rPt-SRB蛋白免疫大鼠获得抗rPt-SRB重组蛋白免疫抗血清以用于后续研究。SDS-PAGE检测发现,体外诱导表达重组rPt-SRB以包涵体的形式出现在大肠杆菌BL21裂解液的沉淀中,分子量大小约为49.18 ku。Western-Blot分析表明,大鼠抗rPt-SRB血清能与rPt-SRB特异性结合。本实验还利用免疫荧光技术,对Pt-SRB在三疣梭子蟹血淋巴细胞的定位及不同组织中的分布进行研究。结果显示,Pt-SRB在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏、肌肉组织中均有分布,但不同组织中Pt-SRB的分布不同。免疫荧光结果显示,绿色荧光信号在消化道及腺体结缔组织中较强,另外在肝小管上皮、鳃丝上皮细胞中亦有较强的阳性信号,表明PtSRB蛋白在上述组织结构中分布较广;在血淋巴细胞中,绿色荧光信号主要分布于细胞质和细胞膜,在细胞核中没有明显荧光信号,提示Pt-SRB在三疣梭子蟹血淋巴细胞的细胞质和细胞膜上表达。本结果将为三疣梭子蟹B型清道夫受体蛋白的生理及免疫学功能的研究奠定基础。
- 杨宁杨宁周素明王国良刘顺
- 关键词：三疣梭子蟹原核表达
- 香鱼假单胞菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了香鱼假单胞菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包括SYBR Premix Ex Taq<Sup>TM</Sup>II试剂10.0μl，浓度为10μM的上游引物溶液、下游引物溶液各0.8μl；检测方法...
- 王国良张继挺刘顺周涛
- 文献传递
- 几种理化因子对刺激隐核虫包囊及幼虫活力的影响被引量：5
- 2015年
- 选择温度、盐度等环境因子和不同种类及浓度梯度的化学药剂进行单因素试验,研究其对刺激隐核虫包囊孵化和幼虫活性的影响.实验结果显示,温度对刺激隐核虫包囊的孵化具有显著影响;盐度对刺激隐核虫包囊的孵化和幼虫活性均有显著影响.选择的高锰酸钾、双氧水、硫酸铜、盐水、福尔马林浸泡药物对包囊或幼虫也均有一定影响,而采用福尔马林结合低盐度海水进行浸泡处理,既可有效杀灭包囊和幼虫,又可减少环境污染并降低生产成本.
- 郑晓叶刘顺周旻曦王国良
- 关键词：刺激隐核虫温度盐度化学药剂
- 三疣梭子蟹PtToll-1受体的原核表达及组织、细胞分布研究
- 2018年
- 为深入研究三疣梭子蟹Toll受体的功能,在前期工作的基础上构建了Pt Toll-1胞外结构域原核表达载体,并成功获得其重组蛋白。将获得的重组蛋白免疫小鼠获得抗此重组蛋白免疫抗血清用于后续研究。SDSPAGE结果表明,体外诱导表达重组蛋白r Pt Toll-1以包涵体的形式出现在大肠杆菌裂解液的沉淀中,分子量大小约为87.18 k D;Western-Blot分析表明,小鼠抗血清能与r Pt Toll-1特异性结合。利用免疫荧光及细胞免疫化学方法对三疣梭子蟹Pt Toll-1在消化道、肝胰腺、鳃、心脏和肌肉等组织及血淋巴细胞中的分布进行研究。此外成功构建Pt Toll-1完整蛋白的真核表达载体p EGFP-N2-Pt Toll-1,并转染HEK293T细胞研究其在哺乳动物细胞HEK293中的表达。组织免疫荧光结果显示,Pt Toll-1在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏及肌肉等组织中均有分布,但在鳃及消化道的组织结构中表达较强;细胞免疫荧光及免疫化学结果均表明Pt Toll-1主要分布在血淋巴的细胞膜上;激光共聚焦显微技术观察发现,p EGFP-Pt Toll-1融合蛋白也主要在HEK-293T细胞膜上表达。研究结果将为三疣梭子蟹Toll受体蛋白的免疫学功能的研究奠定基础。
- 张丹枫王国良杨宁杨宁张鑫周素明
- 关键词：三疣梭子蟹TOLL受体胞外结构域原核表达真核表达细胞定位
