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MDS铁过载小鼠模型的建立及铁过载对小鼠生存的影响: 金鑫隋松男邢艺徐萍曹小立王露桥孟娟霞卢文艺崔蕊赵明峰

铁过载对骨髓损伤小鼠造血功能的作用及机制研究被引量：5: 2014年; 目的探讨铁过载对骨髓损伤小鼠造血功能的作用及可能机制.方法将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、铁剂组、照射组、照射＋铁剂组,每组5只.通过给予小鼠4Gyγ射线照射及腹腔注射右旋糖酐铁建立骨髓损伤小鼠铁过载模型,观察各组小鼠铁负荷情况及骨髓单个核细胞（BMMNC）内可变铁池水平,检测各组小鼠外周血常规的改变;检测BMMNC数,红系、粒-单核系细胞比例及造血干/祖细胞功能改变;分析骨髓细胞,红系和粒-单核系细胞活性氧物质（ROS）水平.结果 ①骨髓活检及流式细胞术检测均显示发生铁过载.②与对照组相比,照射组小鼠血小板计数显著降低[（801.9±81.2）×10^9/L对（926.0±28.2）×10^9/L],BMMNC数及红系、粒-单核系细胞比例明显降低,骨髓造血集落形成单位（CFU）数和造血干细胞单克隆培养数明显减少（P值均＜0.05）.③与照射组相比,照射＋铁剂组小鼠血小板计数显著降低[（619.0±60.9）×10^9/L对（801.9±81.2）×10^9/L],红系、粒-单核系细胞比例明显降低,骨髓造血CFU数和造血干细胞单克隆形成数明显减少（P值均＜0.05）.④照射＋铁剂组BMMNC、红系和粒-单核系细胞ROS水平较照射组分别升高1.94、1.93和2.70倍（P值均＜ 0.05）.结论 4Gyγ射线照射可造成小鼠骨髓损伤,在骨髓损伤基础上发生铁过载会加重损伤造血干/祖细胞功能,进一步研究发现可能由铁过载引起BMMNC内ROS水平升高所致.; 柴笑赵明峰李德冠张宇辰卢文艺曹小立孟娟霞游权孟爱民; 关键词：铁超负荷造血干细胞骨髓损伤

丹参多酚对铁过载引起的脐血造血细胞氧化应激损伤的抑制作用被引量：4: 2015年; 目的探讨丹参多酚对铁过载引起的脐血造血细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离脐血单个核细胞,分为对照组、模型组、丹参多酚低、中、高剂量组。模型组及丹参多酚低、中、高剂量组以400μmol/L浓度的枸橼酸铁胺(FAC)建立铁过载细胞模型,丹参多酚低、中、高剂量组于培养第3天分别加入18、50、160μg/m L丹参多酚培养24 h;对照组不加FAC及丹参多酚。采用流式细胞术检测各组细胞的活性氧(ROS)水平、细胞凋亡率,计数各组细胞集落形成数量。结果模型组ROS水平高于对照组及丹参多酚各剂量组(P均<0.05)。模型组细胞凋亡率高于对照组及丹参多酚高剂量组(P<0.05)。模型组红系祖细胞集落形成单位(CFU-E)、粒—单核系祖细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系祖细胞集落形成单位(BFU-E)和混合祖细胞集落形成单位(CFU-mix)数量均低于对照组及丹参多酚高剂量组(P均<0.05)。结论丹参多酚可减轻氧化应激引起的细胞凋亡及其对造血细胞增殖、分化功能的抑制作用。; 穆娟赵明峰李玉明张宇辰曹小立李青; 关键词：铁过载氧化应激造血干细胞

铁过载对小鼠外周血T淋巴细胞数量及功能的影响: 2016年; 铁是血红蛋白与红细胞的重要组成部分，在机体氧运输、DNA合成和细胞代谢中发挥重要作用。但是，多种因素可导致机体铁沉积量过多，造成机体铁过载，对心脏、骨髓、垂体等多脏器造成不同程度的损伤。前期我们的研究已经证实铁过载可通过升高活性氧物质（ROS）损伤骨髓造血功能，影响造血干细胞及间充质细胞的数量和功能。; 陈洁赵明峰曹小立孟娟霞邢艺贺小圆金鑫徐萍江嫣雨; 关键词：铁过载鼠外周血骨髓造血功能淋巴活性氧物质间充质细胞

铁过载巨噬细胞体外模型的建立及氧化应激对铁过载巨噬细胞的损伤作用被引量：8: 2016年; 目的通过铁与巨噬细胞共培养，建立体外铁过载巨噬细胞模型，检验铁过载对细胞氧化应激水平的影响以及氧化应激升高对巨噬细胞的影响。方法在巨噬细胞培养的过程中分别添加不同浓度（5、10、20、40、80μmol／L）枸橼酸铁铵（FAC）建立铁过载巨噬细胞模型（铁过载组），以不添加FAC作为对照组，检验这一过程中细胞数量及状态、细胞活性、细胞吞噬功能的变化，细胞生成活性氧、活性氮水平以及与之相关的氧化应激信号通路的变化。再用地拉罗司（DFX）去铁及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）清除过多的氧化应激后，检测上述指标的变化。结果（1）在培养液中加入不同浓度FAC培养，发现巨噬细胞内可变铁池（LIP）水平升高，且具有浓度依赖性，在含80μmol／LFAC的培养液中LIP水平达到最高。（2）随着FAC浓度的提高，巨噬细胞的活性逐渐降低，依次为对照组的51．58％、40．98％、16．23％、3．46％、0．05％（均P〈0．05）。选取活性降低至16．23％的FAC浓度（20μmol／L）作为后续实验铁过载组。（3）和对照组相比，铁过载组巨噬细胞的数量减少至对照组的32．80％（P〈0．05），细胞状态由贴壁变为部分悬浮；铁过载组巨噬细胞的吞噬功能降低至对照组的20．40％（P〈0．05）。（4）进一步的机制研究发现铁过载组的活性氧水平及活性氮水平分别是对照组的7．71及1．45倍（均P〈0．05）；经过荧光定量PCR检测发现，与对照组相比，参与活性氧生成的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）基因、参与活性氮生成的诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因的mRNA表达水平升高，参与活性氧清除的谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）基因mRNA表达水平降低；氧化应激信号通路相关的磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）基因mRNA表达水平升高；负反馈调节氧化应激的; 曹小立赵明峰李德冠邢艺张宇辰陈洁贺小圆崔蕊孟娟霞肖霞穆娟江嫣雨武日茂; 关键词：巨噬细胞铁超负荷细胞存活氧化性应激信号传导

克柔念珠菌临床分离株对伊曲康唑耐药的分子表达情况被引量：1: 2015年; 目的初步探讨克柔念珠菌临床分离株耐伊曲康唑的分子表达情况。方法对16株克柔念珠菌唑类靶酶基因ERG11进行PCR扩增和测序，比较伊曲康唑敏感组（3株）、剂量依赖性敏感组（8株）和耐药组（5株）的基因突变情况。同时，利用实时荧光定量PCR检测3组靶酶基因ERG11、外排泵基因ABC1和ABC2的mRNA表达差异。将数据转换后服从正态分布且方差齐，两组间比较采用双侧t检验。结果16株克柔念珠菌ERG11基因共存在7个突变位点，其中6个同义突变，1个错义突变（C44T），3组均可出现该错义突变。克柔念珠菌临床分离株伊曲康唑耐药组ERG11mRNA表达量较剂量依赖性敏感组和敏感组高（P值分别为0．015、0．002）；耐药组ABC2mRNA表达量也较剂量依赖性敏感组和敏感组高（P值分别为0．016、〈0．01），且剂量依赖性敏感组mRNA表达量高于敏感组（P=0．007）；而耐药组ABC1mRNA表达量较低。1株同时耐伊曲康唑和伏立康唑的克柔念珠菌（cK10），其职G11、ABC1和ABC2mRNA表达水平在所有耐药株中均为最高。结论ERG11基因序列存在多态性，未发现与伊曲康唑耐药有关的突变位点。ERG11和ABC2基因表达上调可能是克柔念珠菌临床分离株耐伊曲康唑的主要分子机制。; 贺小圆赵明峰陈锦艳武日茂张坚磊崔蕊江嫣雨陈洁曹小立邢艺邓琦; 关键词：克柔念珠菌伊曲康唑多药聚合酶链反应反转录聚合酶链反应

铁过载对巨噬细胞及MDS红系造血的影响及机制研究: 目的：研究铁过载对巨噬细胞及骨髓增生异常综合征(MDS)红系造血的影响及其作用机制。　　方法：①在培养巨噬细胞的过程中分别添加不同浓度（5、10、20、40、80μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)建立铁过载巨噬细胞模型（...; 曹小立; 关键词：骨髓增生巨噬细胞细胞病理学铁过载

MDS铁过载小鼠模型建立及鉴定被引量：1: 2018年; 目的:建立一种MDS铁过载小鼠模型,研究铁过载对MDS的影响。方法:通过逆转录病毒,将外源突变基因RUNX1-S291fs插入小鼠骨髓单个核细胞基因组,然后移植给经60Coγ射线照射的C57BL/6小鼠。8周后,腹腔注射铁剂,建立MDS铁过载小鼠模型。移植24周后,取小鼠外周血、骨髓、股骨、肝脏和脾脏进行鉴定:对外周血和骨髓细胞行瑞氏染色观察形态特征;对股骨、肝脏和脾脏组织行HE染色检测病理变化;对肝脏、脾脏和骨髓行普鲁士蓝染色观察铁沉积情况;应用流式细胞术检测小鼠骨髓细胞抗原表达情况;对骨髓单个核细胞和脾组织蛋白行免疫印迹实验,确认RUNX1-S291fs基因转入并表达蛋白。移植后对小鼠定期监测血常规指标和移植细胞嵌合率。结果:相比空白质粒对照小鼠,RUNX1-S291fs突变小鼠外周血白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数均降低;外周血和骨髓细胞显示病态造血;肝脏和脾脏明显增大;在股骨、肝脏和脾脏可见组织结构异常;骨髓细胞表面抗原表达异常;骨髓细胞和脾组织有RUNX1-S291fs蛋白表达。相比生理盐水对照小鼠,铁剂注射小鼠普鲁士蓝染色可见骨髓、肝脏和脾脏组织有明显铁沉积。结论:注射铁剂的RUNX1-S291fs突变组小鼠合并有MDS和铁过载的病理特征,成功构建了MDS铁过载小鼠模型,为研究铁过载对MDS的影响奠定了基础。; 金鑫隋松男徐萍邢艺曹小立王露桥孟娟霞卢文艺崔蕊赵明峰; 关键词：MDS 骨髓移植

铁过载对器官功能损伤及磁共振检测铁过载研究进展被引量：2: 2014年; 铁过载可导致多器官功能损害。铁过载的病情隐匿,表现多样,进展缓慢,组织受累程度多变,常在组织和器官显著受损后才能作出诊断。及时进行铁螯合治疗能有效减轻损害程度。因此,及时检测器官铁过载至关重要。目前检测铁含量的指标包括肝活检检测肝铁浓度（liver iron concentration,LIC）、血清铁蛋白（serum ferritin,SF）和转铁蛋白饱和度（transferrin saturation,TS）及核磁共振成像（MRI）。; 曹小立赵明峰; 关键词：铁过载核磁共振成像器官功能

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