刘鹏
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:川北医学院基础医学院免疫学与分子生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 杜氏利什曼原虫表达位点相关基因样蛋白的分子克隆及表达定位被引量:1
- 2014年
- 目的克隆杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)无鞭毛体特异表达新基因,观察其编码蛋白的亚细胞定位。方法制备杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体m RNA,以消减抑制杂交技术筛选无鞭毛体新的表达序列标签,扩增含有新表达序列标签的基因全长c DNA,Northen杂交和RT-PCR检测新基因在前鞭毛体和无鞭毛体中的表达,共表达方法观察杜氏利什曼原虫内新基因编码蛋白的亚细胞定位。结果构建了杜氏利什曼原虫无鞭毛体表达序列标签消减文库,克隆到一个新基因,命名为表达位点相关基因样蛋白(ESAGLP)基因,其c DNA全长为2 258 bp,编码620 aa。ESAGLP基因仅在无鞭毛体内表达,其编码蛋白定位于线粒体。结论 ESAGLP鉴定为杜氏利什曼原虫无鞭毛体新基因,其编码蛋白定位于无鞭毛体的线粒体。
- 刘鹏张仁刚张洁敬保迁
- 关键词:杜氏利什曼原虫
- 利什曼原虫减毒活疫苗研究进展被引量:1
- 2015年
- 利什曼原虫减毒活疫苗因其保留了大部分免疫原性,能感染巨噬细胞,诱发与自然感染类似的免疫应答而受到众多科学家的青睐。本文综述了近年来减毒活疫苗的研究进展。
- 刘鹏敬保迁
- 关键词:利什曼病
- 重组杜氏利什曼原虫延伸因子1-α与β-微管蛋白诱导BALB/c小鼠Th2型免疫应答的研究被引量:1
- 2018年
- 目的评价重组杜氏利什曼原虫延伸因子1-α(recombinant Elongation factor 1-α,rEF 1-α)和β-微管蛋白(recombinantβ-tubulin,rβ-tubulin)的免疫刺激效应及诱导免疫应答类型。方法从杜氏利什曼原虫四川人分离株基因组中扩增EF 1-α、β-tubulin基因,以分子克隆技术构建pQE30-EF 1-α、pQE30-β-tubulin重组质粒。将酶切与测序鉴定正确的重组子转化E.coil M15菌株,用IPTG诱导表达rEF 1-α和rβ-tubulin,表达产物经镍柱亲和层析纯化后辅以弗氏佐剂制成疫苗免疫BALB/c小鼠,采用Western blot法检测小鼠抗血清的特异性,ELISA法检测抗血清效价。分离各组小鼠脾细胞,体外培养60h后再次接受相同抗原刺激,检测IL-4、IL-12、IFN-γ水平。结果重组菌表达的rEF 1-α、rβ-tubulin均以包涵体形式存在,两表达产物免疫小鼠后获得的抗血清均具有特异性,效价分别为1∶800和1∶1 600。rEF 1-α、rβ-tubulin免疫小鼠脾细胞培养上清IL-4含量均高于对照组(P<0.05),IL-12、IFN-γ与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功表达了杜氏利什曼原虫rEF 1-α、rβ-tubulin,两种重组蛋白均可诱导Th2型免疫应答。
- 刘鹏姚梦杨健敬保迁
- 关键词:杜氏利什曼原虫重组蛋白