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杨岩
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1
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供职机构:
大连医科大学
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相关领域:
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合作作者
张向文
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徐莲花
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金锦花
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焦鑫艳
大连医科大学
李文哲
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阻断核心岩藻糖基化修饰对小鼠前B细胞信号传导能力的影响
2014年
目的 观察阻抑核心岩藻糖基化修饰对前B细胞信号传导的调节作用.方法 利用逆转录病毒包装技术建立核心岩藻糖转移酶Fut8基因沉默前B细胞株(70Z/3-Fut8-RNAi细胞).用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot检测Fur8 mRNA、蛋白表达和细胞内信号分子的酪氨酸磷酸化水平.结果 成功构建重组pSINsi-hU6-Fut8 siRNA质粒,逆转录病毒包装后病毒滴度可达2.1×10^5 CFU/ ml.Real-time PCR及Western blot检测结果表明70Z/3-Fut8-RNAi细胞的Fut8基因和蛋白表达明显下降,蛋白表达水平下调70% - 80%,mRNA水平下调70% -80%,以及pre-BCR介导的细胞信号传导,即CD79a及BTK磷酸化显著下降.结论 成功构建70Z/3-Fut8-RNAi细胞株,Fut8修饰的核心岩藻糖基化可能在早期B细胞的细胞信号传导过程中发挥重要的调节作用.
李志
焦鑫艳
杨岩
徐莲花
张向文
金锦花
李文哲
关键词:
小干扰RNA
细胞信号传导
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