王杨 作品数:32 被引量:68 H指数:6 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省中医药管理局基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
同种异体NK细胞对不同肿瘤细胞的体外杀伤活性及其机制的初步探讨 被引量:6 2008年 为了观察同种异体NK细胞对不同肿瘤细胞的体外杀伤活性,并初步探讨其分子机制。以K562细胞为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比时同种异体NK细胞杀伤CNE2、KG1a和U251细胞的活性。应用RT-PCR和流式细胞仪分别检测4种细胞MHCI类链相关分子(MICA/B)和人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白(ULBP1~3)基因和分子的表达情况。效靶比20∶1时用AMO-1、BMO-1、M295、M310和M551单抗分别阻断肿瘤细胞表面MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3分子,观察NK细胞对其杀伤活性的变化。结果:NK细胞对K562、CNE2和KG1a细胞均有杀伤活性,对U251细胞无杀伤活性。在mRNA水平4种细胞均表达MICA/B和ULBP1~3基因。K562细胞表达MICA/B和ULBP1~3全部分子;KG1a和U251细胞均不表达5种分子;CNE2细胞表达MICA/B和ULBP2,不表达ULBP1和ULBP3。CNE2、KG1a和U251细胞均高表达HLAI分子,而K562细胞不表达。用单抗分别阻断靶细胞表面相应的NKG2D配体分子,NK细胞对KG1a和U251细胞的杀伤活性无变化。... 周健 牛新清 梅家转 王杨 涂三芳 何颖芝 周雪云 郭坤元关键词:自然杀伤细胞 自然杀伤细胞受体 NKG2D 细胞毒性试验 RNAi-Ly49C诱导KIR错配增强Allo-NK细胞GVL效应 研究背景与目的:
异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的有效手段,但是,对于高度危险型白血病,Allo-HSCT后复发率仍然高达81%。如何提升GVL效应,降低移植后复发率是提升高度危险型白血病治疗效果的关键所在。... 王杨关键词:杀伤细胞免疫球蛋白样受体 恶性血液病 杀伤效应 文献传递 不同分子靶向药物对高、低表达ABCG2耐药鼻咽癌细胞NKG2D配体的诱导作用 目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的人多药耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(简写作ABCG2细胞、ABCG2细胞)NKG2D配体表达的诱导作用及其增效效应... 黄宇贤 王杨 李玉华 陈锦章 郭坤元文献传递 2008年临床肿瘤学重大进展——美国临床肿瘤学会年度报告 被引量:7 2009年 美国临床肿瘤学会(American Society of Clinical Oncology,ASCO)每年都会回顾总结临床肿瘤领域各项研究并筛选出本年度最有影响力的进展。2008年重点报告了31项年度最有意义的研究。其中包括12项“主要进展”。 黄凌 张一方 王杨 吴一龙关键词:肿瘤 TJU103体外诱导造血干细胞移植的免疫耐受 2008年 目的:前期研究表明,吲哚亚甲基异烟腙(简称TJU103)可以明显降低异基因造血干细胞移植小鼠移植物抗宿主病的发生率和程度,明显延长小鼠移植后的生存期。实验拟观察TJU103诱导造血干细胞移植免疫耐受和对移植物抗白血病的影响,探索一条既能降低移植物抗宿主病又能保留移植物抗白血病的移植途径。方法:实验于2007-07/10在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成。①实验材料:人急性髓系白血病细胞株KG1a由中国医学科学院血液学研究所宋增璇教授惠赠。10份自愿捐献的健康人外周血白细胞由广州市中心血站提供,等分为供者与受者。②实验方法:采用梯度密度沉淀法常规分离人外周血单个核细胞。以供者外周血单个核细胞作为反应细胞,受者正常外周血单个核细胞作为刺激细胞,体外建立异基因造血干细胞移植中供、受者间的单向混合淋巴细胞反应体系,应用TJU103阻断CD4+T细胞激活的抗原信号通路,设单独刺激细胞和反应细胞对照以及1640完全培养基空白对照。③实验评估:于培养第1、3、5天应用MTT检测TJU103对供者淋巴细胞的增殖活性的影响,于第5天用乳酸脱氢酶释放法分别检测10∶1,20∶1,40∶1效靶比时供者淋巴细胞对受者单个核细胞和急性髓系白血病细胞KG1a的细胞毒活性影响,同时采用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞的百分比。结果:第3天和第5天实验组A值低于对照组(P<0.05)。单向混合淋巴细胞5d后实验组各效靶比供者T细胞杀伤受者外周血单个核细胞的活性明显低于对照孔(P<0.05);二者对KG1a细胞的杀伤活性差异不显著(P>0.05)。TJU103对供者CD4+CD25+T细胞无影响。结论:TJU103降低T淋巴细胞增殖反应的同时并不影响其抗白血病效应,有望用于临床异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病和移植物抗白血病的免疫调节。 周健 涂三芳 郭坤元 孙明 胡亮杉 吴远彬 卢晓珣 王杨关键词:TJU103 T淋巴细胞增殖 细胞毒活性 移植物抗宿主病 移植物抗白血病 免疫耐受 NKG2D配体介导雷帕霉素对自然杀伤细胞的间接抑制作用 被引量:1 2009年 目的探讨雷帕霉素对高表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)人耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(简写为ABCGH2ighCNE2/DDP)NKG2D配体表达及其对NK(NaturalkillerNK)细胞杀伤活性的影响。方法利用免疫磁珠技术分离ABCGH2ighCNE2/DDP细胞及NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经雷帕霉素处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经雷帕霉素处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞对NK细胞的杀伤敏感性。结果ABCG2HighCNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上,经雷帕霉素处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别下降到(1.50±0.36)%、(2.36±0.72)%、(2.24±0.12)%、(5.06±1.16)%、(3.94±0.78)%。在效靶比为10∶1、20∶1时,NK细胞对雷帕霉素处理前后ABCGH2ighCNE2/DDP细胞的杀伤率由处理前的(15.32±1.34)%、(27.26±2.02)%下降到(10.82±0.73)%、(22.72±2.03)%,处理前后杀伤率差异有显著性(F=71.40P=0.000)。结论雷帕霉素通过诱导肿瘤细胞低表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),间接抑制了NK细胞的杀伤活性。 黄宇贤 王杨 杨玉莲 郭坤元关键词:雷帕霉素 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 自然杀伤细胞 NKG2D 鼻咽肿瘤 高、低表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2的人鼻咽癌耐药细胞生物学特性差异研究 被引量:6 2008年 目的探讨高表达与低表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的人多药耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(简写作ABCG2High细胞、ABCG2Low细胞)的生物学差异,分析两种细胞的耐药特点。方法分离ABCG2High和ABCG2Low细胞,检测其体外克隆形成率并分析细胞周期。流式细胞术(FCM)检测两种细胞传代前及传至第5代时ABCG2阳性表达率的差异。RT-PCR检测耐药基因ABCG2、Bcl-2、MDR1、MRP、MGMT的mRNA表达差异。MTT法检测两种细胞在1~14d的吸光度,绘制生长曲线;检测两种细胞对氟尿嘧啶、顺铂、长春新碱、卡铂、表阿霉素、柔红霉素、紫杉醇、丝裂霉素等化疗药物耐药性的差异。结果ABCG2High和ABCG2Low细胞在7d内的克隆形成率分别为25.24%±1.18%和16.28%±1.11%。FCM分析显示,ABCG2High的S期细胞占41.5%,ABCG2Low的G1/M0期细胞占63.9%。FCM分离后,ABCG2的表达率在ABCG2High细胞为98%,在ABCG2Low细胞为2%;两种细胞传至第5代,ABCG2在前者的表达率降低为75%,在后者升高至20%。RT-PCR显示,ABCG2mRNA在ABCG2High细胞中的表达明显高于ABCG2Low细胞,其他耐药基因在两种细胞中的表达无差异。生长曲线显示,ABCG2High细胞早期生长速度较ABCG2Low细胞快,后期生长速度逐渐减慢。耐药谱分析表明,ABCG2High细胞对8种抗肿瘤药物的IC50值高于ABCG2Low细胞两倍以上,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论ABCG2High细胞是一种快周期细胞,而ABCG2Low细胞为慢周期细胞,前者更具有多药耐药的特点,可用于ABCG2介导的鼻咽癌细胞非经典多药耐药的研究。 黄宇贤 王杨 卢晓珣 郭坤元关键词:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 鼻咽肿瘤 2008年临床肿瘤学重大进展——美国临床肿瘤学会年度报告 美国临床肿瘤学会(Amserican Society of Clinical Oncology,ASCO)每年都会回顾总结临床肿瘤领域各项研究并筛选出本年度最有影响力的进展。2008年重点报告了31项年度最有意义的研究,... 黄凌 张一方 王杨 吴一龙关键词:临床肿瘤学 文献传递 苦参碱通过诱导NKG2D配体高表达增强NK细胞对ABCG2high耐药鼻咽癌细胞杀伤活性 被引量:10 2009年 目的探讨苦参碱提高ABCG2High[三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2]耐药鼻咽癌细胞对Allo-NK细胞杀伤敏感性的机制。方法利用免疫磁珠技术分离ABCG2HighCNE2/DDP细胞及Allo-NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。结果ABCG2HighCNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上,经苦参碱处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(11.30±0.89)%、(14.29±2.61)%、(12.56±1.06)%、(43.24±4.43)%、(12.77±1.06)%。在效靶比为10:1、20:1,Allo-NK细胞对苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±1.34)%、(27.26±6.81)%及(28.53±1.37)%、(42.72±2.80)%。处理前后杀伤率有显著性差异(F=29.05,P=0.000)。结论苦参碱通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使肿瘤细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性增强。 黄宇贤 王杨 孙明 周雪云 邓兰 郭坤元关键词:苦参碱 NKG2D 杀伤敏感性 DNA损伤修复基因ERCC1的表达与非小细胞肺癌含铂辅助化疗方案的疗效相关 被引量:4 2010年 1 文献来源
Olaussen KA, Dunant A, Fouret P, et al. DNA repair by ERCC1 in non-small-cell lung cancer and Cisplatin-based adjuvant chemotherapy[J]. N Engl J Med, 2006, 355(10): 983-991. 程颖 王杨关键词:肺肿瘤 ERCC1 疗效预测因子