陆松梅
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人鼻咽癌干细胞微球体培养并鉴定其生物特性被引量：4
- 2014年
- 目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)中悬浮培养。流式细胞术、Transwell小室实验、裸鼠成瘤实验、分别检测CNE2贴壁细胞(CNE2 monolayer,CNE2-MN)及CNE2微球体细胞(CNE2 sphere cells,CNE2-SC)CD133+标记细胞比例,体外侵袭能力、体内成瘤能力;CNE2-SC在含血清培养基中贴壁培养观察其分化能力;实时荧光定量PCR分析CNE2-MN及CNE2-SC相关干性基因Bmi-1、Oct4、Twist1RNA的表达。结果 2种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖;在含血清培养基中培养能贴壁分化成CNE2-MN而无明显差异;CNE2-SC中CD133+细胞比例(98.79%)显著高于CNE2-MN(0.98%),差异有统计学意义(P<0.01);与CNE2-MN相比,CNE2-SC高表达干细胞相关基因Bmi-1、Oct4、Twist1及EMT标志物N-cadherin、Vimentin。Transwell小室实验示CNE2-SC与CNE2-MN的穿膜细胞数分别为(122±6)个/视野及(36±7)个/视野(P<0.05);裸鼠成瘤实验示1×104个CNE2-SC 3周内即能成瘤,成瘤率33.3%,而CNE2-MN不能成瘤,1×105个CNE2-SC与CNE2-MN成瘤体积比为(1.750±0.613)cm3vs(0.457±0.291)cm3(P<0.05),而1×106个以上2种细胞成瘤体积比为(2.332±0.549)cm3vs(0.669±0.278)cm3(P<0.01)。结论利用特制SFM悬浮培养法可得到鼻咽癌CNE2-SC,这种微球体富集了肿瘤干细胞,将为后续鼻咽癌干细胞研究打下基础。
- 李亚军郭颖吴顺龙甘生敏陆松梅李少林
- 关键词：鼻咽癌肿瘤干细胞微球体无血清培养基
- EPCAM、MUC16免疫磁珠制备及循环肿瘤细胞检测被引量：5
- 2015年
- 目的检测EPCAM、MUC16两种抗原在上皮性卵巢癌循环肿瘤细胞中表达的相关性。方法分别用羧基磁珠制备EPCAM、MUC16两种免疫磁珠,分3组:EPCAM免疫磁珠检测组、MUC16免疫磁珠检测组、2种磁珠均等混合检测组。对来源于同一患者的等体积外周血样本进行循环肿瘤细胞检测,HE染色后鉴定检测值。结果 EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠对同体积、同来源样本检测值分别为22±11、14±6、28±12个肿瘤细胞(P<0.05),说明检测效率有统计学差异。结论 MUC16与EPCAM在上皮性卵巢癌循环肿瘤细胞中独立表达且存在差异,因此增加MUC16这一器官标志物可有效提高上皮性卵巢癌CTCs检出数量。
- 陆松梅周琦张娜李亚军甘生敏李少林
- 关键词：循环肿瘤细胞EPCAM卵巢癌免疫磁珠
- 汉黄芩素逆转卵巢癌SKOV3细胞对顺铂的耐药性被引量：5
- 2016年
- 目的 :研究汉黄芩素是否可以逆转顺铂(cisplatin,DDP)耐药性卵巢癌SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性,并探讨其可能的分子机制。方法 :用终浓度为20μmol/L的汉黄芩素作用SKOV3/DDP细胞24 h,同时以SKOV3细胞和未经汉黄芩素作用的SKOV3/DDP细胞作为对照。然后,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测不同组细胞的侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法检测不同组细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果:汉黄芩素处理后,SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性明显提高(P<0.05),迁移能力和侵袭能力均明显降低(P值均<0.01),N-cadherin和vimentin表达水平均明显下调(P值均<0.01),而E-cadherin表达水平明显上调(P<0.01),P-gp水平则无明显变化(P>0.05)。结论:汉黄芩素能增加SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能与逆转细胞的上皮-间质转化有关。
- 张娜周琦陆松梅吴顺龙刘双何燕琼李少林
- 关键词：卵巢肿瘤汉黄芩素顺铂上皮-间质转化
