郑栋
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SDF-1α-GFP基因重组腺病毒载体的构建及其转染大鼠心肌细胞的条件优化研究
- 2014年
- 目的：构建基质细胞衍生因子1α-绿色荧光蛋白（SDF-1α-GFP）重组腺病毒载体并摸索其转染大鼠心肌细胞系的最佳条件。方法：人工合成SDF-1α基因并插入线性化表达载体,转化感受态E.coliDH5a细胞。筛选阳性菌落,采用DNA测序技术测定目的基因序列。用获得的重组腺病毒（adenovirus,Ad）载体转染293T细胞,采用qPCR技术测定SDF-1α的mRNA表达水平。用不同滴度感染复数Ad-SDF-1α-GFP转染H9C2心肌细胞系,采用倒置相差显微镜及荧光显微镜分别在24和48h检测细胞形态及GFP蛋白阳性的细胞比率。结果：DNA测序证实SDF-1α基因构建成功。qPCR结果显示,与阴性对照组相比,MOI 2000组的SDF-1α的表达水平增加了约10 000倍,MOI 8000组的SDF-1α表达水平增加了约210 000倍。转染H9C2心肌细胞系的结果显示,MOI值为2 000、3 000、4 000、5 000、6 000、7 000及8 000的SDF-1α-GFP转染H9C2细胞48h后,其转染率分别为（45±5.04）%、（75±5.70）%、（80±5.67）%、（85±6.45）%、（90%±6.90）%、（90±5.22）%和（95±5.36）%,但是当MOI值区间为5 000～8 000时,细胞形态上出现明显损伤。结论：MOI值为4 000的Ad-SDF-1α-GFP转染H9C2细胞系48h能达到最佳的转染效率,并最小程度损伤细胞。
- 郑栋郭军李海瑞李自成
- 关键词：重组腺病毒H9C2细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞增殖及定向分化能力的增龄性变化被引量：2
- 2015年
- 背景:自体骨髓间充质干细胞移植治疗心血管疾病已经成为当前研究的热点之一,但是患者自体骨髓间充质干细胞的增殖能力及向心肌样细胞方向分化的能力是否随年龄的改变而有所变化尚不清楚。目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的增龄性差异。方法:纯化培养不同年龄组SD大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪分析其细胞周期,同时骨髓间充质干细胞与乳鼠心肌细胞共培养,细胞免疫荧光技术分析骨髓间充质干细胞心肌肌钙蛋白T的表达。结果与结论:流式细胞仪分析显示处于G0/G1期骨髓间充质干细胞的百分率随年龄的增加而增加;骨髓间充质干细胞的肌钙蛋白T表达率亦随年龄的增加而减少。结果表明大鼠骨髓间充质干细胞的增殖与定向分化能力随着年龄的增长而下降。
- 李海瑞郑栋江灿郭军张爱东李自成
- 关键词：骨髓间质干细胞肌钙蛋白T干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞定向分化
- SDF-1α改善高糖对骨髓间充质干细胞存活及迁移能力的抑制作用与分子机制的研究被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对高糖环境(25 mmol/L)下大鼠骨髓间充质干细胞(r MSCs)存活及迁移能力的影响及相关分子机制.方法:采用全髓贴壁法纯化培养r MSCs,通过MTT法检测细胞增殖率、Hoechst 33258染色从形态学角度观察细胞凋亡评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs存活的影响,同时通过transwell实验评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs细胞迁移能力的影响.结果:实验结果发现,与低糖培养液(5.6mmol/L)比较,高糖培养液可明显抑制r MSCs增殖、促进细胞凋亡(P<0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可减轻高糖培养液对细胞增殖的抑制及诱导细胞凋亡的作用(P<0.05),CXCR4受体特异性拮抗剂AMD3100(10μg/m L)虽能进一步抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,但差异无显著性(P>0.05).Transwell实验发现高糖培养液可明显抑制r MSCs的迁移作用(P<0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可逆转高糖培养液对细胞迁移的抑制作用(P<0.05),AMD3100(10μg/m L)可进一步抑制细胞迁移,且差异有显著性(P<0.05).结论:SDF-1α可能通过CXCR4受体改善高糖对骨髓间充质干细胞迁移能力的抑制,而其改善高糖对骨髓间充质干细胞存活的抑制则可能通过非CXCR4受体介导,为改善MSCs用于治疗冠心病合并糖代谢异常患者心梗后心力衰竭疗效进一步提供理论依据.
- 李海瑞郑栋江灿郭军张爱东
- 关键词：骨髓间充质干细胞基质细胞衍生因子凋亡
- SDF-1/CXCR4信号轴介导的骨髓间充质干细胞治疗心力衰竭的研究进展被引量：4
- 2014年
- 心力衰竭(heart failure,HF)是由多种心血管疾病所致心脏泵血功能障碍的一类临床常见危重症。目前逐渐兴起的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)移植对HF的治疗带来希望,但由于植入细胞存活率低、迁移能力及心肌修复能力弱而削弱了其治疗效应。通过激活基质细胞衍生因子1/CXC族趋化因子受体4(SDF-1/CXCR4)信号轴可有效地解决上述问题。因此,SDF-1/CXCR4信号轴介导的BMMSCs移植可能成为HF治疗的新方向。
- 郑栋郭军
- 关键词：心力衰竭骨髓间充质干细胞
- 冷盐水灌注消融导管和8mm消融导管在心房颤动消融中安全性及有效性的Meta分析被引量：1
- 2015年
- 目的：评价冷盐水灌注消融导管和8mm消融导管在心房颤动（房颤）射频消融中的安全性和有效性。方法：采用Coehrane系统评价方法,计算机检索中英文期刊数据库,检索时间截至2014年3月,纳入冷盐水灌注消融导管和8mm消融导管治疗房颤的临床随机对照试验。采用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果：共纳入5个随机对照试验,包括1 617例患者。Meta分析结果显示：与冷盐水灌注消融导管比较,房颤消融术中采用8mm消融导管的心包填塞发生率无显著差异（OR=0.31,95%CI0.09-1.11,P=0.07）,脑血管栓塞发生率二者无显著统计学意义（OR=0.66,95%CI：0.18-2.41,P=0.53）,术后肺静脉狭窄发生率二者无显著统计学意义（OR=1.42,95%CI：0.17-12.20,P=0.75）。术后随访发现使用8mm消融导管的房颤复发率显著低于盐水灌注消融导管（OR=0.63,95%CI：0.42-0.94,P=0.02）。结论：冷盐水灌注消融导管和8mm消融导管在房颤消融的安全性方面无显著差异,但8mm消融导管的房颤复发率显著低于冷盐水灌注消融导管。
- 郭军郑栋姚焰张爱东李自成
- 关键词：心房颤动导管消融META分析
