梁飞
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:江苏科技大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家蚕核型多角体病毒广东分离株Bm126基因编码基序RGD的功能研究
- 2015年
- 杆状病毒因专一感染昆虫而作为治理农林害虫的生物农药以及作为表达载体在生物医药产业得到广泛应用。前期研究发现家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)中国广东分离株(Bm NPV-GD)的orf126基因(Bm126)包含一个编码精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)的基序。采用点突变技术构建RGD编码基序突变的转移载体,利用Bm NPV Bac-to-Bac系统转座获得重组bacmid,通过转染Bm N细胞获得重组病毒,分析突变病毒在感染细胞后期的多角体产量变化,并在病毒感染过程中进一步应用RGD竞争性多肽Cyclo[RGDf-N(Me)V-]分析突变病毒多角体产量的变化,以此探究Bm NPV Bm126编码的RGD基序是否在病毒感染增殖中发挥作用。经t检验统计表明突变病毒感染Bm N细胞后产生的多角体数量与对照病毒没有显著性差异,Cyclo[RGDf-N(Me)V-]处理结果也显示其与对照没有显著差异,表明Bm NPV-GD Bm126基因编码的RGD基序可能不是直接参与病毒感染宿主细胞后的增殖过程,而是辅助病毒的其他因子与宿主细胞互作。
- 郝碧芳程晨梁飞沈兴家
- 关键词:杆状病毒家蚕核型多角体病毒多角体
- 人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达被引量:1
- 2016年
- 人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1与VP2,分析二者组装成病毒样颗粒(VLPs)的效率,比较用不同启动子构建重组病毒的表达效果,并利用家蚕幼虫进行2种蛋白质的共表达及VLPs纯化条件的研究。结果表明,重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2与v Bm Bac-vp1-IRES-vp2均可介导EV71的VP1、VP2蛋白在Bm N细胞中表达,并能够组装成病毒样颗粒,但采用Pph及Pp10启动子的表达和组装效率明显高于Pph及IRES启动子组合;将重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2以1×10^4TCID50/头的剂量注射5龄起蚕,Western blotting检测到VP1在幼虫血淋巴中特异性表达,并且随着感染时间的延长表达量增加;经蔗糖梯度密度离心能够有效地纯化蚕体血淋巴中的病毒样颗粒。研究结果为后续EV71疫苗研制奠定了一定的试验基础。
- 黄金山梁飞柳林南文斌程晨沈兴家郝碧芳
- 关键词:人肠道病毒71型病毒样颗粒衣壳蛋白BM
- BmNPV膜融合蛋白GP64作用机制初步研究
- 杆状病毒是双链DNA病毒的一个大家族,该病毒主要感染鳞翅目、双翅目、膜翅目昆虫及甲壳类动物,区别于其它病毒的显著性特征是它具有双相复制周期,其生活周期中产生两种结构与功能不同的病毒粒子:出芽病毒(BV)和包涵体病毒(OD...
- 梁飞
- 关键词:信号肽融合蛋白家蚕核型多角体病毒
- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用
- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用,提供一种以MβCD为有效成分,防治BmNPV入侵细胞的药物。该药物在深入研究病毒入侵机制、杆状病毒感染宿主的受体研究方面有重要意义。当MβCD浓度在8mM以上...
- 黄金山郝碧芳沈兴家程晨梁飞
- 文献传递
- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用
- 甲基-β-环糊精在制备防治BmNPV感染家蚕细胞药物中的应用,提供一种以MβCD为有效成分,防治BmNPV入侵细胞的药物。该药物在深入研究病毒入侵机制、杆状病毒感染宿主的受体研究方面有重要意义。当MβCD浓度在8mM以上...
- 黄金山郝碧芳沈兴家程晨梁飞
- 文献传递