豆玲
- 作品数：33 被引量：29H指数：3
- 供职机构：甘肃省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目甘肃省农业科技创新项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术文化科学更多>>
- 榆中县规模场猪垂直传播性疫病的血清学调查
- 2015年
- 方法:采用正向间接血凝试验、胶体金检测卡和琥红平板凝集试验3种试验方法,对榆中县随机选择的7个中小规模场(户)的303份猪血清进行CSF抗原与抗体、PRRS、PR、PCV-2、PPV、布鲁氏菌病和弓形虫病抗体检测。结果:猪瘟抗原阳性率免疫母猪为59.38%、仔猪为3.45%,非免疫仔猪为4.0%、保育猪21.43%;母猪CSF、PRRS、PR、PCV-2和PPV 5种病免疫抗体阳性率依次为71.88%、88.46%、94.74%、93.75%和82.35%;CSF免疫群体阳性率≥70%场户4个,PRRS 5个免疫场户群体阳性率均≥70%,PR 2个免疫场户群体阳性率均≥70%,4个非免疫场户群体阳性率在33.33%~100%之间;PPV3个免疫场户群体阳性率均≥70%,3个非免疫场户群体阳性率在33.33%~100%之间;仔猪PRRS、PPV和PCV-2 3种病非免疫场户,阳性率依次分别为70.67%、61.82%和34.55%。303份血清猪弓形虫病和布鲁氏菌病抗体均为阴性。结论:榆中县中小规模场猪瘟、猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病的感染情况较严重,通常是这几种疫病的混合感染。
- 康文彪宋建国刘渊薛喜娟周峰豆玲魏邦香
- 关键词：血清学抗原抗体
- LwaCas13a蛋白的表达纯化与活性分析
- 2023年
- 【目的】获得高纯度、高浓度、优良反式切割活性的韦德纤毛菌(Leptotrichia wadei)的Cas13a(LwaCas13a)蛋白,为研发基于CRISPR-LwaCas13a系统的动物病毒RNA检测新方法提供重要的生物学工具。【方法】通过PCR、双酶切与连接反应构建pET15b-SUMO-LwaCas13a重组质粒,并进行原核诱导表达与条件优化;发酵100 mL大肠杆菌BL21(DE3)菌诱导表达LwaCas13a蛋白后进行纯化,纯化后利用超滤法浓缩蛋白,使用BCA法检测蛋白浓度。将LwaCas13a蛋白、CRISPR RNA(CrRNA)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)靶标RNA及荧光标记单链RNA(ssRNA)探针共孵育,利用全波长荧光分析仪检测CRISPR-LwaCas13a反式切割活性,与商业化Cas13a蛋白进行活性对比,并优化LwaCas13a与CrRNA最佳结合比例。【结果】成功构建重组质粒pET15b-SUMO-LwaCas13a;LwaCas13a重组蛋白的最佳诱导表达条件为0.4 mmol/L IPTG、18℃诱导16 h;经过纯化最终获得95%纯度、7.5 mg/mL浓度的LwaCas13a蛋白。荧光检测结果显示,LwaCas13a蛋白具有明显的反式切割活性,为商业化Cas13a蛋白活性的1.25倍,且LwaCas13a蛋白与CrRNA的最佳结合比例为1∶2。【结论】试验成功表达纯化出高纯度、高浓度的LwaCas13a重组蛋白,其反式切割活性优于商业化Cas13a蛋白,并明确了该蛋白与CrRNA的最佳配比,为利用LwaCas13a进行动物病毒RNA检测新技术的研发提供了依据。
- 豆玲李泽轩贾訸潇张彩云左富江李婷谢元江段晓雷
- 关键词：原核表达
- 一种磁场可调的二氧化碳培养箱
- 本实用新型涉及二氧化碳培养箱技术领域，具体为一种磁场可调的二氧化碳培养箱，细胞培养箱，细胞培养箱上安装有PLC控制器和操作显示界面，细胞培养箱的箱壁为双层内空结构，所述细胞培养箱的空心箱壁内安装有加热模块，细胞培养箱的内...
- 豆玲
- 甘肃省部分中小规模猪场猪乙型脑炎流行现状调查被引量：1
- 2022年
- 调查了解甘肃省部分名猪场猪乙型脑炎(JE)的流行情况。对甘肃省未进行猪乙型脑炎疫苗预防接种的10个中小型规模猪场的1523份血清和组织样品进行猪乙型脑炎病毒(JEV)抗体和病毒核酸检测,同时开展了乙型脑炎与猪其他垂直传播病毒的混合感染检测。结果表明,JEV抗体场阳性率为100%,个体阳性率为78.72%;JEV核酸的场阳性率秋季(50%)高于春季(40%),个体阳性率秋季(6.26%)高于春季(5.41%)。30%的中小规模场存在JEV和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等2~5种病原的混合感染。甘肃省猪场的猪乙型脑炎感染有加重的趋势,感染情况秋季比春季更加严重,所以,在秋季应更加重视该病的防控工作。
- 姚奕蕾宋建国康文彪周峰豆玲高军军潘永红
- 一种兽医实验室用试管清洗装置
- 本实用新型属于清洗装置技术领域，尤其为一种兽医实验室用试管清洗装置，包括箱体，所述箱体的内部设置有安装板，所述安装板的上端面固定连接有多个从小到大依次排列的卡夹，多个所述卡夹的上端面均贯穿连接有试管，所述箱体的上端面可拆...
- 豆玲康文彪毋艳萍康新华王雪莹张莉高军军李昱辉
- 甘南藏族自治州牦牛巴氏杆菌病的细菌分离鉴定及药物筛选研究被引量：3
- 2018年
- 本文采用常规细菌分离鉴定法,对甘南藏族自治州牦牛巴氏杆菌病的发病牦牛采集病料,进行细菌分离鉴定及药敏试验;同时,根据药敏试验结果,设计药物治疗比对方案。结果表明:在病料中分离出巴氏杆菌,结合临床症状、病理剖检、生化试验、动物试验等综合判定为牦牛巴氏杆菌病。药敏实验结果为对OTC(土霉素)、AKN(丁胺卡那)、AMP(氨苄青霉素)、SMM(磺胺甲氧嘧啶钠)CFX(头孢呋新)等抗生素敏感。最终筛选出的药物氨苄西林钠治愈率达90.80%,高于土霉素75.34%、复方磺胺甲氧嘧啶钠69.24%以及对照组自愈率的26.03%。
- 豆思远豆玲卢旺银徐峥嵘李勇生
- 关键词：牦牛巴氏杆菌细菌分离鉴定药敏试验
- 布鲁氏菌病与炭疽病多重PCR方法的建立被引量：7
- 2017年
- 根据GenBank上已发表的布鲁氏杆菌BM21基因序列和炭疽杆菌PX01,设计合成两对特异性引物,分别建立了布鲁氏菌病(Brucellosis)和炭疽病(Anthrax)单项PCR诊断方法。通过对扩增条件的筛选,并以棋盘法锁定了两条引物的最适反应条件,同时扩增出布病255bp和炭疽329bp特异性片段。通过对多重反应体系的特异性、敏感性实验和重复性试验,最终确定了布病和炭疽病的多重PCR诊断方法。
- 豆玲贺奋义周峰豆思远张登基郭慧琳
- 关键词：布鲁氏菌病多重PCR
- 炭疽与结核病多重PCR方法的建立被引量：2
- 2017年
- 根据GenBank上已发表的炭疽杆菌PX01和结核分枝杆菌插入片段IS6110,设计合成两对特异性引物,分别建立了炭疽病(Anthrax)和牛结核病(Bovine Tuberculosis)单项PCR诊断方法。通过对扩增条件的筛选,并以棋盘法锁定了两条引物的最适反应条件,同时扩增出炭疽329bp和牛结核129bp特异性片段,并通过对多重反应体系的特异性、敏感性实验和重复性试验,最终确定了布病和炭疽病的多重PCR诊断方法。
- 周峰郭慧琳豆玲豆思远张登基贺奋义
- 关键词：炭疽结核病多重PCR
- 布鲁氏菌病、结核病多重PCR方法的建立被引量：1
- 2017年
- 根据GenBank上已发表的布鲁氏杆菌BM21基因序列和结核分枝杆菌插入片段IS6110,设计合成两对特异性引物,初步建立了布鲁氏菌病(Brucellosis)和牛结核病(Bovine Tuberculosis)诊断方法,并以棋盘法锁定了两条引物的最适反应条件,同时扩增出布病255bp和牛结核129bp特异性片段。并通过对多重反应体系的特异性和敏感性实验,最终确定了布鲁氏菌病和牛结核病的复合PCR诊断方法。
- 周峰豆玲豆思远贺奋义张登基郭慧琳
- 关键词：布病牛结核病多重PCR
- 奶牛结核病IFN-γ基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)中的高效表达被引量：1
- 2015年
- 动物机体内γ-干扰素(IFN-γ)是可被多种物质诱导产生的生物活性蛋白,克隆和诱导表达奶牛结核病IFN-γ蛋白,对于采用ELISA诊断牛结核病有着重要意义。本研究利用RT-PCR方法克隆了奶牛结核病IFN-γ基因,并成功构建了IFN-γ基因的原核表达载体重组质粒pET28a-IFN-γ,转入E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并对条件进行了优化。SDS-PAGE与Western Blot结果显示,在37℃条件下,0.75mmol/L IPTG诱导4h可见重组蛋白BovIFN-γ大量表达。本研究成功建立了利用原核表达系统获得牛IFN-γ蛋白的方法,对后续利用该蛋白作为免疫原,从而建立ELISA诊断方法奠定了基础。
- 豆玲豆思远周峰王佳尚立宏曹丽萍鄂承钧
- 关键词：奶牛结核病IFN-Γ基因原核表达
