张清
- 作品数：15 被引量：113H指数：6
- 供职机构：南昌大学第四附属医院更多>>
- 发文基金：江西省卫生厅中医药科研基金国家自然科学基金江西省卫生厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 不同连翘制剂对甲型流感病毒NP基因转染后表达的影响被引量：12
- 2015年
- 目的:观察连翘苷、连翘醇提液、连翘水煎剂等3种连翘制剂对甲型流感病毒甲1型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)基因转染后表达的影响。方法:将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金检测3种连翘制剂对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用RT-PCR检测转染后Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果:NP重组质粒组上清胶体金检测为阳性,连翘苷组上清为阴性、细胞内为弱阳性;连翘水煎剂及连翘醇提物组上清均为弱阳性。连翘苷组NP基因表达量较NP重组质粒组减少(P<0.05)。结论:连翘苷抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达作用最强。
- 段林建胡伶清张清杨斌何士勤孙坚
- 关键词：连翘苷甲型流感病毒NP基因
- 甲型流感病毒核蛋白真核质粒的构建及其应用
- 目的构建甲型流感病毒核蛋白(nucleocapside protein,NP)基因真核表达质粒,探讨不同板蓝根制剂对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响,了解板蓝根抗流感病毒的有效成分。方法构建甲型流感病毒A/PR/8/34...
- 冯润徐咏书张清何士勤孙坚
- 文献传递
- 黄芩苷联合连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响被引量：14
- 2018年
- 目的病毒的高变异率,使得抗病毒药物的研发显得非常重要,文中探讨黄芩苷联合连翘苷对甲型流感病毒核蛋白(Nucleoprotein,NP)基因表达的影响。方法通过瞬时转染技术将甲型流感病毒核蛋白真核重组质粒pc DNA3.1(+)/核蛋白导入Hela细胞以建立甲型流感病毒核蛋白真核表达载体,检测黄芩苷(15.625μg/m L)联合连翘苷(12.5μg/m L)组核蛋白基因表达量。选用低、中浓度的黄芩苷(IC25、IC50)联合低、中、高浓度的连翘苷(IC25、IC50、IC75)进行药物联合实验,实验分为Hela细胞对照组;脂质体对照组;重组质粒转染组;黄芩苷IC25+连翘苷IC25组;黄芩苷IC25+连翘苷IC25组;黄芩苷IC25+连翘苷IC75组;黄芩苷IC50+连翘苷IC50组;黄芩苷IC50+连翘苷IC50组;黄芩苷IC25+连翘苷IC75组。转染后使用各实验组药物进行干预,继续培养48 h后,采用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定各实验组Hela细胞内核蛋白基因的拷贝量,评价黄芩苷联合连翘苷对靶细胞核蛋白基因表达的影响,并分析药物联合作用效果。结果重组质粒转染组核蛋白基因表达量为(62.868±13.587)×104copies/μL,Hela细胞对照组为(2.131±0.172)×104copies/μL,脂质体对照组为(1.627±0.489)×104copies/μL,黄芩苷联合连翘苷组为(7.596±2.066)×104copies/μL。黄芩苷IC25+连翘苷IC25组、黄芩苷IC25+连翘苷IC50组、黄芩苷IC25+连翘苷IC75组对靶细胞核蛋白基因表达的抑制率分别为:(37.87±9.11)%、(58.65±5.53)%、(79.12±5.35)%。通过Compu Syn软件分析药物联合指数CI分别为:1.242、0.954、0.947。黄芩苷IC50+连翘苷IC25组、黄芩苷IC50+连翘苷IC50组、黄芩苷IC50+连翘苷IC75组对靶细胞核蛋白基因表达的抑制率分别为:(62.00±4.26)%、(70.87±3.06)%、(83.00±2.90)%。通过Compu Syn软件分析药物联合指数CI分别为:0.895、0.855、0.892。黄芩苷联合连翘苷对核蛋白基因的表达的抑制作用总体表现为协同作用,低浓度黄芩苷与�
- 黄智生杨斌张清孙坚
- 关键词：黄芩苷连翘苷基因表达
- 黄芩总黄酮对甲型流感病毒核蛋白表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨黄芩总黄酮(Total flavonoids of Scutellaria baicalensis Georgi,TFSB)对甲型流感病毒核蛋白(NP)的干预作用。方法本实验设HeLa细胞组、pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组,其中pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)/NP组分别通过瞬时转染将重组质粒pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞中;TFSB组在将重组质粒pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞的同时使用TFSB进行药物干预。转染48 h后,采用胶体金免疫层析试纸法测维持液中NP的表达,荧光定量RT-PCR测NP基因起始核酸量。结果胶体金免疫层析试纸法测NP表达示:pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组为阳性;荧光定量RT-PCR示:pcDNA3.1(+)/NP组和TFSB组NP基因起始拷贝数分别为(8.90±2.53)×106copies/μl、(6.15±1.49)×106copies/μl,采用t检验进行统计学分析:差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩总黄酮对甲型流感病毒NP基因和NP的表达没有影响。
- 张清杨斌王农荣段林建何士勤孙坚
- 关键词：黄芩总黄酮核蛋白抗流感病毒药瞬时转染
- 鸡卵黄乙型肝炎特异性转移因子口服液的制备及其免疫活性鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子(EYHBV-STF)口服液,并鉴定其活性,探索一种新型、有效治疗乙肝的免疫调节剂。方法采用乙肝疫苗免疫母鸡,从卵黄中提取乙型肝炎病毒特异转移因子(HBV-STF),进行理化特性等检测。采用白细胞粘附抑制试验检测转移因子的免疫活性,将其制成口服液,经小鼠灌胃后,迟发型皮肤超敏反应试验鉴定其体内特异性细胞免疫活性,免疫脏器指数鉴定其非特异性免疫活性。同时分别与经注射或口服途径的EYHBV-STF组、传统方法制备的猪脾乙肝特异性转移因子组、猪脾非特异性转移因子组及未经免疫的鸡卵黄提取液组进行比较。结果 EYHBV-STF口服液各项理化特性及安全实验指标符合TF生物制品标准,体外实验能明显抑制正常小鼠白细胞黏附,体内实验能显著增强小鼠足垫肿胀度反应,提示该制品可将供体的乙肝抗原特异性皮肤迟发型超敏反应转移给受体,并能够显著提高免疫脏器指数(P<0.01),与注射EYHBV-STF、传统方法制备的注射、口服PHBV-STF对照组比较,各项实验指标结果相近(P>0.05)。结论口服EYHBVSTF与注射途径同样具有依赖乙肝抗原的特异性细胞免疫活性,可明显增强正常小鼠特异性细胞免疫功能。
- 徐燕萍张清湛学军谢大泽戴革杨慧
- 关键词：特异性转移因子乙型肝炎病毒口服液
- 连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响研究被引量：53
- 2012年
- 目的探讨连翘苷对甲型流感病毒核蛋白(NP)基因转染后表达的影响。方法将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金法检测连翘苷对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果 NP重组质粒组甲型流感病毒核蛋白含量高。空质粒组、脂质体组、Hela细胞组基本不含甲型流感病毒核蛋白。连翘苷组上清无或可能含有微量核蛋白。连翘苷组胞内甲型流感病毒含量不高。RT-PCR校正曲线相关性为0.998,效率为97.4%。重复4次转染后48 h连翘苷组NP基因表达量为(2.1±0.3)×105拷贝数/μl,NP重组质粒组NP基因表达量为(61.5±15.0)×105拷贝数/μl,连翘苷组NP基因表达量低于NP重组质粒组,差异有统计学意义(t=7.672,P<0.05)。结论连翘苷可以抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达。
- 段林建张清王农荣杨斌何士勤孙坚
- 关键词：连翘苷甲型流感病毒NP基因
- 莪术对免疫抑制小鼠免疫功能的影响被引量：20
- 2012年
- 目的探讨莪术(RC)对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法采用腹腔注射环磷酰胺(CY)复制免疫功能抑制小鼠模型,再给模型小鼠分别腹腔注射高、中、低剂量的RC(2.5、1.250、.625 g/kg),连续给药7 d。同时设正常对照组和免疫抑制模型组。末次给药后24 h进行免疫学检测;采用称重法测定胸腺、脾脏重量并计算脏器指数;镜检计数外周血白细胞数;比色法测定小鼠碳粒廓清指数和血清溶血素的含量;MTT法测定刀豆蛋白A(Co-nA)诱导的脾淋巴细胞增殖反应。结果低、中、高剂量RC能拮抗CY引起的小鼠脾萎缩和白细胞数量减少;高、中剂量RC能提高免疫抑制小鼠的碳粒廓清指数、促进血清溶血素的生成及提高ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应,且其作用强度呈剂量依赖性。但RC对免疫抑制小鼠胸腺指数无显著性影响。结论 RC能明显改善CY抑制的小鼠免疫功能,这可能是RC抗肿瘤的作用机理之一。
- 徐燕萍胡小庆湛学军谢大泽张清戴革
- 关键词：莪术免疫抑制小鼠
- TH17细胞/IL-17在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的作用研究
- 目的 在人体的免疫系统中,按照CD4+ T细胞分化和功能特征将其分为辅助性T细胞(Th)和调节性T细胞(Treg).Th细胞在适应性免疫应答中发挥重要的调节作用,根据产生的细胞因子不同,将Th细胞分为Th1和Th2两个亚...
- 张清孙坚
- 关键词：TH17细胞IL-17
- 黄芩醇提液对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨黄芩醇提液对甲型流感病毒核蛋白(NP)的作用。方法本实验设HeLa细胞组、pcDNA3.1(+)/empty组、pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组,其中pcDNA3.1(+)/empty组、pcDNA3.1(+)/NP组分别通过瞬时转染将重组质粒pcDNA3.1(+)/empty、pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞中;黄芩醇提液组在将重组质粒pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞的同时使用黄芩醇提液进行药物干预。结果与真核重组质粒pcDNA3.1(+)/NP组比较,黄芩醇提液组NP基因起始拷贝数具有统计学意义,P<0.05。结论黄芩醇提液能够下调甲型流感病毒NP基因的表达。
- 李平张清孙坚
- 关键词：核蛋白抗流感病毒药荧光定量RT-PCR
- 卒中相关性肺炎患者血清Th1/Th2细胞因子水平的变化及意义被引量：2
- 2014年
- 目的探讨卒中相关性肺炎患者血清Th1/Th2细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-4(IL-4)]水平的变化及意义。方法采用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)检测34例卒中相关性肺炎(卒中相关性肺炎组)、36例卒中(卒中组)和30例健康体检者(健康对照组)血清IFN-γ、IL-4水平。结果与健康对照组、卒中组比较,卒中相关性肺炎组血清IFN-γ、IFN-γ/IL-4比值均明显降低(均P<0.05),血清IL-4水平明显升高(P<0.05)。结论卒中相关性肺炎患者的IFN-γ减少,lL-4增多,Th1/Th2细胞介导的细胞免疫可能与卒中相关性肺炎的免疫功能失衡有关。
- 徐咏书方正旭张清孙坚
- 关键词：卒中相关性肺炎干扰素-Γ白细胞介素-4
