岳开华
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：福建农林大学作物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 太子参根际尖孢镰刀菌绝对荧光定量检测方法的建立及其应用被引量：6
- 2014年
- 根据太子参尖孢镰刀菌的测序结果,用设计的一对特异性引物,构建其分子定量检测方法,并进行不同连作年限太子参根际土壤中该尖孢镰刀菌的菌群定量分析,研究结果表明,结果表明:(1)扩增的阳性条带106 bp,特异性、敏感性结果显示,该PCR方法对太子参镰刀菌DNA的最低检测量为0.000 012 ng/μL,而禾谷镰刀菌、茄病镰刀菌、黄曲霉和解淀粉芽孢杆菌的扩增结果均为阴性。(2)运用此方法对该太子参镰刀菌的定量结果表明,尖孢镰刀菌随太子参连作年限的增加而逐年增多。该检测方法具有快速、准确、灵敏度高、易于操作等优点,并且实现了由定性向定量的跨越,可以为太子参根际微生态中该种病原菌的动态变化研究提供方法及依据,也为阐释太子参重茬连作时伴随爆发大规模病害提供了参考。
- 赵永坡初雷霞岳开华李振方林文雄
- 关键词：太子参连作障碍根际微生态尖孢镰刀菌QRT-PCR
- 绿色荧光蛋白标记下镰刀菌侵染地黄的组织学观察被引量：5
- 2015年
- 为分析对地黄有较强致病性的尖孢镰刀菌的侵染机制,本研究采用携带有潮霉素抗性标记的强组成型表达载体p CT74,经PEG-Ca Cl2介导的原生质体转化法导入镰刀菌,获得荧光信号强烈的s GFP标记菌株,并采用喷施接种和根部灌根接种。研究发现镰刀菌首先在地黄外部聚集繁殖,并通过伤口或气孔等通道侵入地黄维管组织,后逐渐导致周围海绵组织破裂,进而致使地下根茎逐渐变黑腐烂;由于地黄叶部气孔发达,使得镰刀菌由叶部侵入速度要快于根部灌根接种;不同孢子浓度接种实验表明镰刀菌对寄主的致害程度与其在叶部与根部的接种浓度并不呈相关性。进一步在接种处理后采集地黄叶部、茎部和根部组织提取真菌DNA后进行PCR扩增发现:在根部接种60h后即能检测到镰刀菌的侵入,经84h后侵入到地黄茎部组织,经96h后侵入到地黄叶部组织。该标记菌株可为今后探索地黄连作栽培中真菌病害大规模爆发的根际生物学过程提供研究材料。
- 刘晓燕罗振鹏崔伟康林漳丰岳开华王嵩瑞李振方
- 关键词：地黄尖孢镰刀菌连作障碍绿色荧光蛋白
