庞丽君
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都卫生发展科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 胰岛素样生长因子-2原核表达载体的构建与鉴定
- 2016年
- AFP是公认的肝癌血清标志物,但其敏感性及特异性有限,约30%的肝癌患者AFP阴性,但单一的AFP检测容易漏诊,越来越多的研究致力于寻找更多有效的肝癌血清标志物。人胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor 2,IGF2）较特异地表达于癌变肝细胞及部分不典型增生的癌前肝细胞,正常肝细胞则无表达,IGF2对于肝癌诊断具有重要的意义。
- 庞丽君王珊珊乔录新寇卜心陈德喜
- 关键词：原核表达载体血清标志物不典型增生异常凝血酶原促有丝分裂
- AFP截断体真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2015年
- 原发性肝癌在全球的发病率逐年增长，是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一。AFP具有多种生物学功能，参与调控肝癌的发生发展，在肝癌高危人群的筛查和肿瘤患者术后的随访中具有重要的应用价值。AFP的相对分子质量为70000，全长为590个氨基酸，含有1个寡糖组成的糖基。
- 王珊珊庞丽君陈德喜李刚
- 关键词：真核表达载体AFP原发性肝癌肝癌高危人群相对分子质量生物学功能
- 生长抑制肽表达载体的构建及鉴定
- 2017年
- 目的构建带有Flag标签的生长抑制肽(34p)的真核表达载体,并验证其表达与功能。方法抽提人肝癌细胞系HepG2的基因组DNA为模板进行PCR扩增目的片段,通过酶切连接,将DNA片段连接到p3XFLAGCMVTM-9表达载体上,进行测序验证;随后进行瞬时转染,通过免疫荧光实验验证该载体的表达情况,用流式细胞术实验证实其功能。结果测序结果显示载体构建成功,序列正确;免疫荧光结果证实该载体可以正常表达目的肽段;流式细胞术结果过表达34p组相较于转染空载组,细胞凋亡明显增加。结论成功构建了34p的真核表达载体,并验证其促凋亡的生物学功能,为后续的机制研究提供了研究手段和工具。
- 王珊珊乔录新庞丽君欧阳雅博李刚陈德喜
- 关键词：真核表达载体凋亡
- 胸苷激酶1原核表达载体的构建表达及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建p ET-28a-TK1融合基因表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达。方法提取人肝癌细胞(Hep G2)总RNA,应用RT-PCR、PCR技术扩增出TK1目的片段,将其与带有His标签的p ET-28a连接构建重组基因并测序鉴定;用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白在BL21大肠杆菌中表达;最后通过SDS-PAGE及Western Blot鉴定。结果以Hep G2细胞的c DNA为模板,扩增出663bp的目的片段,将其克隆到p ET-28a原核表达载体,经酶切及DNA测序鉴定质粒构建正确;IPTG诱导后实现可溶性表达,经Western Blot鉴定为TK1融合蛋白。结论成功构建了TK1重组表达质粒,并在原核细胞中获得高效表达,为进一步开发TK1诊断试剂奠定基础。
- 庞丽君王珊珊吴云欧阳雅博马杰
- 关键词：TK1克隆原核表达
- AFP抑制肝癌细胞中RA-RAR信号通路的传递被引量：1
- 2014年
- 目的探讨肝癌细胞系Hep G2和HLE中,AFP参与RA-RAR信号通路的作用方式及其意义。方法Western blotting检测这两种细胞中AFP与RAR的含量;ATRA处理细胞后,免疫荧光法检测细胞中RAR定位;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况;采用激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR在细胞中的定位情况;免疫共沉淀验证AFP与RAR的相互作用。结果 Western blotting结果显示Hep G2细胞为AFP阳性而HLE为阴性;免疫荧光结果显示加入ATRA后,RAR发生核转位和核聚集现象;FCM结果显示ATRA能够引起这两种肝癌细胞凋亡增加;激光共聚焦显微镜结果显示AFP与RAR在胞浆中存在共定位现象;免疫共沉淀结果证实在Hep G2细胞中AFP与RAR存在相互作用,而HLE因缺失AFP而检测不到。结论 AFP通过抑制RA-RAR信号通路的传递从而参与调控肝癌的发生发展。
- 王珊珊陈宁庞丽君欧阳雅博李刚陈德喜
- 关键词：肝癌AFPRAR信号通路
- 乙型肝炎病毒耐药突变位点连锁分析被引量：2
- 2015年
- 目的探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者经核苷(酸)类药物抗病毒治疗的耐药突变连锁模式。方法采用平行等位基因特异性序列检测技术(parallel allele-specific sequencing,PASS)对106例经核苷(酸)类药物抗病毒治疗的慢乙肝患者进行13个耐药位点的检测,并分析其耐药突变连锁模式。结果 90例检测到发生耐药突变,其中76.7%(69例)发生耐药位点连锁突变,连锁模式达39种。最主要的2个连锁突变模式为M204V+L180M和M204V+L180M+V173L,所占比例分别为58.0%(40例)和46.4%(32例),其次是M204I+L80I和M204V+V173L,所占比例分别为17.4%(12例)和15.9%(11例)。结论经核苷(酸)类药物抗病毒治疗的慢乙肝患者中广泛存在多个耐药位点的连锁突变,以拉米夫定相关耐药位点的连锁模式最常见。
- 吴云庞丽君李宁
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 高尔基体蛋白的基因克隆及原核表达
- 2015年
- 目的构建重组高尔基体蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中诱导表达,为进一步研发肝癌诊断试剂奠定基础。方法通过RT-PCR获得GP73目的片段,将其克隆入表达载体p ET-28a,经酶切及测序鉴定后,在BL21菌株中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Western Blot鉴定。结果扩增的片段大小与预期一致;p ET-28a-GP73重组质粒通过酶切鉴定与DNA测序证实序列正确;诱导的蛋白用SDS-PAGE电泳和Western Blot检测,与预期相符可见一特异性条带。结论成功获得GP73目的基因并构建了p ET-28aGP73原核表达载体,实现了该融合蛋白的可溶性表达。
- 庞丽君乔录新王珊珊马杰
- 关键词：GP73克隆原核表达肝癌
- 浅谈提升医学研究生科研能力的方法和途径被引量：9
- 2016年
- 随着医学的高速发展,医学研究生的数量也与日俱增,加强研究生的科研能力和科研兴趣,培养出高素质高质量的研究生是培养高层次医学人才的重要目标。
- 王珊珊庞丽君欧阳雅博陈德喜
- 关键词：医学研究生
