陈刚 作品数:13 被引量:184 H指数:7 供职机构: 青岛海洋大学海洋生命学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 “九五”国家科技攻关计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 天文地球 社会学 更多>>
益生菌制剂在水产养殖中的应用 被引量:62 2001年 俞勇 李会荣 李筠 陈刚 纪伟尚 徐怀恕关键词:益生菌制剂 水产养殖 饵料添加剂 水质调节剂 间接酶联免疫吸附技术检测活的非可培养状态的大肠杆菌O157:H7 被引量:23 2001年 大肠杆菌 O157:H7在低温贫营养的条件下可进入活的非可培养状态 (Viable butnonculturable state,VBNC) ,用常规的培养法无法将其检出。作者利用间接酶联免疫吸附技术(Indirect Enzyme- L inked Immunosorbent Assay,EL ISA)检测 VBNC的大肠杆菌 O157:H7,发现此方法可以快速有效地将其检出 ,最小检测浓度为 10 5个 / m L。 姚斐 沙莎 陈刚 纪伟尚 徐怀恕关键词:大肠杆菌O157:H7 环丙沙星作DNA抑制剂应用于活菌直接计数 被引量:6 2000年 参照Isabel方法用不同浓度的环丙沙星(Ciprofl oxacin),处理两株革兰氏阳性菌;北京棒状杆菌(Corynebacterium pakinense);枯草芽 孢杆菌(Bacillus subtilis)和两株革兰氏阴性菌:霍乱弧菌(Vibrio cholerae)和大肠杆 菌 O157:H7(Escherichia coli O157:H7)。结果发现经乳酸环丙沙星处理后的细菌形 态均变长变大,计数结果表明环丙沙星处理的细菌的活菌直接计数与用萘啶酮酸(Nalidixic acid)处理的活菌直接计数法(DVC)结果相似,高于平板菌落计数结果,而且对部分革兰氏 阳性菌也可应用此法进行活菌直接计数。 姚斐 陈刚 邱波 纪伟尚 徐怀恕关键词:环丙沙星 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 有益细菌A18在海湾扇贝(Argopecten irradians)育苗中的应用 被引量:21 2002年 在海湾扇贝D形幼虫期施用 10 3 ,10 4 ,10 5CFU/ml三个浓度的有益细菌A18。经该菌处理后 ,扇贝幼苗的变态率与各个发育期的成活率均比加氯霉素组和未加任何处理的对照组高。其中以 10 4 CFU/ml处理的扇贝幼苗的变态率和成活率最高。对实验扇贝幼苗水体细菌总数和弧菌数分析发现 ,经 10 5,10 4 CFU/mlA18菌处理水体的细菌总数和弧菌数均比相应的对照组低。在扇贝育苗水体加入 10 6,10 7,10 8CFU/ml的有益细菌A18,检测高浓度A18对扇贝幼苗的毒害作用 ,当该菌浓度在 10 6CFU/ml时 ,经 4 8小时扇贝幼苗成活率 79% ,高于对照组的 6 8 5 % ;当浓度达 10 7,10 8CFU/ml时 ,处理 4 8小时后的扇贝幼苗死亡率分别为 95 6 %和 10 0 %。 王祥红 杜宗军 陈刚 李筠 纪伟尚 徐怀恕关键词:育苗 有益细菌 海湾扇贝 成活率 变态率 人工养殖 副溶血弧菌菌株1211U的活的非可培养状态 被引量:11 2000年 将副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)菌株1211U培养于低温贫养条件下 ,以平板菌落计数法 (PC)和最大近似数法 (MPN)检测可培养细菌数 ,50~60d后表明可培养数下降为零。吖啶橙荧光显微镜直接计数法 (AODC)检测细菌总数 ,表明细菌总数始终变化不大 ,而活菌直接计数法 (DVC)检测到的活菌数保持在105个/ml。本实验证明了副溶血弧菌1211U株在一定的条件下可进入活的非可培养状态 (VBNC)。 姚斐 寇运同 陈刚 纪伟尚 徐怀恕关键词:细菌 大肠杆菌O157:H7的活的非可培养状态 被引量:4 2000年 将大肠杆菌 O157:H7培养于低温贫养条件下 ,以涂布平板法 (PC)和最大近似值法(MPN)检测可培养细菌数 ,95~ 115d后表明可培养菌数下降为零。吖啶橙荧光显微镜直接计数法(AODC)检测细菌总数 ,表明细菌总数始终变化不大 ,而活菌直接镜检计数 (DVC)检测到的活菌数保持在 10 6个 / m L。实验证明了大肠杆菌 O157:H7在一定的条件下可进入活的非可培养状态(VBNC)。 姚斐 陈刚 寇运同 纪伟尚 徐怀恕关键词:大肠杆菌O157:H7 改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA 被引量:15 1999年 本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。 李宏业 范树国 刘玉乐 陈刚 王寰宇关键词:聚丙烯酰胺 凝胶电泳 DNA检测 中国烟草曲叶病毒广西株的初步研究 被引量:4 2000年 Using DNA of Chinese Tobacco Leaf Curl Virus Guangxi(TbLCV Guangxi)as the template,a 0.4 kb virus specific fragment induding the total common region of the virus and DNA sequence of 52 aa of N terminal of AV1 was obtained by PCR with primers specific to whitefly transmittal gemniviruses,cloned and sequenced.This fragment can basically represent the characteristics of the virus full length genome.The sequence of this fragment is the same as that of chinese tomato yellow leaf curl virus (TYLCV Chi), which indicates that TbLCV Guangxi and TYLCV Chi are the same gemniviruses. According to the sequence of the common region of the 0.4 kb fragment, the virus full length genome DNA was amplified from the infected tobacco plant by PCR with primers back to back. 张颖 殷勤燕 刘玉乐 陈刚 蔡健和 田波关键词:中国烟草 曲叶病毒 双生病毒 TYLCV-CHI侵染诱导的抗病毒GFP标记的载体构建 2000年 以CTAB法提取含有番茄黄化曲叶病毒TYLCV-CHI病原的烟草曲 叶病烟草DNA为模板,扩增该病毒外壳蛋白启动子序列,克隆到pGEM7Z载体上,在启动子下 游连接上能表达毒素蛋白的RNase基因和终止子NOS,最终将构建的基因转移到带有绿色荧光 蛋白GFP的植物表达载体上,构建了通过病毒侵染后激发病毒外壳蛋白启动子从而表达毒素 基因,产生毒素杀死病毒防止感染继续扩散的自我保护机制的基因工程植物表达载体。 陈刚 王怀宇 刘玉乐 徐怀恕关键词:毒素基因 CTAB法 导致田间烟草曲叶病的又一病毒(非中国烟草曲叶病毒) 被引量:4 2000年 对病毒分离物DNA序列分析的结果表明,除曾报道的中国烟草曲叶病毒(TbLCV-CHI),还存在另一种能引起我国广西地区烟草曲叶病的双生病毒.该病毒DNA-A由2 734个核苷酸组成,与 TbLCV-CHI的已知的部分序列不同.其大基因间隔区(LIR)长 269 nt,病毒链有两个 ORF:AV1(115aa)和AV2(外壳蛋白基因,256aa);病毒互补链有4个ORF:AC1(复制酶基因,361aa)、AC2(反式激活蛋白, 134 aa)、 AC3(134 aa)和AC4(97 aa).其所处的地理位置、生物特性及序列分析均表明该病毒属于旧世界的亚组Ⅲ双生病毒,由它的序列推测可能是中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)的一个株系. 宫倩红 刘玉乐 洪益国 王环宇 陈刚 蔡健和关键词:烟草 双生病毒 DNA序列