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阎钟钰: 作品数：16 被引量：50H指数：4; 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>; 发文基金：北京市科技新星计划北京市优秀人才培养资助北京市重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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AAV为载体的含有HBV-C基因的重组病毒能有效感染树突状细胞: 目的研究腺相关病毒(AAV)为载体的含有HBV—C基因的重组病毒(rAAV—HBV～C)感染树突状细胞(DC)的效率及对DC生长和成熟的影响。材料和方法从正常人外周血中分离单个核细胞(PBMCs),收取单核细胞(mono...; 丛敏王萍阎钟钰唐淑珍王宝恩贾继东尤红; 文献传递

肝脏干细胞: 2003年; 近年来动物实验的结果已经证明肝脏确实存在干细胞.大多数肝损伤情况下是由肝细胞分裂、增殖来完成肝脏再生.; 阎钟钰安威; 关键词：肝脏干细胞肝损伤遗传性获得性肝脏疾病受精卵

丁酸钠诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化为成熟肝细胞被引量：13: 2004年; 目的探讨分化刺激剂丁酸钠对体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化的影响。方法从喂养含0.1％乙硫氨酸的胆碱缺乏性饮食4-6周的大鼠肝脏中分离出肝卵圆细胞,用免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法对其进行鉴定。用0.7 5 mmol/L丁酸钠处理大鼠肝卵圆细胞后,姬姆萨染色观察细胞表型改变,western blot检测细胞白蛋白的表达水平。结果免疫细胞化学结果显示分离出的细胞既表达成熟肝细胞的标志物白蛋白,也表达胆管细胞的标志物细胞角蛋白19,RT-PCR结果显示这些细胞还表达干细胞的标志物c-kit,但不表达造血干细胞的标志物CD3(?),表明这些细胞是大鼠肝前体细胞--肝卵圆细胞。0.7 5 mmol/L丁酸钠能诱导大鼠肝卵圆细胞出现明显的表型改变,细胞变大、变圆,核浆比减小,且双核细胞数增多,约占总细胞数的50％左右,同时western blot的结果显示0.75 mmol/L丁酸钠能够提高大鼠肝卵圆细胞白蛋白的表达水平。结论分化刺激剂丁酸钠能诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞向成熟肝细胞分化。; 王萍贾继东唐淑珍阎钟钰尤红丛敏王宝恩陈丽安威; 关键词：肝卵圆细胞丁酸钠成熟肝细胞体外培养人鼠

含乙型肝炎病毒C基因的重组腺相关病毒对树突状细胞的作用被引量：6: 2005年; 目的研究腺相关病毒(AAV)为载体的含有乙型肝炎病毒(HBV)C基因重组病毒(rAAV-HBV-C)感染树突状细胞(DC)的效率及对DC生长和成熟的影响。方法从正常人外周血中分离单个核细胞收取单核细胞进行体外培养,分别用rAAV-HBV-C和293细胞裂解物感染刺激单核细胞,感染后的单核细胞在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF α)存在的条件下继续培养获得成熟的DC。用逆转录聚合酶链反应及流式细胞仪细胞内染色检测目的基因(HBV-C)的转录及表达;通过观察不同时间DC的形态及检测收获DC时其表面分化抗原(CD)的表达来评价DC的生长和成熟状态。结果 rAAV-HBV-c感染后的DC可转录HBV-C基因并表达HBV-C抗原,病毒感染组与对照组收获的DC在细胞形态与CD表达方面差异无统计学意义。结论 rAAV-HBV-C可有效感染DC,感染的病毒对DC的生长及成熟没有显著影响。; 丛敏王萍阎钟钰唐淑珍王宝恩贾继东刘勇尤红; 关键词：HBV 乙型肝炎病毒单核细胞 C基因

重组腺相关病毒高效感染体外培养的肝卵圆细胞: 目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)感染肝卵圆细胞的效率。方法从喂饲含0．1％乙硫氨酸的胆碱缺乏性饮食4～6周的大鼠肝脏中分离出肝卵圆细胞。用携带有Neomycin(Neo)基因的重组腺相关病毒感染大鼠肝卵圆细胞,3天后用...; 王萍阎钟钰丛敏唐淑珍王宝恩贾继东刘勇尤红; 文献传递

带有HBV基因的腺相关病毒为载体的重组病毒感染树突状细胞的研究被引量：1: 2007年; 目的探讨腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）为载体的含有HBV—S、C或X基因的重组病毒（rAAV—HBV—S，C，X）感染正常人树突状细胞的效率。方法分别构建含有HBV-S、C和x基因的从v质粒，在293细胞中包装成重组病毒，测定病毒滴度。从正常人外周血中分离出单核细胞进行体外培养，在培养的第1天分别用rAAV—HBV—S、C、X和作为对照的293细胞裂解液感染刺激单核细胞，感染后的单核细胞在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7d获得成熟的树突状细胞。用RT-PCR及流式细胞仪细胞内染色检测HBV基因的RNA和蛋白的表达。结果重组rAAV—HBV—S、C、X的病毒滴度可以达到10^7拷贝／ml，用重组病毒分别感染树突状细胞。与对照组相比，感染的树突状细胞可表达相应的HBV基因RNA，流式细胞仪检测显示约90％的树突状细胞有相应HBV蛋白的表达。结论rAAV-HBV可有效感染树突状细胞，提示可以通过该途径刺激树突状细胞提呈抗原。; 尤红丛敏王萍阎钟钰徐雍卢炎王宝恩贾继东; 关键词：依赖病毒树突细胞

大鼠肝脏干细胞的分离、培养及肝刺激因子对其增殖的研究: 干细胞(stemcell)的研究是近年来细胞生物学领域的热门课题.传统概念认为干细胞应定义为:具有增殖能力,并能产生大量后裔的未分化细胞,干细胞只存在于增殖旺盛的组织,如骨髓,上皮,这些组织一旦受到损害,可通过干细胞增殖...; 阎钟钰; 关键词：密度梯度离心法卵圆细胞肝脏干细胞; 文献传递

重组肝刺激因子对肝脏卵圆细胞增殖的作用被引量：3: 2004年; 目的　观察重组人肝刺激因子 (hHSS)对肝脏卵圆细胞增殖的影响。　方法　分离大鼠肝卵圆细胞 ,加以培养 ,并进行细胞学鉴定。将重组的hHSS作用于肝脏卵圆细胞 ,以MTT法、流式细胞术观察其对卵圆细胞的增殖作用。　结果　实验分离的卵圆细胞同时表达肝细胞和胆管细胞特异性标志物。给予重组hHSS作用 1 2～2 4h后 ,细胞增殖速度减缓 ,细胞DNA合成减弱 ,其作用的最有效浓度为 2 4 0mg L。　结论　重组hHSS能抑制卵圆细胞的增殖。; 阎钟钰王萍贾继东安威; 关键词：卵圆细胞细胞周期分析

荧光定量聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶组织抑制因子-1方法的建立被引量：11: 2005年; 目的构建含有金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的重组质粒并以其为模板建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测TIMP-1的标准曲线,为荧光定量PCR准确检测TIMP-1奠定基础.方法提取大鼠星状细胞系HSC-T6的mRNA,经RT-PCR扩增TIMP-1基因后与pGMT-Vector 连接,转化到大肠杆菌DH5α,以筛选得到的阳性克隆质粒作为标准品进行梯度稀释,分别用Taqman荧光探针技术和SYBR Green I荧光染料技术进行荧光定量PCR检测,建立标准曲线,并对两者结果进行了对比.同时进行普通PCR检测,与荧光定量PCR方法检测结果进行比较.结果重组质粒经PCR扩增及序列测定,表明pGMT-TIMP-1基因已成功克隆.以不同稀释水平的标准品质粒进行荧光定量PCR扩增, 应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线的线性检测范围为7×104～7×108拷贝,检测灵敏度为7×104拷贝;应用SYBR Green I荧光染料技术的线性检测范围为7×106～7×108拷贝,检测灵敏度为7×106拷贝,且熔解曲线显示出现非特异性扩增;两种技术相对于普通PCR技术均具有定量功能.结论所构建的pGMT-TIMP-1基因荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好, 灵敏度和特异性高,准确可靠,此方法可作为荧光定量PCR检测TIMP-1基因的标准方法.; 丛敏阎钟钰王萍张岩徐雍卢炎王宝恩贾继东尤红; 关键词：基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 荧光定量聚合酶链反应检测荧光定量PCR方法 RT-PCR扩增 HSC-T6 SYBR

肝脏干细胞研究进展与治疗前景被引量：4: 2002年; 刘天会贾继东阎钟钰; 关键词：肝脏干细胞肝疾病

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