金培生
- 作品数:69 被引量:152H指数:7
- 供职机构:徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省卫生厅资助项目四川省科技攻关计划徐州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学艺术更多>>
- 基质细胞衍生因子-1通过CXCR4/CXCR7提高脂肪干细胞促血管化能力
- 刘静张爱君陶常波李雪阳马志兵金培生
- 结缔组织生长因子基因沉默对人体瘢痕疙瘩移植动物模型中Ⅰ型胶原表达的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异沉默裸鼠人体瘢痕疙瘩(KD)移植模型中的结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),为KD的基因治疗提供依据。方法构建裸鼠人体KD移植动物模型,利用扩增好的质粒对动物模型进行体内转染,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析实验组与对照组CTGF硬Ⅰ型胶原mRNA表达差异,免疫组织化学染色分析CTGF及Ⅰ型胶原蛋白表达差异。结果实验组CTGF mRNA及蛋白表达量均显著降低(P〈0.05),体内转染可显著抑制CTGF表达;实验组Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达量显著降低(P〈0.05)。且Ⅰ型胶原与CTGF的表达量呈正相关(r=0.979)。结论体内环境下抑制CTGF的表达可降低KD中Ⅰ型胶原的水平,CTGF体内转染可望影响Ⅰ型胶原的生成,从而抑制KD的生长。
- 杜勇金培生张爱君陶常波李雪阳李强沈才齐
- 关键词:瘢痕疙瘩RNA干扰结缔组织生长因子动物模型
- 不同年龄阶段人脱细胞真皮的制备及性状分析被引量:2
- 2013年
- 目的 制备不同年龄阶段的人脱细胞真皮(ADM),并进行体外生物学性状分析,探讨年龄差异对ADM孔隙率、细胞毒性、体外降解性的影响.方法 利用氢氧化钠消蚀+冻融法制备ADM,对比青年人与老年人皮肤制备的ADM孔隙率、细胞毒性、体外降解性等的差异.结果 成功获得ADM,2组ADM细胞毒性低、体外降解性能良好,老年组ADM孔隙率较青年组更理想.结论 氢氧化钠消蚀+冻融法制备的ADM性状优良,老年ADM较青年人更为理想.
- 张爱君李强崔莹莹金培生陶常波李雪阳马志兵沈才齐
- 关键词:脱细胞真皮细胞毒性降解性组织工程皮肤
- shRNA-CTGF重组质粒对瘢痕疙瘩Ⅰ型胶原蛋白表达的影响被引量:2
- 2014年
- 目的 构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-CTGF重组质粒(简称shRNA-CTGF),通过RNA干扰(RNAi)技术对结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)进行体内、体外干预,分析其对瘢痕疙瘩Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)表达的影响.方法 设计并构建特异性shRNA-CTGF重组质粒,RNAi转染体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast,KFB),检测CTGF基因沉默情况及KFB分泌的COL Ⅰ量;将shRNA-CTGF重组质粒对构建的裸鼠瘢痕疙瘩动物模型进行体内转染,检测CTGF基因沉默情况及COL-Ⅰ基因、蛋白表达水平.结果 成功构建了CTGF重组质粒,其在体内、体外环境下均可成功沉默CTGF表达,其抑制率为86.8%和54.1%;RNA体外干扰KFB定向沉默CTGF的同时可显著抑制COL-Ⅰ表达,其mRNA、蛋白水平抑制率分别为76.8%和65.6%;RNA体内干预实验也可显著降低COL-Ⅰ表达,其mRNA、蛋白水抑制率分别为52.7%和48.0%.结论 shRNA-CTGF重组质粒在体外及体内环境下均可成功沉默CTGF基因表达,沉默CTGF能显著降低瘢痕疙瘩中COL-Ⅰ蛋白含量,提示CTGF基因是病理性瘢痕治疗的潜在靶点.
- 沈才齐金培生李雪阳张爱君陶常波李强马志兵
- 关键词:瘢痕疙瘩结缔组织生长因子CONNECTIVE
- 自体富血小板血浆对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响被引量:7
- 2011年
- 目的建立一种骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养新方法,以避免因使用异种血清培养带来的伦理学争议、传播疾病和潜在抗原性等问题,同时满足细胞对各类生长因子的需求。方法经兔耳中央动脉取血并制备富血小板血浆(PRP)。从兔髂骨抽取骨髓,富集BMSCs,分为PRP组、胎牛血清(FBS)组和无血清组,分别采用10%PRP、10%FBS与元血清,配比DMEM.F12培养。观察各组细胞形态、检测细胞增殖活性并绘制生长曲线、表型表达和碱性磷酸酶(ALP)活性。结果3组细胞均在接种后24h左右开始贴壁,并由圆形逐步变为梭形、多角形和不规则形等。3组细胞生长曲线均呈“s”形,PRP组与FBS组增殖明显快于无血清组(P〈0.01),PRP组增殖快于FBS组(P〈0.05)。第4代PRP组与FBS组CD44阳性率分别为88.73%和85.66%、CD90为84.32%和87.58%,均呈阳性表达;CD34为12.38%和14.76%、CIM5为10.47%和11.82%,均呈阴性表达。FBS组和无血清组第1~5代ALP活性相似;但PRP组随着传代而逐渐升高,第4、5代ALP活性(6.42±0.89)U/100ml,(7.02±0.92)U/100ml显著高于其第1、2代(4.27±0.74)U/100ml,(4.70±0.76)U/100ml(P〈0.01),以及高于第4、5代FBS组和无血清组(P〈0.01)。结论自体PRP能有效促进BMSCs增殖,细胞形态、增殖活性及表型与FBS组基本一致;而ALP活性逐代升高,提示PRP有诱导BMSCs向成骨细胞分化的潜能。
- 马志兵袁峰冯虎金培生
- 关键词:骨髓间充质干细胞血小板血浆
- 菱形皮瓣在扩张软组织修复缺损中的应用被引量:3
- 2007年
- 目的探讨菱形皮瓣的设计在扩张皮瓣中间松弛部分充分利用的意义。方法扩张后的软组织在设计旋转皮瓣修复缺损时如果中间松弛部分不能充分利用,在旋转皮瓣上再次设计菱形皮瓣来充分利用扩张后的软组织。结果本组9例,在旋转皮瓣上再次设计菱形皮瓣,皮瓣全部存活,个别病例菱形皮瓣尖部早先轻度淤血。结论该设计较充分、合理地利用了扩张后的软组织,最大可能地修复了缺损,只要设计合理,是安全和值得推广的。
- 金培生余萍陶常波李雪阳
- 关键词:菱形皮瓣扩张皮瓣
- 人新型脱细胞真皮制备及性状分析被引量:10
- 2016年
- 背景:早期快速血管化是创面修复的关键。高孔隙率、大孔径的真皮支架可以促进种子细胞更快更好的黏附、生长、迁移并促进创面修复中血管化的快速形成。目的:通过改良人脱细胞真皮基质制备方法,以期得到孔隙率高、细胞渗透性更好、组织相容性良好的同种异体皮。方法:健康成人皮肤,分别用传统方法及改良方法脱去细胞成分。改良方法采用无菌条件下剪除皮下脂肪组织,1 mol/L NaC l溶液37℃24 h,去表皮,2%NaO H 45℃摇床处理4 h,PBS冲洗至溶液成中性,冷冻干燥,4℃保存备用。对两种方法制备脱细胞真皮基质孔隙率、体外降解时间的差异及材料浸润液对脂肪干细胞毒性进行检测;苏木精-伊红染色、扫描电镜检测其脱细胞效率、胶原完整性、脂肪干细胞细胞相容性及支架孔隙等。结果与结论:两种处理方法均可完整脱去细胞成分,并较好保持胶原支架的完整性;改良型脱细胞真皮基质孔隙率达(93.22±0.99)%明显高于传统(74.28±2.06)%(P<0.001);体外降解时间无明显差异(P>0.05);改良方法制备脱细胞真皮材料浸润液对干细胞无明显细胞毒性;改良脱细胞真皮基质基底面接种细胞3-7 d后细胞可突破基底层并迁移、游走至真皮深面,传统脱细胞真皮基质中细胞在基底面单-复层生长,无明显真皮浸润。结果提示新型脱细胞真皮基质拥有较传统脱细胞真皮基质更大的孔径、孔隙率,更适合细胞的浸润生长。
- 姜涛张爱君李雪阳马志兵沈才齐金培生
- 关键词:脱细胞真皮种子细胞生物支架组织相容性组织工程皮肤
- 595nm脉冲染料激光治疗草莓状血管瘤被引量:1
- 2007年
- 目的探讨595nm脉冲染料激光治疗草莓状血管瘤的临床疗效。方法用595nm脉冲染料激光治疗草莓状血管瘤119例。结果595nm脉冲染料激光治疗草莓状血管瘤的痊愈率为73.1%,有效率为98.3%。结论595nm脉冲染料激光治疗草莓状血管瘤的临床疗效好,不良反应少。
- 魏志平郝英姿刘彦群金培生李艳
- 关键词:草莓状血管瘤
- 不同年龄阶段人脱细胞真皮的制备及细胞渗透性研究
- 张爱君李强崔莹莹金培生陶常波李雪阳马志兵沈才齐
- 病理性瘢痕裸鼠动物模型的建立
- 目的同时构建裸鼠瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的动物模型并作一些改进尝试,验证该模型在病理性瘢痕研究中的可行性,为该模型的成熟积累部分资料。方法 8×8×5 mm 的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩块
- 金培生岑瑛刘晓雪陈俊杰许学文刘勇李晶晶王耀军
- 文献传递