郭晋优
- 作品数：12 被引量：78H指数：5
- 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 荧光RT-PCR检测活禽和禽组织中禽流感病毒的研究被引量：41
- 2004年
- 本研究根据A型流感病毒的核酸保守区共有序列 ,开发、设计多条引物和探针序列 ,从中筛选敏感、特异的引物、探针 ,在循环参数、病毒核酸提取方法及逆转录条件优化的基础上 ,建立了快速的通用型“一步法”检测活禽或禽产品中所有A型禽流感病毒的荧光RT -PCR检测技术。该方法敏感性高、特异性强 ,与国际标准方法———世界动物卫生组织 (OIE)确定的鸡胚病毒分离相比 ,敏感性基本一致 ,可直接用来检测咽喉 /泄殖腔拭子和禽肉中的禽流感病毒 ,将检测时间从原来最短所需要的 2 1d缩短为 4h。
- 张鹤晓赖平安刘环刘继红郭晋优谷强张利峰汪琳段生涛张向东朱文斯杨伟黄茜华赖少梅李宁
- 关键词：荧光RT-PCR禽流感病毒血凝素神经氨酸酶
- 荧光RT-PCR检测活禽和禽产品中新城疫病毒中强毒株的研究被引量：6
- 2006年
- 本研究中，采用TaqMan方法，根据新城疫病毒F基因核苷酸序列，设计合成多对引物，在上游引物和下游引物之间设计多条探针，通过对引物、探针的筛选，反应条件的选择和优化，建立了检测活禽和禽产品中中强毒力新城疫病毒的荧光RT-PCR方法。经对10株倍比稀释的中强毒力新城疫病毒的尿囊液进行检测后，表明所建立的荧光RT-PCR方法的检测极限在10^-5～10^-7”之间，略低于鸡胚病毒分离方法（10^-8～10^-9）；对收集到的所有新城疫病毒株和常见禽类病毒（包括禽流感病毒H5、H9亚型、IBDV、IBV、KIBV、CAAV、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒）进行检测，结果表明建立的方法不能检出其他的常见禽类病毒，特异性良好。进一步用建立的荧光RT-PCR检测人工感染SPF肉鸡的组织脏器、咽喉及泄殖腔拭子及临床样品中的中强毒力的新城疫病毒，并同鸡胚分离结果比较，结果表明荧光RT-PCR的敏感性同鸡胚分离试验基本一致。由于荧光RT-PCR方法快速，从处理样品开始到出结果只需不到4小时，而且检测样品量大，这就充分显示了其快速、敏感、特异的优势。在强调口岸快速通关的今天，该方法的建立无疑为活禽或禽产品的快速检验检疫提供了有效的手段。
- 张鹤晓赖平安高志强刘环刘继红郭晋优谷强张利峰杨伟李宁
- 关键词：荧光RT-PCR新城疫病毒
- 荧光RT-PCR快速检测活禽和禽产品中新城疫病毒中强毒株的研究
- 魏传忠张鹤晓赖平安朱文斯孙颖杰刘环杨伟刘继红郭晋优谷强张利锋赖少梅刘艳华汪琳李宁段生涛张向东黄茜华
- 我国是一个养禽大国，禽产品主要出口日本、韩国、欧盟等国家，2001年韩国宣称从中国出口的鸭肉中分离出禽流感病毒H5亚型，并停止从我国进口禽肉，日本根据韩国的决定，加强了对我禽产品的检疫，仅去年就从中国出口的禽肉中11次分...
- 关键词：
- 关键词：新城疫病毒荧光聚合酶链反应
- 病毒分离结合荧光抗体技术与抗原捕获ELISA检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原的敏感性比较研究被引量：7
- 2005年
- 本研究通过体外增毒,再测定病毒的TCID50,然后将病毒培养物作系列稀释,比较了细胞传两代进行荧光抗体染色法与三种商品化的抗原捕获ELISA试剂盒(包括IDEXX公司生产的BVDV抗原检测试剂盒、POURQUIER生产的P80检测试剂盒及NSP2-3/E0检测试剂盒)检测病毒抗原的敏感性。结果表明,传两代进行荧光抗体染色的方法可检出10-6稀释的50μL细胞毒(0.12个TCID50),而三种商品化进口ELISA试剂盒分别只能达到10-2(1.2×103个TCID50)和10-1(1.2×104个TCID50)稀释的50μL细胞毒。尽管传两代进行荧光抗体染色的方法相对繁琐,但这种方法的敏感性是抗原捕获ELISA难以比拟的,因而更适合于血清中BVDV病毒抗原的检测。
- 高志强张鹤晓刘继红郭晋优吴丹谷强
- 关键词：荧光抗体技术牛病毒性腹泻病毒ELISA检测敏感性
- 马流感血凝及血凝抑制试验的研究与应用被引量：4
- 2003年
- 研究马血清的 4种前处理方法 ,同时对比研究了吐温 80 /乙醚处理马流感病毒的血凝效果 ,筛选出了能有效去除马血清中非特异性血凝抑制因子的最佳方法。最后 ,通过对 85 2例进口马的血清检测 ,普查了从北京口岸进口马匹中马流感抗体的有无 ,及其抗体水平的高低 ,为马流感抗体水平的检测提供了一种灵敏度比较高的方法。
- 张利峰张鹤晓谷强赖平安郭晋优刘继红刘环
- 关键词：血凝试验流行性感冒病毒血凝抑制试验
- 从古巴和瑞士进境信鸽强致病力新城疫病毒的分离及鉴定
- 2001年
- 赖平安陈世松郭晋优赵增连王建
- 关键词：信鸽新城疫病毒卫生检疫
- 荧光RT-PCR快速检测高致病力禽流感病毒H5亚型
- 魏传忠赖平安张鹤晓朱文斯刘环刘继红郭晋优谷强张利锋黄茜华杨伟宋维平刘月焕段生涛张向东
- 该课题组根据高致病力禽流感病毒H5亚型血凝素（HA）特有的基因序列，合成特异性强的引物和探针，利用荧光RT-PCR检测技术，检测方法易于标准化等优点，经引物、探针筛选及其最佳配比比例优化，离子浓度、循环参数、检样体积及核...
- 关键词：
- 关键词：荧光RT-PCR禽流感病毒
- 新城疫病毒通用型实时RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：9
- 2005年
- 采用Taq Man方法,经引物和探针的设计、筛选及反应条件优化,研究了检测活禽和禽产品中新城疫病毒的通用型实时RT-PCR(RRT-PCR)方法.结果显示,对12株分别为速发型、中发型、缓发型和疫苗株新城疫病毒的尿囊液倍比稀释液的检测极限在10-5～10-7之间;建立的方法与常见禽类病毒无交叉反应,特异性良好;在检测人工感染肉鸡的脏器组织、咽喉、泄殖腔拭子中病毒的灵敏度同鸡胚分离试验基本一致;弱毒疫苗免疫鸡群在免疫后14 d,应用本方法不能从咽喉、泄殖腔拭子中检测到病毒;临床样品检测表明,该方法不仅可以检出中强毒力新城疫毒株,也可检出缓发型野毒株和疫苗毒株.
- 张鹤晓高志强赖平安张利峰谷强杨伟刘继红郭晋优段生涛张向东
- 关键词：新城疫病毒
- 禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用被引量：4
- 2006年
- 采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法。所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%。实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障。
- 乔彩霞张鹤晓高志强谷强吴丹蒲静郭晋优刘继红
- 关键词：核蛋白琼脂免疫扩散试验
- 牛阴茎纤维乳头状瘤的检疫技术及防止传入对策被引量：2
- 2002年
- 为防止在进口种用公牛的同时传入牛阴茎纤维乳头状瘤 ,详细介绍了牛阴茎纤维乳头状瘤的危害及如何从临床发现该病 ,如何从病理学和病原学确诊该病。介绍了北京局近年来检出该病情况。从把关角度 ,提出了防止该病传入的对策。
- 张鹤晓刘继红刘环郭晋优谷强
- 关键词：检疫技术病理学病原学传染病
