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郭学敏

作品数：5 被引量：3H指数：1
供职机构：教育部更多>>
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合作作者

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇锥虫
  • 3篇布氏锥虫
  • 2篇蛋白
  • 2篇亲和
  • 2篇活性
  • 2篇串联亲和纯化
  • 2篇纯化
  • 1篇单胞菌
  • 1篇蛋白复合物
  • 1篇亚胺培南
  • 1篇手足
  • 1篇手足口
  • 1篇手足口病
  • 1篇酸钠
  • 1篇特性分析
  • 1篇铜绿
  • 1篇铜绿假单胞
  • 1篇铜绿假单胞菌
  • 1篇锌指
  • 1篇锌指蛋白

机构

  • 5篇中山大学
  • 2篇教育部
  • 2篇梅州市人民医...

作者

  • 5篇郭学敏
  • 2篇孟小斌
  • 1篇刘健
  • 1篇郭学敏
  • 1篇周淑如
  • 1篇岳莎
  • 1篇刘罗根

传媒

  • 2篇中国热带医学
  • 2篇热带医学杂志
  • 1篇生物化学与生...

年份

  • 2篇2019
  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
紫外交联合并串联亲和纯化高效鉴定蛋白复合物组分的RNA结合活性
2014年
RNA结合蛋白在RNA的生成与代谢中发挥着重要作用.我们在近年报道的PAR-CLIP(photoactivatableribonucleoside-enhanced crosslinking and immunoprecipitation)技术的基础上建立了一套快速、有效鉴定RNA结合蛋白的实验方法:以串联亲和纯化替代一步免疫沉淀获得高纯度蛋白-RNA复合物;将Sypro Ruby蛋白染色与RNA放射自显影相结合判断复合物中哪种或哪些组分为RNA结合蛋白,该方法命名为紫外交联合并的串联亲和纯化(cross-linkingand tandem affinity purification,CLiTAP).运用该方法对布氏锥虫的三种锌指蛋白ZC3H7、ZC3H34和ZC3H5进行分析,发现ZC3H7作为帽结合蛋白复合物的核心组分具有很强的RNA结合能力;ZC3H34结合RNA能力较弱,但其互作蛋白具有强的RNA结合活性;相比之下,ZC3H5及其复合物组分皆无RNA结合活性.这些结果表明,CLiTAP与蛋白质鉴定方法相结合,能够有效鉴定靶蛋白复合物中的RNA结合蛋白种类,也为进一步定位RNA结合位点、研究RNA结合蛋白的结构及作用机制奠定了基础.
岳莎周淑如郭学敏
关键词：串联亲和纯化RNA结合蛋白布氏锥虫
布氏锥虫未知CCCH-型锌指蛋白TbZC3H8功能特性的初步分析
2013年
目的通过RNAi和蛋白复合物鉴定来初步分析布氏锥虫未知锌指蛋白TbZC3H8的特性及功能。方法运用蛋白数据库和分析软件对TbZC3H8进行序列分析和结构域预测;构建RNAi诱导表达细胞株分析TbZC3H8经RNAi敲低后对锥虫生长的影响,并通过RT-QPCR和Western blot检测RNAi干扰效率;构建异位融合表达myc-TAP标签的TbZC3H8细胞株,采用串联亲和纯化合并质谱鉴定其蛋白复合物组成;采用免疫荧光分析蛋白定位。结果 TbZC3H8的CCCH结构域在动基体原虫中高度保守;RNAi下调TbZC3H8后明显抑制了锥虫复制;TbZC3H8蛋白复合物中包含多种未知蛋白和两种RNA结合蛋白;TbZC3H8蛋白定位于胞质中,血清饥饿和热刺激对其定位无影响。结论 TbZC3H8是锥虫生长必需的,TbC3H8与RNA结合蛋白的相互作用暗示其可能在RNA加工代谢中发挥着作用。
雷霁卿刘罗根郭学敏
关键词：布氏锥虫RNAI串联亲和纯化
亚胺培南和阿米卡星双耐药铜绿假单胞菌的特性分析被引量：3
2019年
目的通过分析亚胺培南(IPM)和阿米卡星(AMK)同时耐药的铜绿假单胞菌的特性,为探讨耐药机制、评估菌株临床危害提供实验数据。方法针对临床分离的25株铜绿假单胞菌,采用Etest试纸条法测定IPM、AMK的最小抑菌浓度(MIC);通过RT-qPCR检测外排泵MexY和膜孔蛋白OprD表达水平;通过结晶紫染色测定生物膜形成能力;采用氯仿萃取法测定绿脓菌素产生量。结果依据25株铜绿假单胞菌对IPM和AMK的敏感度不同将其分为GroupⅠ(5株,IPM敏感或中介、AMK敏感)、GroupⅡ(8株,IPM耐药、AMK敏感或中介)、GroupⅢ(12株,IPM、AMK均耐药)三组,其中对AMK耐药的菌株同时对IPM耐药。GroupⅢ菌株在生物膜形成能力和绿脓菌素产量上明显强于GroupⅠ和GroupⅡ菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。与参考菌株ATCC27853比较,GroupⅢ菌株的外排泵mexY表达显著上调4～12倍、膜孔蛋白oprD表达显著下调70%～80%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AMK耐药的铜绿假单胞菌极可能对IPM耐药;生物膜形成能力、mexY和oprD的表达变化可能参与了铜绿假单胞菌对IPM和AMK的同时耐药。
高倩倩孟小斌陈雪芹丘清华郭学敏
关键词：铜绿假单胞菌亚胺培南阿米卡星耐药
米托蒽醌的抗锥虫活性及其作用机制
2015年
目的分析米托蒽醌体外抗锥虫的作用机制并考察其体内抗锥虫活性。方法通过倍比稀释合并alamar Blue染色测定米托蒽醌体外抗血流型布氏锥虫427（T.brucei BF427）的量-效和时-效曲线,并与抗锥虫药物喷他脒和美拉胂醇进行比较;通过DAPI染色、细胞周期表型分析考察米托蒽醌的抗锥虫作用机制;采用血虫症小鼠考察米托蒽醌的体内抗锥虫活性,米托蒽醌经腹腔给药,生理盐水为对照组;每天取血计数血虫密度;用药7d后停药,计算小鼠存活率。结果量-效曲线测得米托蒽醌对体外培养锥虫（起始密度为1×10^6个/mL）24h MIC为9.7μM;时-效曲线显示米托蒽醌和喷他脒都可显著抑制锥虫生长、持续降低锥虫密度;而经美拉胂醇处理后的锥虫密度在12 h内仍缓慢增长、随后出现明显降低;因此,在MIC作用浓度下米托蒽醌的体外抗锥虫活性好于美拉胂醇、与喷他脒相似。对照组小鼠的血虫密度迅速增加,感染6d时全部死亡;米托蒽醌明显抑制小鼠血虫增长,停药后2d小鼠出现死亡,最长存活14d,存活时间明显延长。DAPI染色和细胞周期表型分析显示锥虫核内（N）基因组DNA的复制受到抑制、而动基体（K）DNA的复制不受影响,表现为1N2K细胞型的比例明显上升,由10.8%上升至17.5%,2N2K细胞型的比例明显下降,由6.3%下降至3.0%。结论米托蒽醌具有体内抗锥虫活性,抑制锥虫核内基因组DNA的复制并使其产生损伤是作用机制之一。
李坤饶郭学敏
关键词：昏睡病布氏锥虫米托蒽醌
夫西地酸钠抗肠道病毒EV-A71的活性分析
2019年
目的分析夫西地酸钠在细胞水平上的抗肠道病毒活性并分析其抗EV-A71的作用机制。方法通过空斑分析测定夫西地酸钠在RD细胞中抗EV-A71和CV-A16的量-效曲线;通过加入时间分析(time of addition)、病毒吸附及内吞实验、反转录-定量PCR(RT-qPCR)测定病毒RNA水平在复制周期中的变化、携带GFP的病毒RNA(EV-A71-GFP RNA)转染合并荧光观察以及双报告基因分析初步确定夫西地酸钠阻断EV-A71复制的作用机制。结果夫西地酸钠可以显著抑制EV-A71和CV-A16在RD细胞中的复制,MOI为0.001时IC50分别为3.56μmol/L和5.41μmol/L。夫西地酸钠抑制EV-A71复制主要发生在复制早期阶段,降低了病毒RNA的丰度和病毒蛋白的合成水平,但不影响病毒的吸附和内吞;与未经药物处理的对照组相比,EV-A71感染5 h和8 h时,夫西地酸钠导致EV-A71 RNA相对丰度降低了大约70%;EV-A71-GFP RNA在292A细胞中的翻译明显受到夫西地酸钠的抑制,GFP阳性细胞明显减少;夫西地酸钠对EV-A71 5′-UTR所驱动的报告基因翻译抑制程度为30%。结论夫西地钠酸具有抗肠道病毒活性,主要通过直接或间接抑制病毒基因组RNA复制以及干扰病毒蛋白合成或加工而发挥抗EV-A71活性。
刘健刘健孟小斌孟小斌郭学敏
关键词：手足口病夫西地酸钠抗病毒活性
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