边杉
- 作品数：14 被引量：110H指数：5
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 条纹斑竹鲨鱼肝再生差异表达新基因NT7.1的原核表达及产物活性分析
- 2009年
- 目的NT7.1是一种鲨鱼肝脏再生过程中表达下调的功能基因片断,编码一个由134个氨基酸残基组成的假设蛋白。本研究的目的在于获得其重组蛋白,并检测该重组蛋白对肿瘤细胞增殖的作用。方法利用T4DNA连接酶将该编码序列连接到pET-28a载体中,通过CaCl2法转化到E.coli BL21中获得表达该基因的工程菌;工程菌经IPTG诱导表达,获得的包涵体蛋白经金属螯合亲和层析方法纯化和复性;进一步通过MTT法检测纯化后的重组蛋白对人胃腺癌细胞株BGC-823、急性粒细胞白血病细胞株HL-60、人肺腺癌细胞株A549和肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响。结果构建的基因工程菌株经1mmol·L-1的IPTG诱导6h后,可表达一大小约为18kDa的蛋白,表达量约占菌体总可溶性蛋白的40%。纯化后的重组NT7.1体外对4种肿瘤细胞的增殖均具有明显的抑制作用,其对BGC-823、HL-60、A549和SMMC-7721的IC50分别为2.66、0.44、2.96和4.99 nmol·L-1。结论NT7.1的原核重组表达产物对肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用。
- 刘丽加赵艳景袁瑞英王颖边杉吴梧桐叶波平
- 关键词：抗肿瘤活性
- 鲨鱼再生肝组织中差异表达基因及其产物的活性研究
- 鲨鱼是我国沿海较为常见的数量庞大的鱼种之一,长期的观察发现:鲨鱼很少患有肿瘤或其它各类疾病。调查数据显示:鲨鱼肝脏占其体重的1/5,占内脏器官总重量的70%以上,由于肝脏是生物体重要的排毒解毒器官,我们推测其中含有大量的...
- 叶波平边杉赵艳景王颖奚涛王吴梧桐
- 文献传递
- 鲨肝再生过程中下调表达基因NT7. 1的克隆表达及分离纯化(英文)
- 2009年
- 构建了鲨鱼肝再生过程中下调表达基因NT7 .1的原核表达载体pET-NT7 .1 ,转化大肠杆菌BL21后,IPTG诱导获得了其原核融合表达产物;利用Hisobind kits对表达产物进行了分离纯化。结果显示,在终浓度0 .01 mmol/L的IPTG的诱导下,NT7 .1编码的蛋白nt7 .1在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白占菌体总蛋白的41 %,表达产物的相对分子质量大小约为18 000 ,与预期的相对分子质量大小相当。对于nt7 .1的相关研究尤其活性研究仍在进行中,上述工作为研究该未知基因的功能奠定了基础。
- 袁瑞瑛叶波平边杉吴梧桐
- 关键词：原核表达分离纯化
- 鲨肝刺激物质类似物基因在大肠杆菌中的表达与产物活性分析被引量：5
- 2004年
- 构建了鲨肝刺激物质类似物基因片段的原核表达载体质粒 (pET-sHSS) ,转化大肠杆菌后通过IPTG诱导获得原核表达产物 ,并利用凝胶层析方法对表达产物进行了分离纯化 ;进一步利用MTT比色法研究了该重组产物对肝癌细胞株SMMC -7721的增殖影响。结果表明 ,在1mmol/L的IPTG的诱导下 ,鲨肝刺激物质类似物基因片段在大肠杆菌BL21菌株中获得表达 ,表达产物的相对分子质量大小约为17500u,占菌体可溶性蛋白总量的38%左右 ;纯化后的产物在低浓度下 (<50ng/L)具有明显刺激SMMC7721细胞株增殖的活性 ,高浓度下 (>100ng/L)则明显抑制该肿瘤细胞株的生长 。
- 王颖边杉张婷婷赵艳景吴梧桐叶波平王旻
- 关键词：原核表达CDNA克隆生物活性
- 聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用被引量：18
- 2004年
- 目的 :探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT PCR中的应用。方法 :提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA ,逆转录得到cDNA第一链 ,以此为模板进行PCR扩增 ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系。结果 :PCR扩增反应在第 2 0～ 2 5个循环 ,起始模板量为 0 8～ 2 4 μg时 ,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系。 结论 :通过控制起始模板量 ,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期 ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术 。
- 边杉王颖于涛丁选胜吴梧桐叶波平奚涛
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳半定量RT-PCR
- 鲨鱼再生肝组织cDNA文库的构建与差异表达基因的筛选
- 鲨鱼是海洋中较为常见的数量庞大的鱼种之一,长期的研究发现:鲨鱼对肿瘤细胞具有极强的免疫力,即使鲨鱼长期生活在具有强烈致癌物质的环境中,也不会致癌.由于肝脏是动物体内的一种重要的杀菌、解毒器官,而鲨鱼肝脏重量占其体重的25...
- 赵艳景边杉胡亚楠叶波平王旻奚涛吴梧桐
- 关键词：鲨鱼CDNA文库肝组织差异表达基因
- 文献传递
- 鲨肝活性肽对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用被引量：15
- 2004年
- 目的 探讨鲨肝活性肽 (sHSS)对对乙酰氨基酚 (AAP)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 用AAP( 2 0 0mg·kg- 1 ,ip)诱导小鼠急性肝损伤 ,用改良赖氏法测血清ALT和AST ,通过光镜和电镜观察肝细胞显微和亚显微结构的变化 ,用流式细胞仪分析肝细胞凋亡 ,同时用RT PCR方法分析FasmRNA表达水平。结果 sHSS 3 0和 1 5mg·kg- 1 可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST的水平 ;改善模型鼠肝组织细胞坏死及炎症反应 ;高剂量sHSS( 3mg·kg- 1 )对肝线粒体具有保护作用 ,下调FasmRNA的表达水平 ,并具有抗凋亡作用。结论 sHSS对AAP诱导的肝损伤具有明显的保护作用 ,其机制可能与保护肝线粒体、抑制Fas基因表达及肝细胞凋亡有关。
- 吕正兵李谦叶波平边杉王颖阮期平吴梧桐
- 关键词：对乙酰氨基酚小鼠急性肝损伤肝细胞凋亡
- 一种来自于鲨鱼再生肝脏的新功能基因及其重组产物对肝损伤的保护作用
- 叶波平林克江王诚王颖金国虔吴梧桐赵艳景边杉余江河李谦胡亚楠
- 该研究利用现代生物技术手段从鲨鱼肝脏中鉴定并获得一新功能茵在，在对其结构与功能的分析基础上，推测其表达产物具有降酶保肝和促进肝细胞增殖的作用，并进一步利用动物模型对该基因重组产物的药效活性进行了验证，目前尚未见有关该基因...
- 关键词：
- 关键词：鲨鱼新基因肝保护作用
- 鲨鱼再生肝组织中差异表达基因及其产物的活性研究
- 鲨鱼是我国沿海较为常见的数量庞大的鱼种之一，长期的观察发现：鲨鱼很少患有肿瘤或其它各类疾病。调查数据显示：鲨鱼肝脏占其体重的1/5，占内脏器官总重量的70％以上，由于肝脏是生物体重要的排毒解毒器官，我们推测其中含有大量的...
- 叶波平边杉赵艳景王颖奚涛王吴梧桐
- 关键词：基因表达活性物质
- 文献传递
- 鲨鱼再生肝组织差异表达基因的研究
- 该研究通过前期建立的鲨鱼肝部分切除再生模型获得鲨鱼正常和再生24h的肝组织总RNA,利用差异显示反转录聚合酶链式反应(Differential Display Reverse Transcription PCR,DDRT...
- 边杉
- 关键词：鲨鱼肝再生差异表达基因原核表达
