赵晓荣
- 作品数：11 被引量：103H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EGCG干预LMP1激活的AP-1信号转导通路被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨EGCG对鼻咽癌细胞激活蛋白 1(AP 1)信号转导通路的干预作用 ,阐明在鼻咽癌细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化的AP 1信号转导通路中靶分子的机制。方法 采用EB病毒阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGCG对CNE1和CNE1 LMP1细胞的生存率的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对AP 1活性的作用。利用间接免疫荧光法观察EGCG对JNK核移位的影响 ,再分别提取CNE1和CNE1 LMP1的胞浆及胞核蛋白 ,Westernblot分析EGCG抑制JNK的核移位后 ,胞浆及胞核蛋白中JNK的变化。采用Westernblot分析EGCG对c Jun的磷酸化水平的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对cyclinD1启动子活性的影响 ,并用Westernblot分析EGCG对cyclinD1蛋白表达的作用。结果 EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性 ,并可抑制AP 1的活性。EGCG能抑制JNK的核移位 ,并抑制c Jun的磷酸化。EGCG对AP 1信号通路下游的靶基因cyclinD1的启动子活性及其蛋白表达都有抑制作用。结论 EGCG对信号转导通路上的AP 1、JNK、c Jun、cyclinD1多个靶点分子具有干预作用。LMP1是EB病毒这种编码的蛋白 ,因此 ,EGCG抑制与病毒相联系的信号转导通路 。
- 赵燕王海赵晓荣罗非君唐敏曹亚
- 关键词：信号转导通路潜伏膜蛋白1鼻咽肿瘤
- 茶多酚诱导鼻咽癌细胞Cyclin D1表达下调
- 目的:探索茶多酚及其单体抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法:应用光学显微镜、MTT测定、流式细胞仪、报告基因和Western blot分析等方法,研究茶多酚及其单体对细胞增殖和细胞周期的影响及分子机理。
- 罗非君胡智赵晓荣邓锡云易薇顾焕华曹亚
- 文献传递
- EB病毒编码潜伏膜蛋白1通过转录因子c-Jun和Ets1间信息交流调控鼻咽癌中基质金属蛋白酶9的表达被引量：12
- 2005年
- 目的 探讨在EBV -LMP1作用下,基质金属蛋白酶9(MMP 9)启动子区相邻的AP 1( 5 33)和Ets( 5 4 0 )结合位点对其转录活化的影响,并确定LMP1可通过c -Jun和Ets1间信息交流(cross -talk)调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。方法 应用定点突变技术,在野生型MMP- 9 -CAT质粒的基础上,建立MMP- 9启动子区相邻Ets( 5 4 0 )结合位点和AP- 1 (- 5 33)结合位点单独突变体和共同突变体;在四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7中,比较LMP1对这些突变体报道基因活性的影响。通过针对c- Jun、Ets1的硫代反义寡核苷酸进行阻断,采用GelatinZymography观察c -Jun、Ets1及其cross- talk对LMP1介导的MMP 9表达的影响。结果 与野生型MMP -9 -CAT质粒比较,突变体的报道基因活性均降低(P <0 .0 1 ) ,以MMP- 9 -CATAP -1 ( 5 33) /Ets( 5 4 0 )mt降低最为显著;在c Jun和Ets1反义寡核苷酸单独或共同阻断后,LMP1介导的MMP -9活性均降低,以共同阻断的作用最为明显。结论 EBV -LMP1可以通过转录因子c -Jun和Ets1间cross talk调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。
- 曾亮刘轶平陶永光艾米丹赵晓荣曹亚
- 关键词：转录因子C-JUN基质金属蛋白酶9潜伏膜蛋白1EB病毒编码转录因子C-JUN硫代反义寡核苷酸MMP-9活性
- EB病毒潜伏膜蛋白1介导鼻咽癌细胞中转录因子Ets-1表达的实验研究被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨鼻咽癌 (NPC)细胞中EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否可介导转录因子Ets 1的表达。方法 采用受四环素 (Dox)调控的、LMP1表达的NPC细胞系 (pTet on LMP1HNE2 ) ,用Dox诱导LMP1表达 ,并检测Ets 1的表达。采用逆转录PCR(RT PCR)方法检测Ets 1RNA水平的变化 ;应用Westernblot方法检测Ets 1蛋白质表达情况 ;应用免疫共沉淀和Westernblot方法检测Ets 1磷酸化水平 ;应用EMSA方法检测Ets 1的DNA结合活性。结果 在不同诱导时间、不同浓度Dox诱导的pTet on LMP1HNE2细胞中 ,LMP1表达与Ets 1RNA表达、蛋白质表达、苏氨酸磷酸化水平及DNA结合活性在一定范围内呈正相关。结论 LMP1可介导NPC细胞中Ets 1的转录活化和表达 。
- 曾亮刘轶平王海陶永光赵晓荣李嵬曹亚
- 关键词：EB病毒鼻咽癌癌细胞NPC爱泼斯坦-巴尔病毒
- 周期蛋白D1在鼻咽癌细胞系中功能及意义的深入研究被引量：27
- 2001年
- 目的 深入研究周期蛋白D1在鼻咽癌细胞中的表达特征及其生物学功能。方法 以Westernblot方法确定D型周期蛋白在鼻咽癌细胞系中的表达谱及表达水平 ;利用流式细胞术双参数法 ,确定cyclinD1在鼻咽癌细胞中的表达分布模式 ;结合反义硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验 ,分别从mRNA及蛋白质水平抑制、中和cyclinD1的表达 ,探讨其在鼻咽癌细胞中的生物学功能。结果 在鼻咽癌细胞中 ,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型 ,cyclinD1在两株鼻咽癌细胞均有过表达。cyclinD1在鼻咽癌细胞系中的表达呈细胞周期依赖性 ,在G0 /G1期表达最高 ,S期及G2 /M期下降 ,但仍可检测到。反义cyclinD1硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验可以有效抑制蛋白质表达 ,抑制细胞进入S期。结论 鼻咽癌细胞系中 ,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型 ,cyclinD1在鼻咽癌细胞中有过表达 ,且表达呈细胞周期依赖性 ,cyclinD1可能是鼻咽癌细胞G1/S期行进中必不可少的细胞周期调节因子。
- 赵晓荣邓琳翁新宪顾焕华邓锡云曹亚
- 关键词：鼻咽肿瘤周期蛋白D1细胞周期生物学功能
- 鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达被引量：33
- 2001年
- 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的Tet on LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系 ,蛋白质印迹实验分析LMP1诱导cyclinD1蛋白质表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,确定LMP1活化cyclinD1表达的结构域 .同时结合基因诱导表达及反义寡聚核酸技术阻断基因表达的实验方法 ,进一步确定LMP1上调的cyclinD1功能 ,即对细胞周期行进及细胞恶性表型的影响 .结果表明LMP1确实可以诱导cyclinD1的表达 (2～ 4倍 ) ,且诱导具有时间依赖性及剂量依赖性 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,结合报道基因分析法 ,确定与空白载体细胞系比较 ,野生型LMP1从转录水平可反式激活cyclinD1报道基因活性约 11 2倍 ,其中CTAR1及CTAR2均可活化cyclinD1表达 ,但以CTAR2为主 ,与野生型LMP1诱导cyclinD1反式激活活性比较 ,CTAR1缺失导致cyclinD1报道基因活性下降 2 3 6 % ,CTAR2缺失导致cyclinD1活性下降约 80 7% ,C端均缺失时cyclinD1活性只?
- 赵晓荣王承兴罗非君顾焕华唐敏夏林庆邓琳易薇邓锡云曹亚
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1周期蛋白D1鼻咽癌细胞
- 用组织微阵列技术分析鼻咽癌变多阶段组织细胞周期蛋白D_1过表达被引量：17
- 2002年
- 为了探讨细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系 ,应用组织微阵列 (tissuemicroarray)技术 ,采用免疫组化方法检测CyclinD1在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生 /化生 (simplehyperplasia/metaplasia ,SH/SM )、异型增生 /化生 (atypicalhyperplasia/metaplasia,AH/AM )和鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma,NPC)的蛋白质表达 ,阳性表达率分别为 30 0 % (3/ 10 )、 90 0 % (18/ 2 0 )和6 2 9% (39/ 6 2 ) ,其中在异型增生 /化生中呈“一过性增高” .表明CyclinD1高表达可能为鼻咽癌发生过程中的早期事件 ;异型增生 /化生可能是鼻咽癌变的重要“关卡” .
- 宋鑫赵晓荣王一周建华关新元曹亚
- 关键词：组织微阵列技术过表达
- EB病毒潜伏膜蛋白1调控鼻咽癌中转录因子c-Jun/Ets1间相互作用的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨LMP1对鼻咽癌中转录因子c-Jun和Etsl表达的影响,以及对Etsl和AP-1间相互作用的调控,为LMP1的致瘤机制提供新的依据。方法:选用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系pTet-on-LMP1 HNE2(L7细胞),通过针对c-Jun、Ets1的硫代反义寡核苷酸进行阻断,观察LMP1对c-Jun、Ets1表达的影响及其相互作用,蛋白质印迹法检测Ets-1、c-Jun蛋白质表达。免疫共沉淀(IP)结合Western blot研究c-Jun和Ets1相互结合的情况。结果:在不同浓度Dox诱导24 h后,Dox为0.6μg/mL时的c-Jun和Ets1表达均最强。随着Dox诱导时间的延长,L7细胞中c-Jun和Ets1的表达上调,至4 h达到最高。阻断c-Jun表达后,Ets1表达显著降低;阻断Ets1表达后,c-Jun表达显著降低。在Dox诱导的L7细胞总蛋白中,在IP沉淀的Ets1中存在c-Jun表达,并且在Dox 0.6μ/mL时最强;在IP沉淀的c-Jun中存在Ets1表达,同样在Dox 0.6μg/mL时最强。结论:EBV-LMP1可以调控转录因子c-Jun和Ets1表达,且在调控过程中可能存在c-Jun和Ets1间的相互作用。
- 曾亮刘轶平宋鑫赵晓荣曹亚
- 关键词：潜伏膜蛋白1转录因子鼻咽癌
- AP-1和NF-κB荧光酶双报道系统的建立被引量：3
- 2002年
- 罗非君胡智曾亮赵晓荣邓锡云唐敏易薇曹亚
- 关键词：AP-1NF-ΚB激活蛋白1核转录因子ΚB肿瘤
- 细胞周期调节失控在鼻咽癌发病中的意义研究
- 曹亚赵晓荣邓琳卓缨宋鑫罗非君肖绘廖伟邓锡云顾焕华翁新宪易薇
- 该课题首次发现P16INK4A在鼻咽癌中存在高频率的改变；综合分析了基因缺失是造成蛋白表达下调的原因之一；首次建立了具有P16INK4A蛋白表达上调的鼻咽癌细胞系，证实了其在鼻咽癌中的作用及机制；分析P16INK4A表达...
- 关键词：
- 关键词：细胞周期鼻咽癌
