许月芳
- 作品数：6 被引量：45H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一个新的微卫星多态标记(D14S1435)的FISH定位被引量：2
- 1998年
- 目的将从人染色体１４ｑ２４．３显微切割制备的ＤＮＡ文库中分离得到的一个新的微卫星多态标记（Ｄ１４Ｓ１４３５，ＣＡ重复序列，人群中存在１１种等位形式，ＰＩＣ值为０．８５）进行染色体荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）返回定位。方法以此多态标记筛选人Ｌａｍｂｄａ／ＤＡＳＨ基因组文库，得到的阳性重组噬菌体ＤＮＡ，通过ＢａｍＨⅠ完全酶切，低熔点胶电泳回收插入片段，再经Ｓａｕ３ＡⅠ酶切，接头捕获ＰＣＲ（ｌｉｎｋｅｒ－ｃａｔｃｈＰＣＲ）法标记探针进行ＦＩＳＨ。结果将这一新的ＳＴＲ精确地定位于人染色体１４ｑ２４．３，证实了从染色体显微切割探针池分离染色体区带特异性遗传标记的可靠性。结论经染色体显微切割、ＰＣＲ及微克隆方法所得到的遗传标记，通过染色体荧光原位杂交证实其确实来自所切割区域，增加了这一区域可用于连锁分析的遗传标记，为定位在１４ｑ２４．３区带内若干遗传病的基因诊断和基因克隆，提供一个新的有价值的遗传标记。
- 郑其平余龙张民胡培蓉毛宁辉许月芳赵寿元
- 关键词：染色体微卫星多态荧光原位杂交
- PCR直接测序在Wilson病基因第8外显子检出一个突变热点被引量：32
- 1998年
- 目的寻找中国人Ｗｉｌｓｏｎ病（ＷＤ）基因突变热点。方法应用ＰＣＲ直接测序法对３０例Ｗｉｌｓｏｎ病患者ＷＤ基因第８外显子进行了突变筛查。结果在１４例患者中发现同一种错义突变Ａｒｇ７７８Ｌｅｕ，其中４例为这一突变的纯合，其余为杂合，突变率为３０％。结论ＷＤ基因第８外显子７７８位密码子（ＣＧＧ→ＣＴＧ）系中国人的突变热点之一。
- 许月芳范玉新余龙江萤杨任民杨任民崔映宇韩咏竹赵寿元
- 关键词：肝豆状核变性聚合酶链反应WD基因
- 嵌合基因δKρF在转基因小鼠内的组织特异性表达被引量：9
- 1992年
- 本文报告了鸡δ晶体蛋白基因的启动子,被Friend脾病灶形成病毒(SFFV)的长末端重复顺序(LTR)取代后的嵌合基因δKpF在转基因小鼠内的表达特性。采用显微注射方法,将含有δKpF基因的重组质粒pδKpF DNA导入小鼠受精卵的雄原核,再将其植入假孕小鼠的输卵管内,经生长发育,产出小鼠35只。以DNA-DNA分子杂交分析,发现其中1只小鼠的基因组DNA中整合有所导入的δKpE基因。再以免疫酶标记方法检测,发现δKpF基因在转基因小鼠内能够表达,而且具有组织特异性。作者认为,与δ晶体蛋白基因组织特异性表达有关的调节顺序位于+677bp之后。这与Hayashi等(1985)以培养细胞研究的结论不一致。
- 胡以平秦世真许月芳刘祖洞
- 关键词：嵌合基因转基因小鼠组织特异性
- 人类β-1,4-半乳糖苷转移酶基因家族中1个新成员的克隆与表达谱分析
- 1999年
- 应用从EST出发克隆基因家族新成员的策略 ,在人类睾丸组织cDNA文库中分离出 1个新的全长cDNA片段 ,它编码的蛋白产物与 (UDP 半乳糖苷 :N 乙酰基葡萄糖胺 )半乳糖苷转移酶 (GalT)有较高的同源度 .分析表明 ,在其 2 173bp的序列中含有 1个长 10 3 2bp的开放读框 ,编码 3 44个氨基酸 .基于该基因与半乳糖苷转移酶基因家族各成员的同源关系 ,尤其是与G .gallusβ 1,4 半乳糖苷转移酶Ⅰ型(CKⅠ )的关系密切 ,这个基因的蛋白产物被命名为人类 β 1,4 半乳糖苷转移酶同源蛋白Ⅰ型 .Northern杂交发现它在被检测的人体 16种组织中均有表达 ,但丰度各异 .通过与含人单条染色体的人 /啮齿类的杂种细胞DNA进行Southern杂交 ,证明该基因位于 3号染色体上 .
- 范玉新余龙张琪江萤戴方彦陈驰原屠强毕安定许月芳赵寿元
- 关键词：半乳糖苷转移酶克隆
- 从酵母人工染色体的人基因组片段直接分离表达顺序的初步研究
- 1995年
- 报导“从酵母人工染色体的人基因组片段直接筛选表达顺序”的方法体系。以定位于人基因组１３ｑ１４．３的ＹＡＣ２７Ｄ０８和人脑。ＤＮＡ分子库为主要研究材料，从１×１０６个ｃＤＮＡ克隆中筛选到５２个阳性克隆。经ＰＣＲ扩增产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析，排除了３１个假阳性克隆。继而分别用人基因组总ＤＮＡ、酵母基因组ＤＮＡ和人的ｒＤＮＡ为探针作ｄｏｔｂｌｏｔ杂交分析，又排除１８个非特异杂交的克隆，最后得到３个候选ｃＤＮＡ克隆。经与ＹＡＣ２７Ｄ０８以及１０个定位于染色体其他区带的ＹＡＣ克隆作杂交验证，确认这３个ｃＤＮＡ克隆是来自ＹＡＣ２７Ｄ０８的特异性表达顺序。它们被分别命名为ｃｆｄ１３—１，ｃｆｄ１３—２，ｃｆｄ１３—３。其插入片段分别为２．０ｋｂ，１．１ｋｂ和３．８ｋｂ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析结果表明：ｃｆｄ１３—１和ｃｆｄ１３—２所在基因的转录物分别长９．０ｋｂ，７．０ｋｂ，ｃｆｄ１３—３则出现６条杂交带，分别长１２．０ｋｂ，３．０ｋｂ，２．２ｋｂ，１．５ｋｂ，１．０ｋｂ和０．６ｋｂ。
- 施少林余龙刘孟珉邓余张民龚若沐韩顺生许月芳赵寿元谈家桢
- 关键词：酵母人工染色体人基因组CDNA克隆
- 人凝血Ⅸ因子cDNA在转基因小鼠内的表达调控被引量：2
- 1994年
- 为了研究人凝血IX因子cDNA在转基因小鼠内的表达,特别是顺式调节顺序的存在位置,本文将3种具有不同结构的人凝血IX因子cDNA的重组基因导入离体培养细胞,发现外源的人IX因子cDNA都能表达人IX因子蛋白,进而将它们分别作成转基因小鼠,结果发现在转基因小鼠内都失去了表达特性。这些结果证实了在人凝血IX因子cDNA中存在着决定其在转基因小鼠内表达的顺式调节顺序,同时也排除了这种顺式调节顺序存在于3′端非编码顺序中的可能性。作者再结合一些相关研究的结果,认为其顺式调节顺序可能存在于5′端的非编码顺序中。
- 胡以平艾星滨许月芳邱信芳薛京伦刘祖洞
- 关键词：CDNA转基因小鼠
