蔡颖
- 作品数：16 被引量：16H指数：3
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：深圳市医学重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- PM_(2.5)混悬液对3种癌细胞侵袭和迁移能力的影响被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨PM_(2.5)混悬液对人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞和人肾癌A498细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用10、50μg/mL的PM_(2.5)混悬液分别对A549、HepG2和A498细胞染毒24 h,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果:迁移实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞穿膜细胞数分别为(356.33±30.92)、(476.33±28.50)和(563.33±74.00)个;HepG2细胞分别为(86.42±4.75)、(140.00±16.15)和(234.17±9.06)个;A498细胞分别为(42.33±6.43)、(80.00±6.08)和(174.67±25.01)个。侵袭实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞的穿膜细胞数分别为(188.33±9.45)、(313.00±7.94)和(404.00±57.66)个;HepG2细胞分别为(48.33±3.26)、(97.75±6.63)和(123.92±8.57)个;A498细胞分别为(5.67±5.03)、(21.33±5.13)和(40.67±6.81)个。在迁移实验和侵袭实验中,与阴性对照组相比,PM_(2.5)染毒组中的3种细胞穿膜细胞数均增加(P<0.05或0.01)。结论:PM_(2.5)可增强A549、HepG2和A498细胞的迁移和侵袭能力。
- 李柏茹秦双建蔡颖蔡颖关岚关岚肖芳曾明
- 关键词：大气细颗粒物A549细胞HEPG2细胞
- K-ras基因沉默对PM_(2.5)染毒HBE细胞癌基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨K-ras基因对PM_(2.5)染毒人支气管上皮(HBE)细胞部分癌基因和抑癌基因表达的影响。方法于2019年9月,根据K-ras基因mRNA序列,设计合成干扰序列,转染HBE细胞构建K-ras基因沉默细胞。用10、50μg/ml PM_(2.5)混悬液及10μmol/L Cr^(6+)分别染毒HBE细胞和K-ras基因沉默细胞,实时荧光定量PCR检测c-myc、c-fos、N-ras、cyclin-D1、p16、p53基因的mRNA表达水平,Western blot检测c-myc和p53蛋白表达水平。结果K-ras基因沉默细胞中K-ras基因mRNA表达水平下降(80.5%±3.6%),K-ras蛋白表达水平下降(58.9%±4.7%)(P<0.01)。各浓度PM_(2.5)染毒HBE细胞组、K-ras沉默细胞组及10μmol/L Cr^(6+)染毒HBE细胞组、K-ras沉默细胞组c-myc、c-fos、N-ras、cyclin-D1基因mRNA表达水平均高于未染毒相应细胞对照组,p16和p53基因mRNA表达水平低于未染毒相应细胞对照组(P<0.01);10μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-myc、c-fos、p16基因mRNA表达水平低于10μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组,p53基因mRNA表达水平高于10μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组(P<0.01);50μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-fos、N-ras、cyclin-D1、p16和p53基因mRNA表达水平均低于50μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组(P<0.01)。50μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒HBE细胞组,p53蛋白表达水平低于未染毒HBE细胞组(P<0.05);50μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒K-ras沉默细胞组(P<0.05)。结论PM_(2.5)可引起HBE细胞癌基因表达升高,K-ras基因沉默能抑制PM_(2.5)诱导HBE细胞癌基因的表达。
- 李闰冰蒲桔宁李柏茹蔡颖蔡颖张朝晖
- 关键词：基因沉默K-RAS人支气管上皮细胞癌基因
- 大气PM_( 2.5)对支气管上皮细胞凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨深圳地区大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响。方法分别以0、10、50μg/ml PM_(2.5)悬液染毒HBE细胞,并设阳性对照组(10μmol/L Cr^(6+)),以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、Bcl-2和DNA损伤修复基因hOGG1、h MTH1的mRNA表达水平变化,以Western blot法检测目的蛋白质的表达变化。结果与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、hOGG1、hMTH1基因表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2基因表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot实验结果显示,与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组的caspase-3、caspase-8、caspase-9、hOGG1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bax和hMTH1蛋白在50μg/ml染毒组及阳性对照组表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);Bcl-2蛋白在10、50μg/ml染毒组及阳性对照组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PM_(2.5)染毒引起HBE细胞中凋亡基因、DNA损伤修复基因表达升高,抑凋亡基因表达降低,提示PM_(2.5)对凋亡基因和DNA损伤基因表达具有明显影响。
- 王冰玉李闰冰蔡颖蔡颖徐新云秦双建李柏茹
- 关键词：人支气管上皮细胞凋亡基因DNA损伤
- 环境污染物导致DNA-蛋白质交联形成的检测新技术及机理研究
- 庄志雄雷毅雄任泽舫蔡颖陈家堃梁立治张锦周
- 本项目在国内外首创了一种非损伤性的125Ⅰ-后标记法检测环境污染物所引起的DPC，开发了彗星试验/蛋白质酶K消化法检测单个细胞水平的DPC，为环境污染物早期遗传损害的生物监测提供敏感、快速和便捷的生物标记物。证实了DPC...
- 关键词：
- 关键词：DNA-蛋白质交联环境污染物
- PM2.5对HBE细胞致癌致突变相关基因表达的影响被引量：5
- 2020年
- 目的:采用基因芯片技术与生物信息学分析方法,筛选PM2.5染毒后的人支气管上皮细胞(HBE)与未染毒细胞比较的差异表达基因和通路,为进一步研究PM2.5对HBE细胞致癌致突变作用的相关机制提供科学依据。方法:用50μg/mL的PM2.5水溶液处理HBE细胞,染毒24 h,用未染毒的细胞作为空白对照组,设立3组平行样品。提取RNA,荧光标记与纯化后进行芯片杂交,用Rosetta Resolver® System (Rosetta Biosoftware)进行数据前处理与统计分析,得到差异表达基因。将数据经过Cluster Profiler软件进行主成分和聚类分析、Pathway及GO(Gene Ontolog)分析,初步探讨PM2.5染毒前后HBE细胞中基因的差异表达;通过String蛋白互作数据库分析差异表达基因的蛋白互作关系,筛选出节点数最多的核心蛋白。结果:根据预设的筛选条件,筛选出245个PM2.5染毒前后HBE细胞中的差异表达基因,其中上调基因27个,下调基因218个,经过进一步分析,筛选出PHACTR2、SFRP1、WFDC1等排名前10的上调和下调的核心基因。排名前10的核心差异基因通过GO功能注释富集分析显示,差异表达基因主要富集在跨膜受体活性、受体活性、细胞信号传导、细胞分子传导等分子功能。同时富集于离子跨膜转运、细胞对脂多糖无机离子跨膜转运、细胞营养转运等生物过程;排名前10的差异表达基因通过KEGG富集分析显示,差异表达基因主要富集在涉及肿瘤细胞迁移、胆汁代谢相关、神经活性、遗传毒性等方面的7个核心通路;蛋白互作用网络图筛选出SST、BDNF、NCAM1、SSTR1和Bcl2L11等5个核心蛋白。结论:PM2.5可引起HBE细胞致癌致突变相关基因的差异表达,可为进一步研究PM2.5的致癌致突变作用机制提供科学依据。
- 王冰玉蔡颖蔡颖谢红卫谢红卫
- 关键词：细颗粒物人支气管上皮细胞
- 沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞癌基因和凋亡相关基因表达的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞(HBE细胞)癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法:采用RNA干扰技术,根据GenBank提供的c-fos mRNA序列,设计合成shRNA干扰序列,将重组慢病毒载体转染HBE细胞,构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象,用浓度为50μg/mL的PM2.5混悬液染毒24 h,同时设立阴性对照组,qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果:转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中,经qPCR和Western blot检测发现,与对照组HBE细胞相比,c-fos m RNA表达水平下降70.1%,c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM2.5染毒HBE细胞后,与未染毒的对照组比较,c-myc和k-ras mRNA表达水平分别升高30.46%、27.17%,差异均有统计学意义(P<0.05),c-fos、Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别升高50.78%、71.91%、74.16%,p53 mRNA表达水平下降12.27%,差异均有统计学意义(P<0.01)。PM2.5染毒c-fos基因沉默细胞后,与未染毒组比较,c-myc、k-ras mRNA表达水平分别下降13.08%、5.39%,Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别下降25.03%、21.37%(P<0.05),p53 mRNA下降53.39%(P<0.01)。此外,c-fos基因沉默细胞染毒后,与HBE正常细胞染毒后比较,c-myc、k-ras、p53、c-fos、Caspase-3和Caspase-8的mRNA表达水平均有所下降(P<0.05);仅c-myc蛋白表达下降(P<0.01)。结论:成功构建c-fos基因沉默细胞株;PM2.5可引起HBE细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平明显升高,c-fos基因沉默在一定程度上能抑制PM2.5对癌基因和凋亡相关基因的激活作用。
- 蔡颖蔡颖秦双建李柏茹余淑苑余淑苑刘宁季佳佳张朝晖
- 关键词：人支气管上皮细胞癌基因凋亡相关基因
- 我国南北两城市PM2.5主要污染物组分及来源分析被引量：3
- 2020年
- 目的分析我国南北两城市深圳和太原市大气细颗粒物(PM2.5)主要成分及其污染来源。方法采集2017至2018年深圳和太原市空气中PM2.5样品,用电感耦合等离子体质谱法测定铅(Pb)、铝(Al)、砷(As)等10种金属元素浓度,用离子色谱法测定氟化物(F-)、氯化物(Cl^-)、硫酸盐(SO4^2-)等10种水溶性离子浓度,用高效液相色谱法测定萘、苊烯、苊等16种多环芳烃(PAHs)浓度,用碳质分析仪测定有机碳(OC)与元素碳(EC)含量;采用因子分析法分析PM2.5的污染来源。结果太原市PM2.5样品中Pb、锰(Mn)、As、镍(Ni)、F^-、OC、EC浓度明显高于深圳市,钠盐(Na^+)、Cl^-、磷酸盐(PO4^3-)浓度低于深圳市(P<0.05);除萘外,太原市PM2.5样品中其余PAHs浓度均高于深圳市(P<0.05)。深圳市PM2.5样品中金属元素与水溶性离子污染来源由工业排放/机动车尾气因子(42.64%)、建筑/土壤因子(34.22%)和海洋因子(17.93%)构成,PAHs主要来源于燃油与机动车尾气因子(38.58%)、燃煤因子(30.78%)、生物质燃烧因子(24.38%)。太原市PM2.5样品中金属元素与水溶性离子来自建筑因子(30.26%)、燃油燃煤因子(24.58%)、二次粒子/土壤因子(22.03%)及工业因子(18.89%),PAHs主要来自燃油与机动车尾气因子(54.71%)、燃煤因子(43.54%)。结论深圳和太原市PM2.5成分存在较大差异,需要进一步加强企业的环境健康管理,根据各地污染来源有针对性进行治理。
- 蔡颖蔡颖王荀胡辛楠方道奎王玮王玮王冰玉张朝晖张朝晖
- 关键词：颗粒物细颗粒物空气污染物离子
- PM_(2.5)通过p38MAPK信号通路对HBE细胞癌基因表达的影响
- 2022年
- 目的探讨大气细颗粒物PM_(2.5)通过p38MAPK信号通路对人支气管上皮(human bronchial epithelial,HBE)细胞癌基因表达的影响。方法设立空白对照组、PM_(2.5)组、SB203580组、PM_(2.5)+SB203580组。以10μmol/L的p38MAPK抑制剂SB203580预先处理HBE细胞30 min,接着用无血清DMEM培养基培养24 h作为SB203580组;用50μg/mL PM_(2.5)染毒24 h作为PM_(2.5)组;用10μmol/L的SB203580预先处理HBE细胞30 min,然后用50μg/mL的PM_(2.5)染毒24 h作为PM_(2.5)+SB203580组;应用荧光定量PCR和Western blot检测C⁃MYC、C⁃FOS、K⁃RAS、P53、p38MAPK基因的mRNA和蛋白质表达水平变化。结果与对照组比较,PM_(2.5)组C⁃MYC、C⁃FOS、K⁃RAS、p38MAPK基因表达分别升高54.0%、49.2%、96.1%、74.1%,P53基因表达下降49.1%(均P<0.01)。与PM_(2.5)组比较,PM_(2.5)+SB203580组C⁃MYC、C⁃FOS、K⁃RAS和p38MAPK基因表达分别下降21.4%、20.8%、39.3%和21.4%,P53基因表达升高43.1%(P<0.01或P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,PM_(2.5)组C⁃MYC、C⁃FOS、K⁃RAS、p38MAPK蛋白表达分别升高110.6%、46.7%、35.5%、82.8%,P53蛋白表达下降42.7%(均P<0.01)。与PM_(2.5)组比较,PM_(2.5)+SB203580组C⁃MYC、C⁃FOS、K⁃RAS和p38MAPK蛋白表达分别下降37.7%、16.2%、19.6%和25.9%,P53蛋白表达上升43.5%(P<0.01或P<0.05)。结论p38MAPK抑制剂明显影响PM_(2.5)对癌基因表达的作用,提示p38MAPK信号通路在PM_(2.5)致癌基因表达作用中发挥重要作用。
- 刘宁郑凯蔡颖蔡颖余淑苑季佳佳蓝涛蓝涛徐新云
- 关键词：MAPKP38MAPK信号通路人支气管上皮细胞癌基因
- PM_(2.5)对HK-2细胞氧化损伤和凋亡的影响
- 2021年
- 目的:探讨深圳和太原市PM_(2.5)对人肾上皮细胞(HK-2)氧化损伤和凋亡的影响。方法:用中流量采样器分别采集太原某大学校园和深圳市疾病预防控制中心楼顶空气,将吸附有PM_(2.5)的滤膜洗脱后制备PM_(2.5)混悬液。设置阴性对照组、50μg/mL深圳PM_(2.5)样品组、50μg/mL太原PM_(2.5)样品组和10μmol/L Cr6+阳性对照组,分别处理HK-2细胞24 h,测定4组细胞氧化损伤指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的变化,并应用流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:与阴性对照组相比,深圳PM_(2.5)样品组、太原PM_(2.5)样品组和阳性对照组中MDA含量分别升高8.16%、34.51%和72.23%;SOD活性分别降低7.49%、19.67%和29.55%;GSH含量分别降低10.43%、16.39%和37.43%。太原PM_(2.5)样品组与阴性对照组的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。GSH-PX活性分别降低42.70%、61.62%和60.98%,细胞凋亡率分别升高197.25%、301.22%和399.08%,上述3组与阴性对照组间的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:深圳和太原市PM_(2.5)均可引起HK-2细胞发生氧化损伤和细胞凋亡率增加,且太原市PM_(2.5)的作用更为明显。
- 李柏茹秦双建关岚李闰冰蔡颖蔡颖曾明曾明肖芳
- 关键词：大气细颗粒物
- PM_(2.5)对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨PM_(2.5)对人肾上皮细胞(HK-2)部分癌基因和凋亡基因表达的影响。方法:利用CCK-8试剂盒测定PM_(2.5)混悬液对HK-2细胞的半数抑制浓度(IC50);实验设阴性对照组、PM_(2.5)混悬液低剂量(10μg/mL)、高剂量(50μg/mL)染毒组和阳性对照组(Cr6+10μmol/L),分别对HK-2细胞处理24 h后利用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测癌基因(c-myc、c-fos、p53)和凋亡基因(Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2)mRNA和蛋白的表达水平。结果:PM_(2.5)混悬液对HK-2细胞的IC50为95.98μg/mL;经PM_(2.5)混悬液染毒24 h,qPCR结果显示,与阴性对照组比较,PM_(2.5)混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p53和Bcl-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示,与阴性对照组比较,PM_(2.5)混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p53和Bcl-2蛋白表达均降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:PM_(2.5)可引起HK-2细胞中部分癌基因表达上升、抑癌基因表达下降、促凋亡基因表达上升和抑凋亡基因表达下降,提示PM_(2.5)对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因具有一定的促进与激活作用。
- 李柏茹秦双建李闰冰蔡颖蔡颖王冰玉曾明曾明肖芳
- 关键词：大气细颗粒物HK-2细胞癌基因凋亡基因
