苗怡
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海第二医科大学人类基因治疗研究中心更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 分泌型重组TRAIL基因真核表达载体的构建及其凋亡效应被引量：1
- 2001年
- 目的研究新型凋亡因子—TRAIL基因在肿瘤基因治疗中的作用。方法用RT-PCR法,从Balb/c小鼠脾脏的总RNA中扩增出编码凋亡诱导功能区的TRAILcDNA片段,并克隆入pUC-T载体中。经DNA测序鉴定正确后,亚克隆入真核表达载体pSEC-hy-gromycin的免疫球蛋白κ链信号肽编码区的下游,形成含有κ链信号肽与TRAIL凋亡诱导功能区的融合基因,构建可分泌表达TRAIL的重组真核表达载体pSEC/TRAIL。该重组载体经阳离子脂质体转染入小鼠前胃癌细胞株MFC615中,以台盼蓝拒染法和Hoechst33258荧光染色法,观察重组TRAIL对肿瘤细胞的凋亡效应。结果TRAIL的cDNA克隆成功,构建了可高效分泌表达可溶性TRAIL的重组真核表达载体pSEC/TRAIL,该产物能显著促进MFC615肿瘤细胞凋亡。结论重组真核表达载体pSEC/TRAIL的成功构建,为研究肿瘤的基因治疗提供了理想的工具。
- 居中华苗怡戴冰冰钱关祥陈诗书
- 关键词：TRAILCDNA克隆分泌表达
