肖小旺
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Clusterin蛋白在男性不育症睾丸组织中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Clusterin蛋白在男性不育症患者睾丸组织中的表达及意义。方法采用免疫组化染色法和Western blot法检测了10例正常睾丸组织,8例梗阻性不育患者睾丸组织,13例非梗阻性不育患者睾丸组织标本中Clusterin蛋白的表达水平。结果免疫组化染色结果表明,3组睾丸组织中C1usterin蛋白都有表达,正常睾丸组织、梗阻性不育患者睾丸组织、非梗阻性不育患者睾丸组织中阳性或强阳性表达率分别为100%(10/10),87.5%(7/8),46%(6/13),非梗阻性不育睾丸组织中Clusterin蛋白表达水平显著低于正常睾丸组织(P<0.05)。Western blot法检测结果也表明,该蛋白在非梗阻性不育睾丸组织中的表达较正常睾丸组织显著降低,而在梗阻性不育睾丸组织中的表达无显著性降低。结论 Clusterin蛋白的表达降低与非梗阻性不育症的发生密切相关。
- 肖小旺文甲明陈厚仰李东杰郭小亮汤育新
- 关键词：无精子症不育
- Clusterin蛋白在男性不育症睾丸组织中的表达及意义
- 目的：探讨Clusterin蛋白在男性不育症睾丸组织中的表达及意义。
方法：用免疫组化染色法和Western blot法检测了10例正常睾丸组织,8例梗阻性不育睾丸组织,13例非梗阻性不育睾丸组织标本中Clust...
- 肖小旺
- 关键词：梗阻性无精子症非梗阻性无精子症CLUSTERIN
- 文献传递
- 组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。
- 陈厚仰文甲明肖小旺李东杰郭小亮龙智戴英波汤育新
- 关键词：睾丸肿瘤组织芯片免疫组织化学
- 人睾丸基因TDRG1重组真核载体的构建及其表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建人睾丸基因TDRGl的真核表达质粒,并研究其表达。方法取人新鲜正常睾丸组织,提取总RNA,采用逆转录-聚合酶联链反应(RT-PCR)扩增TDRG1基因编码序列;将该基因克隆到真核表达载体pYD5中,构建真核细胞表达载体pYD5-TDRG1,用限制性内切酶酶切分析,DNA序列分析鉴定重组质粒;将测序正确的重组质粒pYD5-TDRG1在脂质体介导下转染293细胞,间接免疫荧光法和Western Blot法鉴定目的蛋白质的表达。结果 RT-PCR扩增出TDRG1基因编码序列,目的插入片段长约303bp;产物行限制性内切酶酶切后连接到真核表达载体pYD5,重组质粒pYD5-TDRG1经酶切及DNA测序鉴定构建成功;该质粒转染293细胞48h后在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,阳性细胞率96.42%;行Western blot分析检测到约39.8kD的目的蛋白表达。结论成功构建了人类睾丸基因TDRG1的真核表达载体pYD5-TDRG1,TDRG1基因在293细胞内成功表达。
- 汤育新蒋先镇文甲明陈厚仰阳建福肖小旺戴英波
- 关键词：克隆真核载体基因转染
- SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库被引量：1
- 2009年
- 目的运用SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库。方法提取恒河猴睾丸组织总RNA并分离出mRNA,用clontech公司SMART^(TM)cDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得全长cDNA双链;经SfiI酶切、层析柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB连接后电转化及铺板,建成原始文库。结果经鉴定,原始文库为2.5×10~6个重组子,扩增后文库滴度为4.5×10~9CFU/mL。重组率为100%,平均插入片段为1.6kb。结论已构建文库质量较高,为进一步筛选、克隆睾丸特异表达基因奠定了基础。
- 陈厚仰汤育新文甲明尹光明刘志中肖小旺
- 关键词：恒河猴睾丸基因文库SMART技术
