窦蕊
- 作品数:14 被引量:12H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金吉林省科技厅科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 重组鼠Muc1-MBP融合蛋白疫苗体内抗肿瘤作用
- 2009年
- 目的:研究重组鼠Muc1-MBP蛋白的体内抗肿瘤作用.方法:采用皮下注射法将不同剂量Muc1-MBP蛋白免疫小鼠,2wk/次,共免疫3次.在第3次免疫后4d,给予C57BL/6小鼠尾静脉注射LLC1细胞,或给予5GyX射线照射的ICR小鼠背部皮下注射MCF-7细胞.注射3wk后剥离并测量肿瘤大小;肿瘤组织行常规HE染色.免疫组织化学染色分析肿瘤周围浸润的淋巴细胞亚群.结果:LLC1细胞尾静脉接种后21d,肺肿瘤结节对照组,Muc1-MBP0.15g/L组小鼠分别为54和39个(100%),Muc1-MBP0.3g/L组小鼠共计17个(60%),提示Muc1-MBP0.3g/L组可显著抑制肺癌的生长(P<0.05),Muc1-MBP0.15g/L组作用较弱.皮下接种MCF-7细胞后21d,对照组,Muc1-MBP0.15g/L组小鼠100%(6/6)可见乳腺癌瘤体形成,平均体积分别为(142.8±70.2)和(96.1±53.4)mm3,Muc1-MBP0.3g/L组瘤体形成66.7%(4/6),平均体积为(54.5±46.7)mm3.表明Muc1-MBP0.3g/L组免疫后可显著抑制人乳腺癌移植瘤生长(P<0.05),Muc1-MBP0.15g/L组作用较弱.免疫组化结果显示Muc1-MBP免疫组肿瘤周围有大量CD4+和CD8+T的细胞浸润到肿瘤周围.结论:Muc1-MBP诱导免疫能够明显抑制LLC1,MCF-7细胞的生长,为临床应用研究奠定了基础.
- 方芳宋献美马吉春张庆勇窦蕊陈文博柳忠辉台桂香
- 关键词:MUC1肿瘤疫苗
- 人iNKT细胞的活化
- 目的:为了从抗原提呈细胞及CD1d表达水平探究iNKT细胞活化、扩增及功能效应的干预因素。方法:本研究建立稳定表达人CD1d分子的不同来源细胞系:K562-tm CD1d,PC3-tm CD1d,HepG2-tm CD1...
- 窦蕊谭晓晟梁智辉吴雄文翁秀芳
- 关键词:INKT细胞抗原提呈细胞抗瘤效应
- 文献传递
- CD1d表达水平不同的B16黑色素瘤荷瘤模型的建立
- 研究背景:NKT细胞是一类固有免疫样T淋巴细胞,根据其TCR二聚体不同分为两型,一类是TCR组成恒定的Ⅰ型NKT细胞(INKT),能识别CD1d分子提呈的脂类抗原,一类是TCR组成多样的Ⅱ型NKT细胞。两型NKT细胞均具...
- 胡粉粉王伟窦蕊丁雅洁梁智辉吴雄文翁秀芳
- 关键词:NKT细胞B16肿瘤
- 文献传递
- 半开放环境饲养的C57BL/6J小鼠肝脏iNKT细胞比例与功能的变化
- 目的:iNKT(invariant natural killer T)细胞主要识别由CD1d分子提呈的脂类或糖脂类抗原,在肝脏中富集,具有重要的免疫调节作用,因此,肝脏组织中iNKT细胞分布及功能分化对NKT细胞依赖性的...
- 丁雅洁谭晓晟窦蕊胡粉粉吴雄文梁智辉翁秀芳
- 关键词:INKT细胞
- 文献传递
- 不同宿主细胞表达的hCD1d-Fc融合蛋白的糖基化程度不同
- 目的 :NKT细胞是一类固有免疫样T淋巴细胞,其中I型NKT细胞,即i NKT细胞主要识别CD1d分子提呈的脂类抗原。本实验室通过建立昆虫表达系统以及肿瘤细胞表达系统获得了两种分子量不同的h CD1d-Fc融合蛋白,我们...
- 窦蕊谭晓晟翁秀芳吴雄文
- 关键词:INKT细胞糖基化
- 文献传递
- 黏蛋白1多肽通过small MUC1蛋白抑制肿瘤细胞生长
- 2009年
- 目的:探讨黏蛋白1(mucin1,MUC1)串联重复序列多肽(简称黏蛋白1多肽,MUC1多肽)对肿瘤细胞生长抑制的作用机制。方法:MUC1多肽与多种肿瘤细胞Jurkat、Raji、U937、MCF-7、SMMC7721及活化的T细胞、小鼠巨噬细胞RAW264.7共同培养,观察MUC1多肽对上述细胞生长的影响;建立BABL/c小鼠Jurkat细胞皮下移植瘤动物模型,应用MUC1多肽进行治疗;采用GST免疫沉降实验鉴定与MUC1多肽结合的肿瘤细胞表面蛋白。结果:MUC1多肽对Jurkat、Raji、U937、MCF-7和SMMC7721细胞的生长均有抑制作用,对活化的T细胞和小鼠RAW264.7细胞生长无明显抑制作用。MUC1多肽对BABL/c小鼠皮下Jurkat细胞移植瘤的生长均有明显抑制作用(P<0.05)。GST免疫沉降实验显示,Jurkat和MCF-7细胞裂解上清中与MUC1多肽结合的蛋白可与两种抗MUC1串联重复序列抗体(GP1.4和HMPV)及抗胞内段抗体(Ab5)发生反应,相对分子质量大约115000,提示可能是MUC1新的同种型,命名为smallMUC1(sMUC1)。结论:MUC1多肽可通过与肿瘤细胞表面smallMUC1蛋白的相互作用向细胞传导生长抑制信号。
- 马吉春台桂香赵小霞方芳张庆勇窦蕊陈文博柳忠辉
- 关键词:SMALLMUC1肿瘤细胞
- 人MUC1和鼠Muc1蛋白疫苗抗肿瘤作用的比较被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨重组人MUC1-MBP和鼠Muc1-MBP疫苗的抗肿瘤作用,为肿瘤疫苗的临床应用提供实验依据。方法:用人MUC1-MBP和鼠Muc1-MBP融合蛋白分别免疫小鼠,实验分为阴性对照组、人MUC1-MBP组和鼠Muc1-MBP组,ELISA方法分别检测小鼠血清抗人MUC1抗体与抗鼠Muc1抗体的交叉反应;LDH法检测小鼠抗人MUC1和鼠Muc1特异的CTL活性。通过小鼠肺癌转移模型及皮下人乳腺癌移植瘤模型检测人MUC1-MBP和鼠Muc1-MBP免疫诱导的抗肿瘤作用。结果:抗人MUC1抗体和鼠Muc1抗原可产生较强的交叉反应,抗鼠Muc1抗体与人MUC1抗原可产生较弱的交叉反应;人MUC1-MBP和鼠Muc1-MBP免疫均可诱导CTL杀伤活性,对MCF-7细胞杀伤活性分别为(48.7±7.1)%和(54.6±7.8)%,对LLC1细胞杀伤活性分别为(61.9±10.2)%和(43.5±8.4)%。人MUC1-MBP组和鼠Muc1-MBP组小鼠Lewis肺癌的肺结节转移抑制率分别为94.4%和68.5%;在人乳腺癌移植瘤实验中,人MUC1-MBP组、鼠Muc1-MBP组和PBS组小鼠肿瘤平均体积分别(23.5±15.7)、(56.5±46.7)和(142.8±70.2)mm3,人MUC1-MBP组和鼠Muc1-MBP组肿瘤体积明显小于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论:人MUC1和鼠Muc1有共同的B和T细胞表位,人MUC1诱导的交叉反应更强烈;人MUC1-MBP诱导的抗肿瘤活性强于鼠Muc1-MBP抗肿瘤活性;人MUC1-MBP有希望发展成人类抗肿瘤疫苗。
- 方芳宋献美张庆勇马吉春窦蕊陈文博台桂香
- 关键词:重组融合蛋白质类癌症疫苗
- 半开放环境饲养的C57BL/6J小鼠肝脏iNKT细胞比例与功能的变化
- 目的:iNKT(invariant natural killer T)细胞主要识别由CD1d分子提呈的脂类或糖脂类抗原,在肝脏中富集,具有重要的免疫调节作用,因此,肝脏组织中iNKT细胞分布及功能分化对NKT细胞依赖性的...
- 丁雅洁谭晓晟窦蕊胡粉粉吴雄文梁智辉翁秀芳
- 关键词:INKT细胞
- 双抗体夹心ELISA法检测腺癌患者外周血MUC1蛋白水平
- 目前,MUC1作为腺癌诊断的肿瘤标志物之一得到广泛研究。但现有的检测手段敏感度较低,为提高检测的敏感度,本科室建立了双抗体夹心ELISA法。首先,我们制备两种融合蛋白MUC1-GST和MUC1-MBP,将这两种蛋白分别免...
- 窦蕊
- 关键词:MUC1双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 检测外周血MUC1蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步应用被引量:8
- 2010年
- 目的为提高外周血MUC1蛋白检测的敏感度,建立了抗MUC1多克隆抗体的夹心ELISA试剂盒,并对其进行了初步测试。方法首先成功构建-表达并纯化了MUC1-GST和MUC1-MBP融和蛋白;通过免疫家兔和大鼠,获得抗MUC1血清,经饱和硫酸铵沉淀、Protein A/G纯化及抗GST和MBP抗体吸收的进一步纯化获得纯的家兔抗人及大鼠抗人MUC1多克隆抗体;通过凝血酶溶解MUC1-GST获得MUC1标准品。经不同的筛选确立了以家兔抗人MUC1抗体作为包被抗体、大鼠抗MUC1抗体作为检测抗体的双抗体夹心试剂盒,敏感度可达到0.2 ng/ml。结果对32例乳腺癌患者和20例健康受试者外周血血清中MUC1蛋白水平的检测结果显示,乳腺癌患者的阳性检出率达到53.1%(17例/32例),而健康对照组检出率为0。结论本研究建立的抗MUC1多克隆抗体双夹心试剂盒有望应用于临床诊断。
- 马吉春柳忠辉方芳窦蕊赵小霞张庆勇陈文博台桂香
- 关键词:MUC1双抗体夹心ELISA腺癌诊断