窦刚
- 作品数：2 被引量：15H指数：1
- 供职机构：生物芯片北京国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡柔嫩艾美耳球虫体内瞬时转染系统的建立
- 2009年
- 本研究通过限制性内切酶介导的整合转染,将球虫表达载体pEtHEA转染的柔嫩艾美耳球虫子孢子经泄殖腔接种到4日龄AA雏鸡的回盲口。在不同时间段在荧光显微镜下检测黏膜内容物内虫体是否表达黄色荧光蛋白;另外还收集粪便中的卵囊,观察其是否同样表达黄色荧光蛋白。结果显示,转染后的柔嫩艾美耳球虫可以在体内发育阶段及卵囊阶段均表达黄色荧光蛋白,表明本研究建立了球虫体内瞬时转染系统,能简便可靠的检测黄色荧光蛋白在球虫内的瞬时表达。为进一步球虫的稳定转染提供了有力的技术支持。
- 窦刚闫文朝刘贤勇殷光文索勋
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫黄色荧光蛋白
- 基于ITS1-5.8SrRNA-ITS2序列的猪源结肠小袋纤毛虫种群特征分析被引量：15
- 2011年
- 【目的】为了揭示结肠小袋纤毛虫病在环境中的分子传播机制,研究了猪源结肠小袋纤毛虫的种群特征。【方法】用粪便涂片镜检和改进型DMEM培养基从病猪结肠内容物分离结肠小袋纤毛虫滋养体,然后用显微观察、吖啶橙荧光染色法和基于ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的分子标记技术分析了豫西地区猪群中结肠小袋纤毛虫的种群特征。【结果】结果显示,从来自豫西地区8个县市的病猪中共分离了15株小袋纤毛虫,5.8S rRNA序列相似性高达99.4%以上,同属于结肠小袋纤毛虫,根据ITS1/2序列分析结果,MJ-2和SX-1株属于结肠小袋纤毛虫基因型A,其余13株均属于结肠小袋纤毛虫基因型B。MJ-2和SX-1株滋养体形态特征明显区别其他13株,绝大多数呈球形,运动缓慢,粪便中和体外培养的虫体密度较低;而其他13株的滋养体均呈多形性,运动快速活跃,虫体密度较大。吖啶橙荧光染色显示,2种基因型滋养体的核结构没明显差别。【结论】首次报道中国猪源结肠小袋纤毛虫存在2个基因型,其中基因型B为优势种群,为防控人和动物结肠小袋纤毛虫病提供重要参考。
- 王天奇窦刚闫文朝张龙现韩利方丁轲贾川川张梦于杜鹃
- 关键词：结肠小袋纤毛虫滋养体基因型分析
