秦永伟
- 作品数：24 被引量：64H指数：5
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 留学生人体寄生虫学双语实验教学探索与思考被引量：5
- 2010年
- 通过对留学生人体寄生虫学实验课进行教学,从学生的情况、课前准备、双语教学模式、教学内容、多媒体教学及随堂测验等六个方面进行了阐述,在教学内容和教学方法上进行了探索,从中得到一些启发与经验。
- 陈金铃朱丹丹秦永伟段义农
- 关键词：人体寄生虫学实验教学留学生
- miR-124-Triad3A参与维持内毒素耐受的机制
- 内毒素耐受是机体炎症反应维持平衡的一种重要的保护反应.对其机制的研究仍然备受关注.Triad3A属于E3泛素蛋白连接酶，可以泛素化降解TLR4.泛素化蛋白是否参与内毒素耐受状态是我们所要研究的重点.方法：使用免疫印迹、E...
- 秦永伟孙晓蕾
- 卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒构建与表达
- 2008年
- [目的]构建大鼠源卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒,进行表达。[方法]以卡氏肺孢子虫DNA为模板,应用PCR扩增MSG基因片段,连接至pGEM-T Easy载体,再克隆至PCDNA3.1(+)载体。构建的重组表达质粒经酶切、PCR鉴定后转染至COS-7细胞,并进行大量增殖。RT-PCR验证转染基因的表达。[结果]重组表达质粒PCDNA3.1(+)/MSG经酶切及PCR鉴定结果表明构建成功。RT-PCR结果显示MSG基因片段成功转染至COS-7细胞,并在其中进行基因表达。[结论]成功构建了PCDNA3.1(+)/MSG重组质粒,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究打下基础。
- 段义农董永生朱丹丹王建新陈金铃秦永伟
- 关键词：卡氏肺孢子虫真核表达
- 福寿螺足组织和外套膜组织细胞培养的初步研究被引量：6
- 2008年
- 采用改良的M199培养基，对福寿螺（Ampullaria gigas Spix）足组织和外套膜组织细胞进行了体外培养研究。结果显示：接种6h后，细胞开始从组织块中迁出，培养至第3天，迁出细胞在组织块周围形成生长晕，第21～28天，细胞覆盖大部分培养瓶底壁。足组织和外套膜组织细胞分别被传至8代和9代。足组织和外套膜组织细胞在原代培养物中主要有两类，一为上皮样小细胞，形态为圆形、椭圆形或多边形，直径7～15μm；另一类为上皮样中型和大型细胞，形态椭圆形或多边形，直径15～30μm。上皮样小细胞数量多，增殖速度较快，在原代和传代培养的中后期皆可形成细胞单层。外套膜组织细胞的生长和增殖能力高于足组织细胞，其贴壁性也好于足组织细胞，Hoechst荧光染色显示外套膜组织细胞的细胞凋亡指数明显低于足组织细胞。结果表明，贝类外套膜组织有潜力成为建立连续细胞系的组织来源。
- 姜德勋许璞沈爱国秦永伟徐建荣孔祥婷沈辉杨家新
- 关键词：GIGAS原代培养传代培养
- 大鼠卡氏肺孢子菌kexin基因克隆、表达及融合蛋白的免疫特性研究
- 肺孢子菌是一种机会性致病菌,在免疫功能不全宿主可以引发严重的肺孢子菌肺炎,肺孢子菌肺炎的发病率逐年升高,是免疫功能不全宿主发病率和死亡率升高的重要原因。肺孢子菌kexin抗原是一种枯草杆菌样蛋白酶,有实验表明它能够被一种...
- 段义农朱丹丹陈金铃秦永伟王建新
- 文献传递
- P38在LPS诱导大鼠雪旺氏(Schwann)细胞TNF-α表达中的作用被引量：7
- 2007年
- 研究P38对脂多糖(LPS)诱导的大鼠雪旺氏细胞(Schwann cell)肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)表达的作用.采用Western印迹检测细胞中P38激酶的活性;用P38的特异性抑制剂(SB202190)预处理细胞后,用ELISA检测细胞中TNF-α水平;RT-PCR检测细胞中TNF-αmRNA的表达;用免疫荧光双标法检测磷酸化P38的表达定位.LPS可显著激活雪旺氏细胞中的P38信号通路,其激活高峰在LPS刺激后15～30min,60min后,P38磷酸化水平开始逐渐下降,120min时又升高;用SB202190预处理细胞后,可显著抑制细胞TNF-αmRNA以及TNF-α的表达;LPS刺激细胞后通过与细胞膜表面Toll-like receptor 4(TLR4)结合后引起P38磷酸化,SB202190可抑制该过程.P38信号通路的激活可能是LPS诱导TNF-α表达的前提.通过阻断细胞内信号转导通路来减少TNF-α及其它细胞因子的产生,为抑制周围神经损伤后的炎症以及免疫反应发生提供了一条新的思路.
- 秦永伟程纯王海波高永静邵晓轶沈爱国
- 关键词：P38脂多糖
- LPS对大鼠雪旺氏细胞TNF-α合成和释放的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的诱导作用对大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子α(tumor nec-rosis factor-α,TNF-α)的表达。方法:不同浓度,不同时间用LPS刺激雪旺氏细胞,用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测细胞胞液和上清中分泌的TNF-α的表达量,同时用间接免疫荧光细胞化学染色检测TNF-α的细胞定位。结果:用LPS10μg/ml刺激后2小时能显著促进雪旺氏细胞浆内TNF-α的表达,同时也检测到培养液上清中有TNF-α的释放。结论:细菌的致病因子LPS的诱导确能促进雪旺氏细胞高效表达和分泌TNF-α,从而为雪旺氏细胞作为免疫活性细胞在周围神经系统中发挥免疫调节作用提供初步依据。
- 秦永伟沈爱国王海波邵晓轶高永静程纯
- 关键词：脂多糖雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-Α
- PC-12神经元作为海分枝杆菌感染宿主的实验研究
- 2015年
- 目的研究海分枝杆菌感染PC-12神经元细胞的感染潜能及其诱导促炎性细胞因子表达的免疫特性。方法用海分枝杆菌感染神经营养因子(nerve growth factor,NGF)诱导分化的PC-12神经元,采用激光共聚焦显微镜观察细菌在PC-12神经元细胞内的定位分布,并计数细菌的菌落形成单位(CFU)以观察其在PC-12神经元细胞内的增殖情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(Interleukin)-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA及蛋白的表达情况。结果海分枝杆菌感染PC-12细胞后,激光共聚焦显微镜观察细菌侵入PC-12神经元胞浆内并进行增殖。当细菌以MOI=20感染神经元细胞时,感染后24h与感染后6h相比,细菌在细胞内增殖了约25倍。同时海分枝杆菌感染后6h即可诱导促炎性分子TNF-α、IL-1β、iNOS和COX-2的mRNA表达明显增加,感染24h后TNF-α、IL-1β、iNOS和COX-2的蛋白表达也明显增加。结论 PC-12能够作为海分枝杆菌感染的宿主细胞,并引起促炎相关因子的分泌,从而促进炎症反应。
- 秦永伟邵晓轶陈站臧琼梅孙杰冯金荣孙晓雷段义农
- 关键词：宿主炎症
- 卡氏肺孢子虫p55抗原片段免疫原性的研究
- 2009年
- 目的研究卡氏肺孢子虫p55基因片段重组质粒表达产物的免疫原性。方法原核表达质粒pGEX-570的表达产物融合蛋白GST-p55/570,经谷胱甘肽(GST)琼脂糖凝胶纯化后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察。将33只BALB/c小鼠随机分为3组(每组8～13只),分别用GST-p55/570(50μg/只)、GST(50μg/只)和PBS免疫,每2周1次,共4次。末次免疫后7d,分离小鼠脾细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞增殖反应;分别于免疫前和初次免疫后14、28、42和49d,采血分离血清,ELISA检测血清中GST-p55/570抗体水平。用GST-p55/570组初次免疫后49d的血清分别与GST-p55/570和GST反应,进行蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果表达产物GST-p55/570的相对分子质量(Mr)约为47000。MTT法结果显示,GST-p55/570组小鼠淋巴细胞的刺激指数(2.0630±0.1602)显著高于GST组(1.1345±0.0735)和PBS组(1.1248±0.0416)(P值均<0.01)。免疫后14～49d,GST-p55/570组小鼠的血清抗体水平均显著高于GST组和PBS组(P值均<0.01)。Western blotting结果显示,免疫后血清能与GST-p55/570发生特异性反应。结论融合蛋白GST-p55/570能诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫。
- 陈金铃段义农王建新朱丹丹秦永伟
- 关键词：卡氏肺孢子虫免疫原性
- 案例教学法在人体寄生虫学教学中的应用被引量：2
- 2012年
- 由于学科结构的调整,传统的讲授法在人体寄生虫学实施过程中遇到诸多的问题,文章探讨了将案例教学法应用到人体寄生虫学教学中的可行性,阐述了其实施的具体过程,详细分析了实施中可能会遇到的问题并提出了解决方案,力争提高课堂教学效率和学生学习效果。
- 冯金荣秦永伟孙伟朱丹丹陈金铃段义农
- 关键词：人体寄生虫学教学改革案例教学法
