魏敏
- 作品数：6 被引量：24H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 稳定转染金属调理素-1对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响
- 2012年
- 目的构建pEGFP-金属调理素-1（MPS-1）真核表达载体，体外转染至SGC-7901胃癌细胞，观察MPS-1转染后MPS-1蛋白表达，并检测SGC-7901细胞侵袭能力的变化。方法聚合酶链反应（PCR）扩增MPS-1全长255bp的编码序列，将PCR扩增产物连接入pEGFP—C1载体，经测序确认序列无误后成功构建pEGFP-MPS-1真核表达载体。采用Lipofectamine2000转染SGC-7901胃癌细胞株，用浓度为2．0g／L的G418筛选2周后得到外源性MPS-1稳定表达的SGC-7901细胞并扩增。Westernblot法检测MPS-1的表达，TransweH实验检测pEGFP—MPS-1过表达后对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果得到外源性MPS-1稳定表达的胃癌细胞株，Westernblot显示外源性MPS-1在胃癌SGC-7901细胞中表达成功，而且，pEGFP—MPS-1过表达后胃癌细胞的Transwell实验显示pEGFP—MPS-1过表达细胞组相对于空载组和空白组的侵袭指数分别为2．10±0．25比1．00±0．00和2．10±0．25比0．85±0．22（P〈0．05），提示MPS-1稳定表达后胃癌细胞的侵袭能力增加。结论pEGFP—MPS-1的稳定表达增加了胃癌细胞SGC-7901的侵袭能力。
- 杨中印瞿颖魏敏朱正纲刘炳亚顾琴龙
- 关键词：胃癌真核表达载体
- 稳定转染金属调理素-1对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响
- 目的 构建pEGFP-金属调理素-1(MPS-1)真核表达载体,体外转染至SGC-7901胃癌细胞,观察MPS-1转染后MPS-1蛋白表达,并检测SGC-7901细胞侵袭能力的变化.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增MPS...
- 杨中印瞿颖魏敏顾琴龙刘炳亚
- PHF10融合蛋白表达、抗体制备及其在胃癌中的表达的检测
- 2010年
- 目的:制备PHF10多克隆抗体,并检测胃癌细胞系和胃黏膜永生化细胞株GES-1中PHF10表达谱。方法:在大肠杆菌BL21中表达GST标签标记的PHF10融合蛋白,以纯化的PHF10重组融合蛋白为抗原制备兔PHF10多抗血清。进一步利用亲和纯化方法制备PHF10多克隆抗体;为确定PHF10抗体的特异性,通过Western blot检测瞬时表达的Flag-PHF10融合蛋白,同时以抗Flag单克隆抗体(mAb)作为对照;利用制备的抗体通过Western blot检测PHF10在GES-1和各种胃癌细胞系中的表达。结果:与PHF10特异性结合的抗体能够通过免疫法获得;利用制备的抗体检测到PHF10在各胃癌细胞系与GES-1之间表达差异有统计学意义。结论:获得了特异性抗PHF10抗体,用该抗体可以检测到胃癌细胞系中PHF10的表达,可能是一个新的肿瘤靶标。
- 魏敏刘家云吕欣聂辉刘炳亚朱正纲杨忠印顾琴龙
- 关键词：抗体胃癌
- PHF10磷酸化多克隆抗体的制备与其在胃癌细胞PHF10磷酸化水平检测中的应用被引量：1
- 2011年
- 目的 制备PHD指蛋白 10（PHF10）磷酸化多克隆抗体并用于PHF10蛋白的研究,探讨其在胃癌发生发展中的作用与机制.方法 结构预测后应用固相法合成磷酸化多肽.应用磷酸化多肽免疫家兔得到多克隆抗体,并利用Dotblot方法进行此抗体特异性效价的鉴定,结果显示PHF10最低阳性检测浓度为7.8μg/L.利用PHF10磷酸化多抗对8株胃癌细胞和胃黏膜永生化细胞PHF10蛋白磷酸化水平进行检测,胃癌细胞株PH F10磷酸化水平明显高于胃黏膜永生化细胞GES-1.结果 制备出的PHF10蛋白磷酸化多克隆抗体效价较高,可用于磷酸化PHF10蛋白的鉴定.结论 此多克隆抗体可用于PHF10蛋白的研究.
- 吕欣魏敏朱正纲刘炳亚顾琴龙
- 关键词：多克隆抗体磷酸化胃癌
- 冬凌草甲素抗肿瘤的研究进展被引量：23
- 2010年
- 冬凌草甲素是从冬凌草等植物中提取出的一种贝壳杉烯二萜类化合物,在抑制肿瘤细胞增殖、诱导自噬及凋亡等方面具有较好的抗肿瘤活性。本文对冬凌草甲素的抗肿瘤活性及作用机制的研究进展作一综述。
- 刘家云魏敏顾琴龙
- 关键词：抗肿瘤药细胞凋亡分子作用机制冬凌草素
- 稳定转染金属调理素-1对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响
- 目的:构建pEGFP-金属调理素-1(MPS-1)真核表达载体,体外转染至SGC-7901胃癌细胞,观察MPS-1转染后MPS-1蛋白表达,并检测SGC-7901细胞侵袭能力的变化。方法:聚合酶链反应(PCR)扩增MPS...
- 杨中印瞿颖魏敏朱正纲刘炳亚顾琴龙
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