魏后军
- 作品数:113 被引量:141H指数:8
- 供职机构:江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 兔场突发兔出血症诊治报告
- 2011年
- 兔出血症,俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的家兔烈性传染病。目前,该病可由兔出血症疫苗得到很好防控,但由于免疫程序不当、主观因素导致免疫失败等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。2010年4月底,江苏溧阳市某兔场发生兔子连续死亡情况,与专家联系,初步判断为疑似兔出血症病例,后经诊断为兔出血症,立即进行兔出血症疫苗紧急免疫,从而避免该兔场发生大规模爆发和死亡。
- 徐鹏范志宇王芳胡波薛家宾魏后军
- 关键词:兔出血症兔场兔瘟紧急免疫烈性传染病兔病毒性出血症
- 兔出血症诊治病例被引量:2
- 2011年
- 兔出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)俗称兔瘟,是由兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的烈性家兔传染病。目前,使用兔出血症疫苗后该病得到了很好防控,但由于免疫程序不适当或因主观因素不免疫疫苗等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。
- 徐鹏范志宇王芳胡波薛家宾魏后军
- 关键词:兔出血症病毒病例诊治免疫疫苗VIRUS
- 携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的VP60蛋白重组杆状病毒
- 本发明涉及携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的VP60蛋白重组杆状病毒及其应用,属于生物技术领域。通过PCR扩增兔出血症病毒衣壳蛋白VP60(无起始密码子)基因,将PCR扩增产物克隆入pMD19-T载体后连接入真核转移载体,插...
- 王芳盛蓉范志宇胡波魏后军薛家兵姜平
- 我国家兔危害严重疫病流行现状调查
- 2008~2010年期间,在我国华东、西南、东北、华南、华北、华中主要家兔养殖地区,调查兔场118个。存栏兔累计约126.56万只.对危害家兔生产严重的兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、支气管败血波氏杆菌病、产气荚膜梭菌...
- 徐为中薛家宾王芳范志宇胡波徐鹏魏后军
- 关键词:家兔养殖发病率
- 兔出血症病毒新毒株RHDV2的流行与控制(综述)被引量:5
- 2016年
- 兔出血症病毒(RHDV)可引起兔病毒性出血症(RHD)。RHD是一种急烈性、高度致死性兔传染病,给家兔养殖业造成巨大经济损失。2010年,研究人员在法国兔场发现一种新型兔出血症病毒RHDV2。与经典RHDV不同,该毒株能够感染幼龄家兔,甚至跨物种感染野兔,并突破经典RHDV疫苗的免疫防线,迅速在世界范围内流行。目前我国还未有RHDV2的报道,但随时面临发生该疫情的风险。本文综述RHDV2的病原学、流行病学特征、临床症状、诊断和防控等方面的研究进展,旨在提高对RHDV2的认识,加强对RHDV2的监测,提前做好防控措施。
- 王芳陈萌萌宋艳华范志宇胡波魏后军仇汝龙徐为中薛家宾
- 关键词:兔出血症病毒
- 兔支气管败血波氏杆菌OMP-ELISA抗体检测方法的建立被引量:3
- 2011年
- 为简便快速检测支气管败血波氏杆菌(Bb),建立了一种特异、敏感的间接ELISA方法。通过应用超声波裂解和超速离心法提取了支气管败血波氏杆菌Ⅰ相菌外膜蛋白(OMPs),并用该蛋白包被酶标板,经特异性、敏感性和重复性试验优化后建立间接ELISA方法。结果表明,试验确定抗原的包被浓度为14.44μg/ml,可检测血清最高稀释度达1∶400;该方法有很高的特异性和敏感性,与微量凝集试验相比,敏感性提高约33倍;该方法重复性良好。
- 范志宇王欣王芳熊富强胡波徐鹏魏后军徐为中
- 关键词:支气管败血波氏杆菌间接ELISA
- RHDV VLPs单克隆抗体的制备及其识别表位的初步定位被引量:1
- 2015年
- 为了筛选兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)的特异性单抗,并进一步分析单抗识别表位的分布情况,将重组杆状病毒r Ac V-Bac-VP60接种Sf9昆虫细胞,收获细胞培养物,电镜观察显示重组VP60蛋白获得有效表达,并可组装成病毒样粒子(VLPs)。将RHDV VLPs作为免疫原与等量弗氏佐剂乳化,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经3次亚克隆后,获得11株能稳定分泌抗RHDV VLPs抗体的阳性杂交瘤细胞株。间接ELISA、IFA和Western Blot鉴定结果表明,这11株单克隆抗体均能够特异地识别RHDV VLPs和天然RHDV。11株单抗均为Ig G1,其中1D4和3F7的轻链为Lambda型,其余均为Kappa型。截短表达结果显示,单抗5A3针对RHDV VP60的NTA区,5F3针对RHDV VP60的S区,单抗1B8、1D4、3D11、3F7、4C2、4G2、5G2、5H3和6B2针对RHDV VP60的P区。研究为RHDV VLPs抗原表位的鉴定和RHDV结构功能的研究奠定了基础,同时为RHDV的检测和新型疫苗研究提供物质基础。
- 宋艳华胡波范志宇彭伟魏后军薛家宾徐为中王芳
- 关键词:RHDVVLPS单克隆抗体表位
- 鉴别检测兔出血症病毒1型、2型双抗体夹心ELISA方法的建立及应用被引量:1
- 2023年
- 为实现对兔出血症病毒1型(RHDV1)和兔出血症病毒2型(RHDV2)的有效鉴别诊断,从而有效预防和控制兔出血症,将抗RHDV广谱单抗2A11作为捕获抗体包被于ELISA板,以HRP标记的抗RHDV1特异性单抗1D4、抗RHDV2特异性单抗6B3分别作为检测抗体,经条件优化,建立了鉴别检测兔出血症病毒1型、2型的双抗体夹心ELISA方法,并进行敏感性、特异性试验,对送检的60份兔肝脏样品用该双抗体夹心ELISA方法和RT-PCR方法进行检测,比较这2种方法的符合率。结果显示,该双抗体夹心ELISA方法的最佳工作条件为:捕获抗体浓度为4μg/mL,2种HRP标记的检测抗体的浓度均为0.5μg/mL;判定标准为:以检测抗体HRP-1D4检测样品D值>0.195判为RHDV1阳性,以检测抗体HRP-6B3检测样品D值>0.166判为RHDV2阳性;通过特异性和敏感性试验发现,该双抗体夹心ELISA方法具有较强特异性和较高敏感性。检测60份送检的兔肝脏样品,发现本方法与RT-PCR方法相比,检测RHDV1阳性样品的符合率为100%(9/9),RHDV2阳性样品的符合率为82.61%(19/23),阴性样品的符合率为87.5%(28/32),总符合率为93.33%(56/60),且该方法阳性样品检出率高于RT-PCR方法。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法可有效地鉴别检测RHDV1和RHDV2这2种不同基因型的病毒,为兔出血症的流行病学研究提供有力的技术支撑。
- 陈兴继魏后军范志宇范志宇宋艳华胡波仇汝龙宋艳华王芳
- 关键词:兔出血症病毒双抗体夹心ELISA单抗
- VP60 loop区的突变对RHDV VLP功能的影响被引量:2
- 2016年
- [目的]从病毒样颗粒(VLP)的形成、血凝特性以及受体组织血型抗原(HBGA)结合特性方面,分析VP60 loop区在兔出血症病毒(RHDV)VLP功能中的作用。[方法]针对RHDV VP60蛋白的loop区411-417位氨基酸对应的基因设计引物,通过SOE法将411-417位氨基酸等量替换成柔性氨基酸GSGGSGG,获得重组基因VP60-411-417,利用杆状病毒表达系统获得重组病毒r Ac-VP60-411-417。将重组病毒接种Sf9细胞,通过IFA、SDS-PAGE和Western blot等方法证明嵌合蛋白P411-417的表达。通过负染透射电镜观察嵌合蛋白VLP的形成,利用血凝试验分析嵌合蛋白的血凝特性,利用合成多糖结合试验分析嵌合蛋白的受体结合特性。[结果]Western blot、IFA和负染透射电镜试验结果显示,嵌合蛋白P411-417得到有效表达,且能够形成完整的VLP;合成多糖结合试验结果显示,嵌合蛋白能够特异性结合HBGA,但其血凝特性消失。[结论]411-417位氨基酸的突变显著影响RHDV的血凝特性,不影响VLP的形成以及结合HBGA的能力,说明该区域是血凝特性的相关位点,但不是HBGA受体结合的关键位点。
- 宋艳华李珊珊王芳胡波范志宇魏后军薛家宾徐为中
- 关键词:重叠延伸PCR嵌合蛋白血凝特性
- 单一位点嵌合巴氏杆菌PlpE抗原表位的兔出血症病毒VP60重组抗原及其制备和应用
- 本发明属于生物医学技术领域,提供了一种单一位点嵌合了巴氏杆菌抗原表位的兔出血症病毒VP60重组抗原及其制备方法和应用,所述重组抗原通过将PlpE表位集中分布的一段区域(长180个氨基酸)嵌合展示到兔出血症病毒VP60蛋白...
- 朱伟峰王芳胡波魏后军范志宇
- 文献传递