高路
- 作品数：5 被引量：23H指数：2
- 供职机构：江苏大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 荧光定量PCR检测家蚕核型多角体病毒在其宿主体内的增殖动态被引量：18
- 2005年
- 为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx morinuclear polyhedrosis virus,BmNPV)在其宿主幼虫体内不同组织中的增殖动态,对敏感性家蚕品种306幼虫进行经口定量滴注病毒。在接种后9个时间点,对中肠、血淋巴和脂肪体进行取样。以BmNPVDNA聚合酶基因(dnapol)指示病毒拷贝数,同时以家蚕细胞质肌动蛋白A3(actin A3)基因作为参比基因,用荧光定量PCR的方法分别检测各个时间点的中肠、血淋巴和脂肪体中病毒的拷贝数。结果表明经口感染2h,病毒进入中肠;12h,病毒已经到达血淋巴和脂肪体;再经过约12h的潜伏期,病毒在各组织中开始快速增殖,到84h各组织中病毒增殖达到平台期。
- 姚勤高路陈克平胡志刚
- 关键词：家蚕核型多角体病毒DNA聚合酶基因肌动蛋白基因荧光定量PCR
- 家蚕浓核病毒(中国镇江株)在不同感受性宿主体内的复制被引量：3
- 2007年
- 家蚕浓核病毒中国镇江株是一株双生浓核病毒（bidensovirus）。其宿主感染后的病症与典型的家蚕浓核病毒（BmDNV-1伊那株）表现相似，病蚕软化，中肠的圆筒型细胞呈浓核症。该病毒的最大特点是基因组中含有二套DNA分子（VD1，VD2），这两种核酸分子以单链（＋VD1，-VD1，＋VD2，-VD2）线型方式被分开包装在各自的衣壳蛋白中，成为四种病毒体，而且它自身编码DNA聚合酶。有部分蚕品种对该病毒表现完全抗性，即不发病。分别对敏感性家蚕品种（华八35）和抗性家蚕品种（秋丰d）的幼虫进行经口接种病毒。在接种后，从2h到96h分9个时间点，对中肠组织进行取样。以家蚕细胞质肌动蛋白A3（actin A3）基因作为参比基因，用来标定取样组织细胞数。针对VD1和VD2分别设计特异引物，用荧光定量PCR的方法分别检测各个时间点的样品中的病毒基因组VD1和VD2拷贝数。结果表明：无论是在感性还是在抗性宿主体内，家蚕浓核病毒中国株的基因组VD1和VD2在各时间点拷贝数相近，表现出VD1和VD2是同步复制的；病毒侵入两种宿主中肠的初始量（接种后2h）基本相等，每个细胞约为6～10拷贝数。在敏感性宿主体内病毒感染过程表现为潜伏期，指数增长期，平台期。从接种后2h到12h为病毒潜伏期；12h到36h为指数增长期，倍增时间为1．71h，大约扩增15次；36h到96h为平台期，进入平台期病毒的拷贝数达到20万个。在抗性宿主体内病毒处于一种极低水平的增殖，从添毒后2h的6～10拷贝数到96h的150～200拷贝数，病毒复制倍增时间分别为3h和12h，大约扩增5次。推测家蚕对浓核病毒中国株的抗病性，只是一种慢性的带毒不发病的表现。
- 韩序姚勤高路王永杰包方陈克平
- 关键词：家蚕体内增殖荧光定量PCR
- 一种新的家蚕信息素相关蛋白基因BmP218的生物信息学分析及功能预测
- 2009年
- 在进行抑制性减法杂交实验中,我们获得一条差异基因片段,EST拼接终获得了这一个654bp ORF阅读框, NCBI数据库检索未发现同源基因。但在家蚕数据库检索有同源基因存在为一种信息素相关的结合蛋白,PCR实验结果表明该基因确实在家蚕多种组织中存在转录,证明是一种新的基因,暂命名为BmP218。进一步生物信息学分析表明该定位在家蚕的第23号染色体上,有7个外显子。其同源物物有8个,虽然基因结构不同,但结构域非常相似。蛋白质分析中发现蛋白结构中包含有6个α螺旋,12个不规则卷曲,在氨基酸序列中存在有一段与昆虫细小病毒衣壳蛋白类似的区域(100-183)。
- 杨哲高路陈慧卿陈克平
- 关键词：家蚕幼虫蜕皮激素结合蛋白
- 利用电穿孔法构建含有桑天牛纤维素酶(Ag-Egasel)基因的转基因家蚕
- 在这个实验过程中,我们尝试利用电击法将构建的携带有桑天牛纤维素酶基因的PiggyBac质粒转入家蚕秋枫品系卵中,并在其G0和G1代基因组中检测到纤维素酶基因的存在。桑天牛纤维素酶(Ag-EgaseI)属于GHF45家族,...
- 杨哲陈克平姚勤高路
- 关键词：电穿孔法纤维素酶家蚕PIGGYBAC绿色荧光蛋白转基因
