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颜玉玲
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1
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供职机构:
重庆医科大学附属第二医院
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发文基金:
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相关领域:
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合作作者
佘强
重庆医科大学附属第二医院
翁敏杰
重庆医科大学附属第二医院
杜建霖
重庆医科大学附属第二医院
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Tbx18-Cre基因敲入小鼠Cre基因保真性研究
2013年
目的揭示Tbx18-Cre基因敲入小鼠cre基因表达的保真性。方法用实时荧光定量PCR(Real—timePCR)快速检测基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数;JunctionPCR验证基因敲入小鼠整合位点Th。18-Cre的纯合性:利用Tbx18Cre。一纯合子小鼠模型验证Cre基因对下游基因的影响;利用Tbx18-Cre/Rosa26R.LacZ示踪模型,通过检测LacZ的表达,验证Cre基因的时空保真性。结果实时荧光定量PCR验证rkl8基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数准确,JunctionPCR验证其整合位点特异。Thx18Cre-/-纯合子小鼠模型能特异性阻断转录因子Tbx18的表达,引起信号下游基因CX40、CX43、CX45的表达明砂升高。Tbx18-Cre/Rosa26R—LacZ示踪模型LacZ蛋白表达部位与Tbx18mRNA表达部位一致。结论7阢18一Cre基因敲入小鼠中Cre基因具有高度准确的时空保真性和特异性。
颜玉玲
翁敏杰
杜建霖
佘强
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