韩建永
- 作品数：70 被引量：250H指数：10
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 雷帕霉素通过促进自噬提高小鼠iPSCs诱导效率
- 2017年
- 【目的】雷帕霉素(Rapamycin)可以激活和促进细胞的自噬过程。探明在体外培养系统中添加雷帕霉素,检测是否可以通过促进自噬过程提高iPSCs诱导效率。【方法】在iPSCs诱导过程的1~3d和4~6d分别加入雷帕霉素,检测自噬现象,同时对iPSCs诱导过程中多能性基因表达进行检测,统计原代iPSCs克隆数等,评价雷帕霉素对iPSCs重编程的影响;在iPSCs的培养过程中分别加入50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理。【结果】使用浓度为50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理,可以提高iPSCs的诱导效率。50nM/L浓度处理,重编程效率较高【结论】雷帕霉素在iPSCs重编程过程中可以促进自噬,提高Nanog表达水平,抑制p53表达,进而提高iPSCs诱导效率。
- 梁浩然曹安韩建永曹素英
- 关键词：自噬重编程
- 兔胚胎细胞核移植重组胚的发育力
- 2002年
- 以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM- 199培养液内于兔胎儿成纤维细胞饲养层 (REF feeder)上共同培养的重组胚获得了最高的 2～ 4-细胞发育率和桑椹胚或囊胚的发育率 ,分别为 6 5 .7%和 2 2 .9%;移植 111枚重组胚给 9只假孕母兔 ,其中 2只妊娠 ,1只完成足月妊娠产出 2只克隆仔兔 ,另 1只在妊娠 2 2 d流产 1只克隆死胎。
- 桑润滋韩建永常万存仲跻峰
- 关键词：兔胚胎细胞核移植克隆体外发育
- 影响波尔山羊胚胎移植妊娠效果因素研究
- 本文就波尔山羊胚胎质量、胚胎发育阶段、胚胎数量、受体卵巢黄体数与卵泡数、供受体发情同期化程度、胚胎移植的方向以及术者熟练程度等因素与受体移植妊娠率的关系进行了研究。结果表明,囊胚较桑椹胚妊娠率高;胚胎质量以A级桑椹胚妊娠...
- 李俊杰桑润滋金东航田树军韩建永李铁栓
- 关键词：波尔山羊胚胎移植妊娠率
- 文献传递
- 山羊PGCs用于分离与克隆类ES细胞被引量：22
- 2002年
- 选择健康成年本地白山羊 ,自然发情、配种后 4 4 d取胎儿 ,以传统的原始生殖细胞 (PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞 (类 ES细胞 ) ,并对山羊类 ES细胞在不同饲养层上进行培养。结果表明 ,采用传统方法和共培养的方法并添加细胞因子均能分离获得类 ES细胞。分离获得的类ES细胞在同源 (山羊 )胎儿细胞饲养层上生长效果较好 ,可传 4代或 5代 ,而在小鼠原代成纤维细胞饲养层上类 ES细胞仅传 3代。另外 ,共培养不添加细胞因子组仅获 1个类 ES细胞集落 。
- 韩建永桑润滋孙国杰王志刚李俊杰
- 关键词：克隆山羊胚胎干细胞原始生殖细胞
- 影响山羊胚胎干细胞分离克隆效果的因素研究
- 本试验就胚龄、饲养层、生长因子及培养系统等因素对山羊胚胎干细胞分离克隆效率的影响进行研究,结果表明,在2种不同饲养层上,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚,囊胚的脱带率均高于桑椹胚,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不...
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航王志刚李俊杰
- 关键词：山羊胚胎干细胞
- 文献传递
- 波尔山羊胚胎移植受体妊娠后期能量和蛋白质营养需要研究
- 波尔山羊是世界上著名的肉用山羊品种。我国从1995年开始引进,但受体母羊和胎儿来自不同品种,妊娠期胎儿和哺乳期羔羊的生长发育强度与纯种繁育时有较大差别,受体营养水平直接影响着波尔山羊诸多优点的发挥。本研究是在舍饲条件下,...
- 曹素英李建国韩建永
- 关键词：妊娠后期消化能瘤胃降解蛋白瘤胃非降解蛋白
- 文献传递
- 山羊类ES细胞的分离与克隆被引量：12
- 2003年
- 采集山羊交配后 6～ 8d的桑椹胚、囊胚和孵化囊胚 ,将桑椹胚和囊胚分别放在小鼠原代胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层和同源原代胎儿成纤维细胞 (PGEF)饲养层上比较其脱带时间及脱带率。脱带后 ,将各自一半胚胎切割 ,把含 ICM的半胚分别放在相应饲养层上进行培养 ,另一半整胚在各自饲养层上继续培养 ,而孵化囊胚直接于PGEF饲养层上培养。当 ICM增殖一定程度时进行传代 ,以比较其类 ES细胞分离与克隆的效果。结果表明 ,在 2种不同饲养层上 ,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚 ,囊胚的脱带率均高于桑椹胚 ,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不大。脱带切割囊胚不论在 PMEF还是在 PGEF饲养层上 ,其贴壁时间均短于脱带整胚及孵化囊胚 ,而贴壁率高于脱带整胚 ,与孵化囊胚相似。脱带整胚及脱带切割胚在 PMEF饲养层上所获类 ES细胞只能维持 3代 ,而在PGEF饲养层上 ,脱带切割半胚和孵化囊胚所获类 ES细胞传至 5代。由此认为 ,对脱带后的胚胎进行切割处理 ,有利于 ICM的贴壁和增殖 ;应用同源原代胎儿成纤维细胞饲养层培养系统 ,有利于类
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航田树军
- 关键词：山羊克隆饲养层胚胎干细胞
- 应用生殖激素对小尾寒羊同期发情效果研究被引量：25
- 2004年
- 应用羊用孕酮栓、孕马血清促性腺激素和氯前列烯醇相结合的方法对 99只空怀小尾寒羊和 36只哺乳母羊 (产后 2 5～ 35d)进行同期发情试验研究。结果表明 ,99只空怀母羊在 2 4h内的同期发情率达到 81 8% ,4 8h内为 89 9%。孕酮栓在空怀母羊阴道内埋置不同时间 (12d与 14d)的同期发情率无显著差异 (P >0 0 5 ) ;对空怀母羊注射不同剂量 (330IU/只和 2 5 0IU/只 )孕马血清促性腺激素对羊的同期发情率的影响无显著差异 (P >0 0 5 )。 36只哺乳母羊在 2 4h与 4 8h内的同期发情率均为 80 6 % (2 9/36 ) ,对哺乳母羊注射孕马血清促性腺激素 2 5 0IU/只的同期发情率为 90 0 % (18/2 0 ) ,优于注射 330IU/只的同期发情率 6 8 8% (11/16 )。
- 田树军桑润滋李俊杰金东航李铁栓贾日东韩建永赵俊肖
- 关键词：生殖激素小尾寒羊同期发情发情效果
- 一种获得猪诱导性多能干细胞的新方法被引量：1
- 2011年
- 诱导性多能干细胞技术表明,通过过表达4个重编程因子可使体细胞逆转到多能性的状态,为建立更多家畜动物的多能性干细胞系提供了新的方法,如猪、牛、羊等农业动物.莫洛尼氏鼠白血病逆转录病毒载体被广泛应用于小鼠iPS细胞的建系和机制研究上,然而这种病毒只能感染小鼠和大鼠细胞,这限制了它在其他哺乳动物iPS细胞系建立上的应用.本实验采用一种新的逆转录病毒系统,可以高效便捷地从猪成纤维细胞中获得iPS细胞.通过在GP2-293细胞中包装VSV-G蛋白包被的病毒,仅一步感染猪成纤维细胞即可转入4个人源重编程因子(Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc).在添加有碱性成骨因子bFGF的人类胚胎干细胞培养体系中,成功建立6株和人类胚胎干细胞形态极其相似的猪iPS细胞系.这些猪iPS克隆具有较大的细胞核/细胞质比例、边界清晰、细胞呈扁平状等特征.在体外可以分化成拟胚体,注射入免疫缺陷性小鼠体内可以形成畸胎瘤,含有3种胚层类型的组织.
- 阮卫民韩建永李品曹素英安杨林宾李宁
- 关键词：诱导性多能干细胞拟胚体畸胎瘤
- 哺乳动物乳腺生物反应器的研究现状及存在问题被引量：13
- 2002年
- 本文在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,介绍了乳腺生物反应器的原理及应用现状,指出乳腺生物反应器将在生产新型牛奶和药用珍稀蛋白等方面为人类做出巨大的贡献,最后指出存在的问题并展望了乳腺生物反应器前景。
- 孙国杰桑润滋李俊杰韩建永
- 关键词：哺乳动物乳腺生物反应器
