韦静
- 作品数：15 被引量：141H指数：5
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- 融合基因FADDdel-GFP修饰在胰岛细胞自杀效应中的作用
- 2007年
- 目的研究FADDdel-GFP在Fas/FasL介导的胰岛细胞自杀效应中的作用。方法采用DNA转染技术将重组体pFADDdel-GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞);采用FACS检测细胞因子诱导后NIT细胞的Fas和FasL表达情况及细胞自杀效应;采用active caspase3检测试剂盒检测细胞因子作用前后NIT细胞的caspase-3活性变化。结果NIT细胞表面无Fas和FasL表达,细胞因子可促其表达增加;细胞因子作用后,FADDdel-GFP修饰的NIT细胞的细胞损伤百分率和细胞内caspase3活性明显低于对照组。结论FADDdel-GFP修饰的NIT细胞具有一定的抵抗Fas/FasL途径介导细胞自杀效应的能力。
- 胡萍李君武叶嗣颖季煜华李小兰韦静
- 关键词：FASFASL
- 融合蛋白FADDdel-GFP对死亡受体介导的胰岛细胞凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究融合蛋白FADDdel-GFP对死亡受体介导的细胞凋亡信号的生物学效应,以探讨通过基因修饰靶细胞对1型糖尿病的影响。方法用脂质体将融合基因pFADDdel-GFP导入胰岛细胞株NIT,通过细胞RT-PCR和荧光显微镜检测其表达,采用FACS检测抗-Fas抗体诱导的胰岛细胞株的细胞毒效应。结果转染重组子pFADDdel-GFP的NITf-g细胞可见绿色荧光蛋白表达;NITf-g细胞对抗-Fas诱导的细胞损伤率为10.16%,细胞内的Caspase-3的活性为12.33%,均明显低于对照组(P<0.05)。结论成功建立了稳定表达FADDdel-GFP的胰岛细胞株;FADDdel-GFP可有效抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导。
- 胡萍李君武叶嗣颖林绍强李小兰韦静
- 关键词：FADDCASPASE-3凋亡1型糖尿病
- 血清标本中HBsAg免疫复合物对检测HBsAg的影响被引量：2
- 1996年
- ０．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ处理ｌｈ后解离ＨＢｓＡｇ一抗Ｈｈ免疫复合物，并变性抗ＨＢｓＡｇ抗体而对ＨＢｓＡｇ免疫反应性无影响，３４例临床抗ＨＢｓ＋血清样品经ＨＣｌ处理前后，常规ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＳＡｇ比较，结果：酸处理前ＨＢｓＡｇ阳性率为１１．７６％，处理后增加至４１．１８％（Ｐ＜０．０１），实验表明血清样品经酸处理后能明显提高临床乙肝ＨＢｓＡｇ检出率。
- 林晨罗伟中刘小澄韦静宋爱华
- 关键词：乙型肝炎表面抗原ELISA
- 酸解离HBsAg免疫复合物以提高HBsAg检出率的探讨被引量：25
- 1995年
- 酸解离ＨＢｓＡｇ免疫复合物以提高ＨＢｓＡｇ检出率的探讨广州暨南大学医学院微生物和免疫学教研室（５１０６３２）林晨，罗伟中，刘小澄，韦静附属医院检验科宋爱华用ＥＬＩＳＡ检测乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）时。有时出现与临床不符的阴性结果。我们考虑是否病毒...
- 林晨罗伟中刘小澄韦静宋爱华
- 关键词：HBSAGELISA免疫复合物
- 分泌型PD-L1真核表达载体的构建、表达及其体外效应的初步研究
- 2006年
- 目的构建分泌型PD-L1真核表达载体,并对其生物学活性进行初步研究。方法以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)配体PD-L1的胞外段基因片段,定向连接于pcDNA3．1上构建真核表达载体pcDNA-PDL1；用脂质体将重组子导入NIT细胞,转染后的NIT命名为NITp。以Western blot鉴定重组蛋白的表达。MTT比色法检测NITp细胞培养上清对同种混合淋巴细胞培养反应的影响；用ELISA试剂盒检测NITp细胞培养上清对反应性T细胞分泌的细胞因子的影响。结果RT-PCR得到约730bp目的基因片段,测序结果显示该目的基因与Gen- Bank上的序列相符；Western blot分析提示NITp分泌性表达目的蛋白；NITp培养上清可抑制混合淋巴细胞增殖,其效应呈剂量依赖性；反应性T细胞分泌的细胞因子检测结果显示,培养上清中IL-4、IFN-γ、IL-2水平降低,与正常对照组差异有统计学意义。结论成功构建PD-L1基因真核表达载体pcDNA-PDL1,PD-L1蛋白对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用,并可在一定程度上抑制特异性T细胞的活化。
- 胡萍季煜华李君武林绍强韦静李小兰黄泽棋
- 关键词：PD-L1混合淋巴细胞培养1型糖尿病
- 肾综合征出血热病毒对人血管内皮细胞感染性的研究被引量：8
- 2003年
- 目的 研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法 采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测HFRS病毒感染上清液中TNF -α、IL - 6和IFN - β的含量。 结果 病毒感染后 1d即可在培养上清中用微量免疫酶斑法测出病毒 ,病毒滴度 5d达高峰 ,以后下降。在一定范围内病毒产量随病毒感染复数 (multiplicityofinfection ,M0I)的增加而增高。间接免疫荧光法证明感染的HEC胞浆及胞膜上携带肾综合征出血热病毒抗原。电镜和光镜下 ,感染细胞未见明显的形态和结构改变。病毒对HEC产生TNF -α无影响 ;产生IL - 6和IFN - β明显增高。 结论 HFRS病毒可在原始靶细胞HEC内增殖。HFRS病毒感染后所出现的微血管损害可能不是病毒直接损害所致 ,而很可能与间接因素有关。
- 江振友温筱芸林晨韦静
- 关键词：肾综合征出血热病毒
- HCVcore真核表达质粒pcDNA3.1(-)/core的构建被引量：1
- 2005年
- 目的构建HCVcore基因真核表达质粒,为进一步研究和解析HCV诱发人不死化肝细胞癌化的机制,HCV感染的检测及疫苗和药物研发做好前期基础。方法将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1 -3011质粒于大肠杆菌JM109内扩增;提取pBRTM/HCV1-3011质粒;从pBRTM/HCV1-3011质粒中PCR扩增出HCVcore片段并将其插入pGEM-T克隆载体;再与表达载体pcDNA3. 1( -)重组,以得到重组的真核表达载体pcDNA3. 1 ( -) /core;最后限制性酶切鉴定HCVcore表达载体。结果从pBRTM/HCV1-3011质粒中扩增出的HCVcore片段大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;凝胶电泳结果证明已将此片段克隆到pcDNA3. 1 /core内。结论 成功的构建了HCVcore基因的真核表达载体pcDNA3. 1( -) /core。
- 李君武江静王志鹏许小亮林绍强黄泽棋韦静李小兰
- 关键词：HCV基因非结构蛋白
- 癫痫患者血清可溶性白细胞介素2受体水平改变的初步观察
- 1995年
- 应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了７０例癫痫（ＥＰ）患者的血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，与正常对照组比较，发现ＥＰ患者ｓＩＬ－２Ｒ水平显著增高（Ｐ＜０．０１），揭示ＥＰ患者免疫功能处于抑制状态，不同发作类型，病史长短以及服用抗ＥＰ药物与否均没有显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示ＥＰ患者免疫功能的低下可能存在某些内在因素，而不是受临床表现和抗ＥＰ药物的影响。
- 李君武韦静赖祥青李鸿智
- 关键词：癫痫受体免疫调节免疫学SIL-2R
- 全文增补中
- FADDDEL-GFP基因修饰在小鼠胰岛细胞移植中的作用
- 2009年
- 目的探讨融合蛋白FADDDEL-GFP在胰岛细胞移植治疗1型糖尿病中的作用。方法将重组子FADDDEL-GFP导入胰岛细胞NIT-1,检测基因转染前后胰岛细胞分泌胰岛素的水平。用STZ诱导1型糖尿病模型小鼠,将FADDDEL-GFP修饰的NIT-fg细胞移植于糖尿病小鼠,检测胰岛细胞移植后对糖尿病小鼠的影响。结果转染重组子FADDDEL-GFP的NIT-1可见绿色荧光蛋白表达;移植NIT-fg细胞的糖尿病小鼠血糖降至正常,生存期延长,与对照组有明显差异。结论FADDDEL-GFP可增强机体抗同种移植排斥反应的能力。
- 胡萍吴砂李小兰韦静
- 关键词：FADD1型糖尿病转染
- 丙型肝炎病毒核心蛋白在QSG7701细胞中的表达和鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的:进行丙型病毒肝炎核心蛋白真核表达载体的构建,并在人源肝细胞QSG7701中进行表达与鉴定。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中扩增出HCV核心(core)基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701,用免疫组织化学SP法检测丙型肝炎病毒核心蛋白的表达,再通过Westernblot印迹法进行鉴定。结果:所克隆的core片段大小正确,序列正确;成功的构建了pcDNA3.1(-)/core重组表达质粒,瞬时转染QSG7701细胞,用SP免疫组化检测到了核心蛋白的表达,Westernblot印迹法显示其分子量约为21000。结论:丙型病毒肝炎核心蛋白的真核表达载体pcDNA3.1(-)/core在人肝细胞中能有效表达HCV核心蛋白,从而为进一步研究和解析核心蛋白在肝细胞癌变机制中的所起的作用提供了良好的核心蛋白表达系统,同时也为开发丙型肝炎DNA疫苗提供了前期条件。
- 李君武许小亮江静王志鹏林绍强黄泽棋韦静李小兰
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白真核表达
