陶永辉
- 作品数:47 被引量:182H指数:9
- 供职机构:江南大学附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金江苏省医学领军人才基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 鉴定蛋白质用飞行时间质谱仪激光器的降温装置
- 本实用新型公开了一种鉴定蛋白质用飞行时间质谱仪激光器的降温装置,水泵将水通过连接管输送至冷却器进行冷却,激光器的外表包裹有一圈冷却腔,冷却器通过水管与冷却腔上部的进水口连接,冷却腔的下部设有出水口,出水口通过连接管与四通...
- 黄玉政陶永辉
- 文献传递
- 血吸虫对吡喹酮抗药性的研究ⅩⅢ日本血吸虫吡喹酮抗药性的实验诱导被引量:27
- 2011年
- 目的实验研究在吡喹酮药物压力下中国大陆日本血吸虫对吡喹酮产生抗药性的可能性。方法取采自湖南省血吸虫病流行区湖滩现场和江苏省实验室传代的感染性钉螺实验室逸蚴,获得日本血吸虫尾蚴感染小鼠,从感染鼠肝脏分离成熟虫卵孵化毛蚴感染湖北钉螺,建立现场采集株和实验室传代株日本血吸虫小鼠钉螺实验室生活史循环。用定量尾蚴(40条/鼠)感染小鼠,感染35d后将小鼠随机分为对照组和抗性诱导组:对照组小鼠感染后45d解剖收集肠系膜静脉和肝门脉静活虫体,计算虫负荷(条/鼠);抗性诱导组小鼠采用灌胃法一次口服亚治疗剂量吡喹酮进行治疗,服药22d后解剖收集肠系膜静脉和肝门脉静存活虫体。计算虫负荷(条/鼠)和减虫率,完成首轮诱导。取抗性诱导组小鼠肝脏,分离虫卵,实验室孵化出毛蚴重新感染钉螺,感染后的钉螺经25℃生化培养箱内饲养60~70d后,分离感染性钉螺并逸蚴,用成熟尾蚴感染小鼠,开始新一轮循环诱导。首轮诱导吡喹酮口服剂量为100mg/kg,后每循环2~3轮增加100mg/kg口服剂量。取完成8轮诱导后和未经诱导原代虫株的尾蚴感染小鼠,感染35d后分别采用300mg/kg和600mg/kg吡喹酮一次性灌胃治疗感染小鼠,服药后14d解剖感染鼠,收集活虫,计算各虫株减虫率,评价虫株经8轮诱导后对吡喹酮敏感性的变化。结果在实验室内建立了江苏实验室传代株和湖南现场采集株2个虫株,并对其实施了8轮诱导。江苏实验室传代株在小鼠体内经第1轮口服100mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为22.3%,第8轮口服300mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为53.7%,减虫率随口服吡喹酮剂量增加而增加;湖南现场采集株在小鼠体内经第1轮口服100mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为66.8%,第8轮口服300mg/kg吡喹酮治疗后减虫率仅为20.6%,减虫率随口服吡喹酮剂量增加而显著降低。未经吡喹酮诱导的江苏实
- 梁幼生李洪军戴建荣汪伟曲国立陶永辉邢云天李幼子钱科魏剑英
- 关键词:日本血吸虫吡喹酮抗药性
- 血吸虫对吡喹酮抗药性的研究XIV日本血吸虫吡喹酮抗性株和敏感株成虫毛蚴和尾蚴对吡喹酮敏感性比较被引量:11
- 2011年
- 目的测定实验室诱导筛选获得的日本血吸虫吡喹酮抗性株成虫、毛蚴和尾蚴对吡喹酮的敏感性变化,为建立吡喹酮敏感性检测/监测技术提供依据。方法以未暴露于吡喹酮的日本血吸虫江苏实验室传代株和现场采集并经实验室传代的湖南株作为吡喹酮敏感株,以实验室传代并经吡喹酮抗性诱导的日本血吸虫江苏抗性诱导株及现场采集并经实验室吡喹酮抗性诱导的湖南抗性诱导株作为吡喹酮抗性株。分别收集各虫株尾蚴感染小鼠,感染35d后分为6组,5个服药组分别一次性灌服剂量为37.5、75、150、300mg/kg和600mg/kg吡喹酮,对照组不给药;用药后14d解剖小鼠,收集小鼠体内成虫,计算虫负荷和减虫率,计算吡喹酮对各虫株的半数有效剂量(ED50值)。取一定量各虫株尾蚴分别暴露于10-5、5×10-6、10-6、5×10-7mol/L和10-7mol/L吡喹酮溶液中,20、40、60、80min和100min后,在解剖镜下观察尾蚴的断尾变化,计算各虫株尾蚴断尾率。取一定量各虫株毛蚴分别暴露于10-5、5×10-6、10-6、5×10-7mol/L和10-7mol/L吡喹酮溶液中,1、3min和5min后,解剖镜下观察毛蚴的形态变化,计算各虫株毛蚴变形率。结果吡喹酮对江苏吡喹酮敏感株和抗性诱导株的ED50值分别为147.7mg/kg和565.5mg/kg,对湖南吡喹酮敏感株和抗性诱导株的ED50值分别为151.8mg/kg和467.2mg/kg。当暴露于10-5mol/L吡喹酮溶液中20min,江苏吡喹酮敏感株尾蚴断尾率为68.8%,吡喹酮抗性诱导株尾蚴断尾率为38.2%,差异有统计学意义(P<0.01);当暴露于10-7mol/L吡喹酮溶液中100min,江苏吡喹酮敏感株尾蚴断尾率为15.9%,吡喹酮抗性诱导株尾蚴断尾率为6.7%,差异有统计学意义(P<0.01)。当暴露于10-5mol/L吡喹酮溶液中20min,湖南吡喹酮敏感株尾蚴断尾率为59.4%,吡喹酮抗性诱导株尾蚴断尾率为54.6%,差异有统计学意义(P<0.05);当暴露于5×10-7mol/L吡喹酮溶液中40min,湖南吡喹酮敏感株尾蚴�
- 李洪军梁幼生戴建荣汪伟曲国立李幼子邢云天陶永辉钱科贾悦杨振坤魏剑英
- 关键词:日本血吸虫吡喹酮抗药性成虫毛蚴尾蚴
- 一种红芸豆防御素及其抗菌抗肿瘤活性及其应用
- 本发明公开了一种红芸豆防御素及其抗菌抗肿瘤活性及其应用,属于分子生物学技术领域。本发明从红芸豆中鉴定得到了一个全新的防御素D1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,防御素D1可以用于抑制表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜...
- 刘劝白瑞珍华东陶永辉
- 双氢青蒿素抗日本血吸虫作用的体内实验观察被引量:11
- 2009年
- 目的观察不同发育阶段日本血吸虫对双氢青蒿素的敏感性,探索双氢青蒿素抗日本血吸虫的效果。方法采用尾蚴腹部贴片法感染小鼠,每鼠感染日本血吸虫尾蚴40条;在血吸虫不同发育阶段灌服用药,于感染后50 d解剖小鼠,收集成虫,计算减虫率和减雌率。①在小鼠感染后2 h,3、5、7、10、14、18、21、28 d和35 d灌服双氢青蒿素(300 mg/kg),观察双氢青蒿素对不同发育阶段血吸虫的作用效果。②以不同剂量双氢青蒿素分别给感染后7 d或35 d的小鼠用药,观察双氢青蒿素抗日本血吸虫作用的量-效关系。③以不同药物剂量分别在感染后第7天和第35天给药(共2次),观察双氢青蒿素对日本血吸虫的作用效果。结果300 mg/kg双氢青蒿素一次灌服用药对7 d龄童虫和35 d龄成虫有明显杀灭作用,减虫率分别为64.81%和60.47%,减雌率分别为73.81%和90.48%。以200、300、400 mg/kg和600 mg/kg双氢青蒿素治疗感染后7 d小鼠,减虫率分别为46.84%、60.63%、59.55%和60.21%,减雌率分别为59.73%、72.29%、72.58%和76.61%;治疗感染后35 d小鼠,减虫率分别为47.23%、62.33%、76.31%和83.63%,减雌率分别为59.73%、89.36%、89.65%和93.96%;在感染后第7天和第35天共治疗2次,减虫率分别为58.16%、82.66%、83.42%和83.79%,减雌率分别为68.69%、90.43%、93.74%和94.63%。结论双氢青蒿素具有一定的抗日本血吸虫作用,对7 d童虫和35 d成虫较为敏感。
- 李洪军梁幼生戴建荣陶永辉曲国立汪伟魏剑英
- 关键词:日本血吸虫双氢青蒿素
- 人乳铁蛋白对卵巢上皮性癌细胞增殖及细胞免疫调节的作用被引量:2
- 2012年
- 利用天然或合成的化合物对恶性肿瘤的发生、发展进行干预是近年来的研究热点。人乳铁蛋白(human lactoferrin,hLF)是一种相对分子质量为76000的糖蛋白,存在于多种体液或分泌物中,以人乳汁特别是初乳中含量最高,具有抗肿瘤、抗细菌、抗病毒等多种生理功能。
- 仇志琴陶永辉黄玉政张英成勇
- 关键词:人乳铁蛋白细胞免疫调节癌细胞增殖卵巢上皮性相对分子质量生理功能
- 多肽富集方法比较及应用于日本血吸虫感染早期诊断的研究被引量:4
- 2014年
- 目的筛选较好的血清多肽富集方法与最优诊断模型,为开发替代性血清蛋白富集试剂盒奠定基础。方法建立日本血吸虫急性感染小鼠模型,利用分别包被有C3、C8、弱阳离子、螯合铜离子的磁珠富集纯化血清多肽,在m/z0.8-1.6ku区段应用基质辅助激光解吸电离时间飞行质谱(MALDI-TOF-MS)考察多肽峰数量与质量,结合ClinProTool建立诊断模型,盲测考察不同模型的检测效果。结果在m/z 0.8-16ku范围的多肽指纹图谱中,弱阳离子富集肽数量最多,组内均值为208个,螯合铜离子的多肽峰信噪比最佳达460.02,均显著高于C3与C8组(P〈0.05);在实验条件下盲测,螯合铜离子富集的多肽峰应用于ClinProTool建立的诊断模型检测日本血吸虫感染的敏感性与准确率最高。结论 ClinProTool诊断准确性与多肽峰信噪比正相关;具有疏水作用的弱阳离子与螯合铜离子更易富集血清多肽,且血清肽谱峰质量较好,可为开发相应试剂提供参考。
- 黄玉政熊春蓉张英许永良姚韵怡陶永辉徐明陶建平
- 关键词:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 慢性弓形虫感染大鼠海马蛋白质组的研究被引量:2
- 2013年
- 目的观察慢性弓形虫感染大鼠海马组织的蛋白质组的表达与变化。方法将6只雄性SD大鼠随机分成健康对照组和弓形虫感染组,每组3只。感染组每鼠腹腔注射4×107个弓形虫RH株速殖子,对照组注射等量生理盐水,于感染后第5天,尾静脉采血,吉氏染色验证大鼠感染情况。感染10周后,分离大鼠海马组织,抽提蛋白,并采用双向凝胶电泳分离,考马斯亮蓝染色后用PDQuest1.0软件进行图像分析,从胶中选取分离蛋白质点,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF),采用Mascot软件检索SwissProt数据库鉴定蛋白质。结果血涂片结果证实,感染组大鼠均感染成功。感染组和对照组大鼠海马组织经双向凝胶电泳分离后,分别检出蛋白斑点数(311±19)个和(327±13)个,对2张电泳图进行匹配后发现有16个蛋白斑点在2组大鼠海马组织中的含量有明显变化,其中5个蛋白斑点在感染组大鼠海马蛋白双向电泳图谱中消失,11个蛋白斑点在2组大鼠海马组织中含量发生了3倍以上的变化,其中感染组上调4个,下调7个。有差异表达的16个蛋白斑点经质谱鉴定和数据库检索,发现9个蛋白,分别为磷酸激酶1、类烯醇化酶、谷氨酰合成酶、肌酸激酶、B型肌酸激酶、ATP合酶、线粒体顺乌头酸酶、肌动蛋白和未命名蛋白,前3个蛋白在感染组上调,其余6个下调。结论共获得9个慢性弓形虫感染大鼠与健康大鼠海马组织差异表达蛋白。
- 周永华范红结范红结张英张英黄玉政黄玉政
- 关键词:刚地弓形虫海马蛋白质组
- 蛋白质组学技术及其在血吸虫研究中的应用
- 2009年
- 本文就蛋白质组学研究的核心技术,即蛋白质分离、鉴定、蛋白质生物信息学,及其在血吸虫研究中的现状和应用作一综述。
- 曲国立陶永辉梁幼生
- 关键词:血吸虫蛋白质组学二维电泳生物质谱生物信息学
- 人乳腺癌细胞MCF-7紫杉醇耐药株的建立及其生物学特性研究被引量:23
- 2008年
- 目的建立紫杉醇(Taxol)的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法采用低浓度加量持续诱导法建立MCF-7/Taxol;细胞模型的多药耐药性以SRB法检测;流式细胞术分析细胞周期分布;免疫组化法检测细胞表型变化;高效液相鉴定细胞中药物蓄积;光镜和电子扫描显微镜观察细胞形态。结果SRB法检测,MCF-7/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代MCF-7细胞的525倍,撤药3mon后细胞的耐药指数保持在150倍以上,并对羟喜树碱、表柔比星、多柔比星、米托蒽醌、硫酸长春新碱、博来霉素和丝裂霉素等多种化疗药物产生交叉耐药性。MCF-7/Taxol细胞分化程度低于同步传代的MCF-7细胞,倍增时间明显高于亲本细胞,S期细胞明显增加,G1期细胞减少;随撤药时间的延长,细胞的增殖速度加快。MCF-7/Taxol细胞P-gp、LRP和GSTπ的表达水平较亲本细胞有明显增加,ER、PR阳性表达丢失;光镜下MCF-7/Taxol细胞明显变大并且形态不规则;电镜下其表面纤绒毛成小球状隆起和絮状突起;在稳定生长的耐药细胞和撤药培养的细胞中都有Taxol蓄积。结论该MCF-7/Taxol模型具有多药耐药细胞的基本生物学特性,可用于肿瘤多药耐药机制药的研究,推测耐药细胞株中含有天然MCF-7肿瘤干细胞。
- 张小平陶永辉陈其亮张莲芬张熔熔金坚
- 关键词:人乳腺癌细胞紫杉醇乳腺癌耐药细胞株免疫组化法检测耐药株TAXOL