陈筑
- 作品数：38 被引量：72H指数：6
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵阳市科学技术计划项目贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学经济管理更多>>
- 丹皮酚对牙龈卟啉单胞菌诱导骨髓来源巨噬细胞功能的影响被引量：4
- 2017年
- 目的观察丹皮酚对牙龈卟啉单胞菌作用下对体外培养的小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)炎性因子分泌及向破骨细胞分化能力的影响,并探讨其作用机制。方法体外分离获得小鼠生长良好的BMM,加入不同浓度丹皮酚溶液处理1 h,再加入牙龈卟啉单胞菌进行24 h诱导刺激。采用流式细胞术检测炎症相关蛋白程序性死亡分子配体1(PD-L1)的表达量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)水平;在核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激后的BMM中加入不同浓度的丹皮酚溶液处理1 h后,加入牙龈卟啉单胞菌刺激,采用抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞形成情况,Western blot检测破骨细胞形成相关蛋白TRAP和核因子κB受体活化因子(RANK)的表达。结果丹皮酚在10~50μmol·L-1的范围内,对BMM无毒性作用。流式细胞术结果提示丹皮酚可以抑制牙龈卟啉单胞菌诱导PD-L1的表达,并存在剂量依赖效应。ELISA实验证明丹皮酚能以剂量依赖性方式抑制BMM释放TNF-α、IL-1β及IL-6(P<0.01)。牙龈卟啉单胞菌可以明显诱导BMM分化形成破骨细胞;TRAP染色显示丹皮酚各浓度组能抑制BMM向破骨细胞分化;Western blot结果显示丹皮酚抑制TRAP和RANK表达且存在剂量依赖效应。结论丹皮酚可以剂量依赖方式抑制牙龈卟啉单胞菌诱导的BMM炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6的分泌及其向破骨细胞分化的能力。
- 陈筑宿凌恺
- 关键词：丹皮酚牙龈卟啉单胞菌破骨细胞炎症分化
- 转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测被引量：7
- 2013年
- 目的:采用SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法:用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果:含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论:构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。
- 白国辉刘建国田源陈筑白朋元韩琪顾瑜管晓燕王海慧
- 关键词：转基因番茄SYBR拷贝数CT值
- 贵州省高校羽毛球课实施“领会教学法”的现状研究
- 2011年
- “领会教学法”是1982年由英国洛夫堡大学的两位教授一宾嘉和霍普（Tunker＆Thrope）首先倡导在球类教学中使用，它主要强调学生理解掌握球类运动规律及相应技巧和战术，促进学生形成举一反三，灵活应用的能力以及激发学生学习的积极性、主动性和创造性，并通过参加自由比赛，
- 陈筑刘承亮
- 关键词：高校羽毛球领会教学法
- 变链菌葡糖基转移酶植物表达质粒p2355-gtfB、p2365-gtfB转化烟草研究被引量：2
- 2009年
- 目的获得含变形链球菌葡糖基转移酶编码基因gtfB的转基因烟草植株。方法将携带变形链球菌葡糖基转移酶编码基因gtfB的植物表达载体p2355-gtfB、p2365-gtfB采用叶盘法经根癌农杆菌介导转化烟草,从而获得抗性烟草植株,并通过GUS染色、npt-Ⅱ基因和部分目的基因片段的PCR扩增对转基因烟草植株进行检测。结果抗性苗经GUS组织染色呈阳性,PCR扩增检测npt-Ⅱ基因及部分目的基因,表明获得了转基因烟草植株。结论目的基因已成功导入烟草基因组中,且具有快速鉴定转化株的优点。
- 唐琳陈筑刘建国马欣荣张燕
- 关键词：变形链球菌葡糖基转移酶植物疫苗转基因烟草
- 岗上肌的构筑学研究被引量：4
- 1998年
- 岗上肌的构筑学研究贵州省遵义医学院体工部（５６３００３）彭文杰，张潜，陈筑遵义医学院解剖教研室１材料与方法取成年男性尸体５具，从起止点完整取下岗上肌，共１０例，清理其表面的脂肪和结缔组织，测量下列各项指数：１．肌重（ｍｕｓｃｌｅｗｅｉｇｈｔ，ＭＷ）。...
- 彭文杰张潜陈筑
- 关键词：冈上肌构筑学解剖学
- 转基因生菜叶片转化体系的优化
- 目的:优化生菜的基因转化系统,为下一步转化变形链球菌植物表达质粒提供实验基础。方法:以6种不同的生菜种子为试材,以1／2MS为基础培养基,通过比较出芽率、最佳苗龄和直接分化培养基的确定以及抗生素敏感性测试,获得正常再生抗...
- 杨德琴刘建国陈筑张燕马欣荣吴家媛张剑关薇薇
- 关键词：生菜叶片植株再生
- 变异链球菌葡糖基转移酶植物表达质粒p2355-gtfB的构建
- 2012年
- 目的构建含变异链球菌葡糖基转移酶多个免疫显性抗原表位的植物表达质粒p2355-gtfB,为其转化植物研究奠定物质基础,为可食防龋疫苗研究提供条件。方法以真核表达质粒pcDNA3-gtfB为模板,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增含编码变异链球菌葡糖基转移酶抗原表位的目的基因gtfB。将回收纯化的PCR产物经T-A克隆技术克隆于中间载体pMD18-T,双酶切鉴定插入方向后,将目的基因从中间载体释放,再克隆至高效的植物表达载体p2355,用电转化法转化根癌农杆菌EHA105,对重组质粒阳性克隆株进行筛选与鉴定。结果通过对重组质粒T-gtfB进行酶切图谱分析,获得2.9 kb和3.7 kb的2个片断,将重组质粒p2355-gtfB进行酶切、PCR及测序分析,显示p2355-gtfB中插入基因长度为3 675 bp,基因序列与双脱氧链终止法的测定结果相同,证明植物表达质粒p2355-gtfB构建成功,开放阅读框架正确。结论本研究成功构建了含变异链球菌多个葡糖基转移酶免疫显性抗原表位编码基因的植物表达质粒p2355-gtfB,为可食性防龋疫苗的研究奠定了基础。
- 陈筑刘建国马欣荣张燕唐琳吴家媛张剑
- 关键词：防龋疫苗变异链球菌质粒质粒
- 转基因防龋生菜叶片转化体系的优化被引量：9
- 2012年
- 目的:优化生菜的基因转化系统,为下一步防龋用转基因植物表达载体质粒转化生菜工作提供实验基础。方法:以6种不同的生菜种子为试材,以1/2 MS为基础培养基,经对出芽率比较,苗龄及直接分化培养基的确定以及抗生素敏感性测试,获得正常再生抗性生菜植株。结果:3～4 d的"意大利"生菜子叶在1/2 MS+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA培养基上直接分化率最高,生根培养基为1/2 MS,抗生素巴龙霉素(Paromomycin)选择压浓度为50 mg/L。结论:成功确立了防龋用转基因植物表达载体质粒的生菜叶片转化体系,获得了较高的转化频率。
- 陈筑刘建国张燕马欣荣吴家媛唐琳管晓燕顾瑜白国辉
- 关键词：生菜叶片植株再生龋病
- 转基因番茄可食防龋疫苗免疫大鼠的实验研究被引量：5
- 2015年
- 目的用表达变异链球菌表面蛋白PAcP和霍乱毒素B亚单位融合蛋白的转基因番茄免疫SD大鼠,检测其免疫原性,探索研制安全、有效的可食用防龋疫苗的可能性。方法选择雌性SD大鼠18只,建立龋齿模型,随机分成3组(n=6),分别为转基因番茄组(实验组)、变异链球菌灭活全菌免疫组(阳性对照组)、非转基因番茄组(阴性对照组),免疫方式为灌胃免疫,每周免疫1次,连续免疫4周。分别于首次免疫前1d和每次免疫1周后采集血液、唾液样品,用酶联免疫吸附实验法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、唾液中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体水平;鼠龄70d时处死动物,并取上下颌骨进行龋齿计分。结果免疫后,实验组和阳性对照组大鼠血清中IgG、唾液中SIgA抗体水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组和阴性对照组在Dx级外的各级差异有统计学意义(P<0.05)。结论转基因番茄防龋疫苗具有免疫原性,能够诱导实验动物产生有效的免疫应答,降低龋齿的发生。
- 顾瑜刘建国白国辉吴家媛管晓燕陈筑白朋元赵靖
- 关键词：番茄免疫疗法龋齿
- 磷酸化cAMP反应元件结合蛋白对发育期人牙乳头细胞增殖和分化的影响被引量：1
- 2017年
- 目的构建CBP抑制表达慢病毒载体,探讨CBP有效表达沉默后对体外培养人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)的增殖及分化影响。方法利用基因重组技术构建重组慢病毒建立牙乳头细胞沉默稳转细胞,采用CCK-8检测细胞增殖的变化,采用检测分化相关蛋白的表达评价CBP对HDPC分化能力的影响。结果测序结果提示成功构建四组人CBP基因的重组慢病毒;转染HDPC后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法筛选获得有效靶点的重组慢病毒;CCK-8检测结果表明HDPC在CBP表达下调后增殖活性受到抑制;慢病毒介导CBP沉默后影响了HDPCs相关分化蛋白ColI、OCN、OPN的表达,较对照组显著下调(P<0.05);牙乳头细胞的ALP活性在转染重组慢病毒后5,7,14d后显著降低(P<0.05);结论成功构建了高效CBP抑制表达载体,CBP沉默可抑制HDPCs的增殖和分化。
- 陈筑李明云
- 关键词：牙发育CBP重组慢病毒人牙乳头细胞生物学作用
