方静 作品数:36 被引量:175 H指数:8 供职机构: 西安交通大学医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 陕西省科学技术研究发展计划项目 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
siRNA沉默EZH2基因对人宫颈癌细胞侵袭转移的影响 被引量:2 2017年 目的探讨靶向沉默EZH2基因对宫颈癌细胞侵袭转移的影响及其分子机制。方法采用化学合成siRNA瞬时转染人宫颈癌C33A细胞,沉默EZH2基因的表达。通过细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验、软琼脂克隆形成实验,观察沉默EZH2对宫颈癌细胞迁移、侵袭及体外成瘤能力的影响,Western blot法检测MMP2的表达变化。结果 EZH2siRNA转染C33A细胞后,细胞划痕及Transwell小室侵袭实验结果均显示宫颈癌细胞的迁移、侵袭能力明显减低,差异具有统计学意义;软琼脂克隆形成实验表明,EZH2沉默后克隆形成数目明显减少,差异具有统计学意义;Western blot结果显示MMP2表达水平下调。结论沉默EZH2基因表达能显著抑制宫颈癌C33A细胞的侵袭转移能力,其作用机制可能通过下调MMP2来实现。 冀静 黄康榕 黄慧芳 王月玲 方静关键词:EZH2基因 宫颈癌 SIRNA 两种来源的树突状细胞体外培养及免疫学特征比较 被引量:3 2006年 目的对脐血(UCB)和外周血(PB)体外诱导培养成树突状细胞(DC),并进行免疫学特征的比较,探索更好的DC来源。方法UCB和正常成人PB各10例为UCB组和PB组,分离出单个核细胞后,分别加入粒细胞巨细胞集落刺激因子(GM-CSF),白介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)培养基中,培养12d,每天用光镜观察细胞形态,于第3、6d和10d,用流式细胞仪进行CD11c、CD80、CD86及HLA-DR表型分析,于第10d透射电镜和扫描电镜观察细胞形态,并在第12d与淋巴细胞混合培养,对比两种源性DC激发淋巴细胞增殖能力。结果两者均诱导出具有典型形态的DC,UCB组诱导的DC细胞数量明显多于外周血诱导的细胞数(P<0.01)。激发淋巴细胞增殖能力,两者无区别(P>0.05)。结论UCB和PB中的MNs均可在体外诱导为成熟DC,UCB诱导的DC细胞数高于PB,两者激发淋巴细胞增殖能力相同,故UCB有可能成为免疫治疗DC的丰富来源。 李奇灵 卜宁 李亚玲 于月成 方静 辛晓燕关键词:脐血 外周血 树突状细胞 表面抗原 汉防己甲素对人绒毛膜癌BeWo细胞凋亡和细胞周期的影响 被引量:2 2017年 目的:探讨汉防己甲素对人绒毛膜癌BeWo细胞株凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的汉防己甲素处理人绒毛膜癌BeWo细胞株24h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化;Western blot检测p53和p21蛋白的表达。结果:汉防己甲素处理后,BeWo细胞株凋亡细胞的比例明显增高(P<0.01),细胞周期G0/G1期细胞增加(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01),p53和p21蛋白表达水平均升高(P<0.01)。结论:汉防己甲素可以对绒毛膜癌BeWo细胞株发挥诱导凋亡及细胞周期阻滞的作用,有望成为绒毛膜癌化疗方案的辅助治疗药物。 方静 冀静 安瑞芳关键词:绒毛膜癌 细胞凋亡 细胞周期 首发未治疗精神分裂症患者的尾状核脑熵与PANSS阳性症状的相关性 被引量:7 2020年 目的探讨首发未治疗的精神分裂症患者静息态脑熵功能的异常模式,探索临床症状的潜在神经机制。方法本地招募49例(男性26例,女性23例)首发未治疗的精神分裂症患者为被试组及人口学相匹配的38例为健康对照组(男性21例,女性17例),经阳性和阴性综合征量表(PANSS)评估后使用GE Signa HDxt扫描仪采集静息态fMRI和T13D结构数据。MRI数据经dpabi预处理后计算各被试静息态全脑脑熵,并使用两样本t检验进行组间对比(P<0.05,GRF校正)。对被试组患者,提取差异区脑熵信号与PANSS阳性和阴性指标进行spearman偏相关分析(P<0.05为显著性),以年龄、教育程度为控制变量。结果相比对照组,被试组在右侧楔前叶脑熵显著增强、右侧尾状核脑熵显著降低(P<0.05,GRF校正);被试组右侧尾状核脑熵值与PANSS阳性症状总分存在显著的正相关(P=0.014,rho=0.36)。结论楔前叶与其它脑区的同步性受损影响其调控复杂和高度整合任务是精神分裂症的发病机制,而尾状核在病症中可能具有功能可塑性和代偿性,是潜在的治疗和缓解精神分裂症状的靶点。 李颖 激扬 王雪莉 方静关键词:精神分裂症 阳性和阴性症状量表 沉默EZH2基因表达对宫颈癌细胞增殖能力影响的分析 被引量:2 2017年 本实验旨在探讨EZH2基因在宫颈癌中表达情况、对宫颈癌细胞增殖能力的影响及其机制。通过免疫组织化学法检测20例正常宫颈、20例CIN及60例宫颈鳞癌组织中EZH2蛋白表达;采用RT-PCR法检测4个宫颈癌细胞株中EZH2 m RNA的表达。通过Lipofectamin2000介导EZH2 si RNA瞬时转染C33A细胞株,Western blotting法检测si RNA的干扰效率。MTT、流式细胞仪检测EZH2沉默后细胞增殖及细胞周期变化;Western blotting检测p21表达变化。结果显示,正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中EZH2阳性表达率分别为15%、30%、76.7%,呈逐级升高趋势,后者与前两者见差异有统计学意义(p<0.01);EZH2的表达同宫颈鳞癌细胞分化程度、间质浸润深度及淋巴结转移显著相关(p<0.05)。EZH2 m RNA在宫颈癌细胞株He La、Si Ha、C33A及Caski中均表达,其中C33A细胞中表达最高。si RNA沉默EZH2基因明显抑制宫颈癌C33A细胞增殖,阻滞细胞周期于G1期;Western blotting检测p21表达上调。由此得出结论,EZH2基因在宫颈癌中高表达;沉默EZH2基因可通过上调p21蛋白的表达阻滞细胞周期于G1期、抑制宫颈癌细胞的增殖。 冀静 李琛 黄慧芳 裴美丽 方静关键词:EZH2基因 宫颈癌 SIRNA 细胞周期 性传播病原体隐性感染与高危型HPV及宫颈病变的相关性 被引量:14 2020年 目的探究引起下生殖道隐性感染的性传播病原体与高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,hrHPV)共感染及与不同级别宫颈病变之间的相关性。方法选择2017年7月至2018年7月在西安交通大学第一附属医院行宫颈采样的妇女,细胞标本检测hrHPV阳性的320例为阳性组,hrHPV阴性的160例为阴性组,使用凯普公司核酸检测PCR试剂盒检测性传播病原体,包括解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)第一生物群(U.parvum,Uup1、3、6、14)与第二生物群(U.urealyticum,Uuu)、人型支原体(Mycoplasma hominis,MH)、生殖支原体(Mycoplasma genitalium,MG)和沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)与hrHPV。根据宫颈病变的级别分为Normal(包括正常/宫颈炎)、LSIL(低级别鳞状上皮内病变)、HSIL(高级别鳞状上皮内病变)、ICC(宫颈浸润癌)亚组。卡方检验、Logistic回归分析相关性。结果两组中隐性感染率分别达62.5%vs.59.4%,两组间总体感染率差异无统计学意义。支原体属中,UU感染率最高,Uup14、MH感染与hrHPV有统计学相关性(P=0.003、P=0.005),但Uup14、MH与中国女性最常见的hrHPV基因型或混合型感染相关性均无统计学意义。阳性组中,Normal+LSIL组患者与HSIL+ICC组患者Uup14感染率差异有统计学意义(OR:12.579,95%CI:3.638~43.497,P<0.001)。阴性组中Normal+LSIL组中Uuu、Uup1感染率明显低于HSIL+ICC组,差异有统计学意义(OR:11.646,95%CI:1.493~90.850,P=0.019;OR:7.474,95%CI:1.140~49.015,P=0.036)。结论女性下生殖道性传播病原体隐性感染普遍流行。Uup14感染明显增加了hrHPV阳性者HSIL及ICC风险;Uuu及Uup1感染增加了hrHPV阴性的HSIL及ICC风险。 汪蕾 蔡惠 杨霞 黄慧芳 方静关键词:高危型人乳头瘤病毒 下生殖道 性传播感染 鳞状上皮内病变 一种妇科刮宫器 一种妇科刮宫器,属于医疗器械领域,包括操作杆、刮勺和手柄;其特征在于:还包括定位装置;定位装置设置于操作杆上;定位装置包括定位套环和定位旋钮;定位套环套接于操作杆上,套环的内壁与操作杆的外表面相贴;定位套环的环体上设置一... 方静 李颖 华静 朱广侠文献传递 卵巢癌患者exosomes来源初探 被引量:1 2007年 目的:同一晚期卵巢癌患者,对组织来源和腹水来源的exosomes进行方法和数量的比较,探讨获得卵巢癌患者exosomes的最佳途径.方法:收集晚期卵巢癌患者卵巢癌组织,分离癌细胞进行培养,留上清液,取同一患者的腹水,通过超速离心和超滤等方法提取上清液及腹水中的exosomes,电镜下检测;Western Blot测定exosomes上HSP70,HSP90,MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子的表达;用BCA蛋白测定法测定exosomes的蛋白浓度,计算蛋白总含量.结果:腹水离心时间比上清液离心时间长,所有细胞培养上清液和癌细胞阳性的腹水均能分离出exosomes,癌细胞阴性的腹水中未分离出exosomes;两种来源的exosomes共同表达MHCⅠ类分子、HSP70和HSP90,均不表达MHCⅡ类分子,腹水中分离出来的exosomes蛋白含量比细胞培养上清液的含量高(P<0.05).结论:腹水中癌细胞阳性的患者,腹水是exosomes的比较理想的来源;无腹水或腹水中癌细胞阴性的患者,exosomes可来源于卵巢癌组织. 李奇灵 孙阳珍 于月成 方静 张媛丽 辛晓燕关键词:EXOSOMES 腹水 卵巢肿瘤 细胞培养技术 妊娠期腹腔镜手术 被引量:6 2003年 腹腔镜手术技术在妊娠期应用越来越广泛。迄今,关于妊娠期腹腔镜手术方面的资料还不足以就其安全性及确切并发症发生率得出结论。复习近年相关文献结果表明,虽然还需更多研究确定该技术确切的并发症发生率,但认为在妊娠期应用腹腔镜手术是安全的。 安瑞芳 方静 曹缵孙关键词:妊娠期腹腔镜手术 附件包块 胆囊切除术 阑尾切除术 并发症 粉防己碱对绒癌BeWo细胞增殖和凋亡的作用 被引量:1 2016年 目的探讨粉防己碱对人绒癌BeWo细胞株增殖和凋亡的作用。方法采用不同浓度的粉防己碱处理人绒癌BeWo细胞株,在不同的作用时间采用M TT和流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡的变化;Western blot检测PCNA和Survivin的表达。结果采用不同剂量的粉防己碱处理BeWo细胞不同的时间,细胞均表现出生长的抑制,且为剂量及时间依赖性(P<0.01)。0、5、10、20μg/m L粉防己碱作用24小时后,细胞凋亡的比例依次为3.52%±0.62%、8.32%±2.1%、13.45%±2.7%和27.38%±3.1%(F=41.616,P<0.01),PCNA蛋白表达分别为0.85±0.05、0.53±0.04、0.22±0.01和0.03±0.01(F=244.375,P<0.01),Survivin蛋白表达分别为1.06±0.01、0.98±0.06、0.52±0.03和0.39±0.03(F=529.4,P<0.01)。结论粉防己碱可以对绒癌细胞株BeWo产生时间及浓度依赖的生长抑制作用,诱导绒癌细胞株的凋亡,有可能成为GTT化疗方案的辅助治疗药物。 方静 薛艳 安瑞芳关键词:粉防己碱 绒癌 增殖 凋亡