朱蓉 作品数:14 被引量:45 H指数:4 供职机构: 中国食品药品检定研究院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较 被引量:11 2005年 通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫 苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代 NIH动物法。将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12~14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹 心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关 系图并计算出疫苗效力值E-NIH。结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M- NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2.41~5.85之间,而相应的M-NIH值在5.11~ 10.19之间。从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、 成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的。 朱蓉 徐葛林 孙文 秦莉 卢影关键词:ELISA 狂犬病疫苗 NIH 鸡抗CHO细胞蛋白IgY消长规律及其制备的试验研究 采用五种免疫程序分别免疫来亨鸡以制备抗体;ELISA检测不同免疫方案鸡抗体水平变化规律。结果不同免疫程序接种来亨鸡后抗体产生水平不同。末针免疫28天后,4针低剂量肌肉免疫组抗体水平显著低于4针高剂量肌肉免疫组(P<0.0... 杜洪桥 朱蓉 周辉 徐葛林 严家新关键词:IGY 卵黄抗体 文献传递 痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制 目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释2个稀释度,每个稀释度平行5孔,对... 黄维金 朱蓉 赵晨燕 李媛媛 万延民 刘强 王文波 温智恒 周艳 孟淑芳 王佑春关键词:重组痘苗病毒 标准品 文献传递 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的生物学鉴定及其小鼠体内中和活性测定 被引量:3 2005年 目的对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行生物学活性鉴定及小鼠体内中和活性检测。方法用免疫荧光法检测其结合感染狂犬病毒CVS的鼠脑组织的能力,用小鼠中和实验测定A12表达产物的体内中和活性。结果免疫荧光试验显示A12表达产物与感染CVS的鼠脑细胞有强的荧光反应。小鼠中和试验结果表明,A12ScFv样品组小鼠有9只存活,而对照组小鼠全部死亡。A12在729倍稀释时能100%保护小鼠抵抗致死量狂犬病毒的脑内攻击。结论A12对狂犬病毒具有一定的中和活性,有可能被用于暴露后狂犬病的预防。 闭兰 朱蓉 张爱华 孙可芳 赵亚杰 王志友 余模松关键词:单链抗体 两种亲和层析方法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的比较 被引量:8 2011年 目的比较两种亲和层析法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的效果。方法制备可溶性CHO细胞蛋白,免疫家兔,获得兔免疫血清,采用蛋白A亲和层析和抗原偶联亲和层析两种方法分别纯化兔抗CHO细胞蛋白抗体,ELISA测定抗体效价;SDS-PAGE分析抗体纯度;Western blot分析抗体的特异性。结果兔IgG经蛋白A亲和层析纯化后,ELISA效价约为1∶106,抗体纯度达81.3%;经抗原偶联亲和层析纯化后,ELISA效价可达1∶107,抗体纯度达80.6%。两种方法纯化的抗体特异性均较好。结论抗原偶联亲和层析法更适合纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体。 杜洪桥 朱蓉 徐葛林 严家新关键词:多克隆抗体 痘苗病毒弱毒株广9株对动物的致病力研究 被引量:6 2011年 目的了解经痘苗病毒天坛株(VTT)3次挑斑纯化筛选出的痘苗病毒减毒株广9株(VG9)的神经毒性和致病性。方法对痘苗病毒VG9和其亲代病毒VTT进行小鼠和乳鼠及家兔脑内毒力测定、裸鼠腹腔毒力测定及家兔皮内反应性实验,并观察实验动物的发病率和死亡率及皮肤坏死情况。结果两株病毒对小鼠和乳鼠的脑内毒力(icLD50)值显示,VTT株较VG9株分别强约100倍和18倍;对家兔脑内的毒力虽然icLD50值显示两株病毒相同,但VTT致家兔发病的数量较VG9多,其50%发病剂量较VG9多32倍。家兔皮内接种病毒后,较低病毒滴度(6.63 lg PFU)的VTT接种点出现严重的皮肤坏死,而VG9仅在较高滴度(7.54 lg PFU)接种点皮肤出现轻微坏死。结论通过不同途径接种几种实验动物均显示VG9的毒力较其母株VTT明显减弱。可以预测VG9痘苗在人体可能产生的不良反应较VTT痘苗低,并且有可能比VTT更适合作为痘苗病毒载体应用于新的重组疫苗(如HIV疫苗)的研发。 朱蓉 黄维金 严子林 温智恒 王文波 周艳 王佑春 俞永新关键词:痘苗病毒 毒力 痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制 目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国5个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度平行5孔... 黄维金 朱蓉 赵晨燕 李媛媛 万延民 齐影 刘强 王文波 温智恒 周艳 孟淑芳 王佑春 俞永新关键词:重组痘苗病毒 标准品 文献传递 痘苗病毒弱毒株广9株的免疫原性分析 目的了解痘苗病毒减毒株广9株(VG9)对BALB/c小鼠的免疫原性。方法痘苗病毒VG9和其亲代病毒天坛株(VTT)调整到同一病毒滴度后皮内途径接种小鼠一次,每周采血检测,持续4周。ELISA检测血清中抗痘苗病毒特异性抗体... 朱蓉 黄维金 王佑春 俞永新关键词:痘苗病毒 免疫原性 免疫血清 文献传递 利用活体成像术对痘苗病毒小鼠体内生物分布和表达的研究 被引量:3 2013年 目的研究复制型天坛株痘苗病毒(rTV)和非复制型天坛株痘苗病毒(NTV)不同途径感染小鼠后体内代谢和组织分布特点,为两种痘苗病毒载体疫苗的应用和改造提供参考。方法构建携带萤火虫荧光素酶基因的rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒,利用活体成像技术对两种病毒感染BALB/c小鼠后的蛋白表达水平和持续时间特点进行比较分析,并对rTV-Fluc多针感染中的抗病毒反应及其在BALB/c小鼠和裸鼠体内的分布和代谢特点进行比较。结果 rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒肌内和皮内途径感染BALB/c小鼠后局限分布于接种部位,且rTV-Fluc的表达水平显著性高于NTV-Fluc病毒(P=0.015);rTV-Fluc感染小鼠后诱导较高水平的中和抗体,并显著降低了肌内途径第2针感染后的蛋白表达水平(P<0.05);rTV-Fluc感染裸鼠后分布特点与BALB/c小鼠一致但表达周期明显延长(120d比10d)。结论两株痘苗病毒表现出局限的组织分布、较高的表达水平并诱导较强的免疫反应等特点,为预防性痘苗病毒载体疫苗的应用提供了参考数据。 刘强 齐香荣 朱蓉 黄维金 阮力 李保卫 邵荣光 王佑春关键词:痘苗病毒 活体成像 BALB C小鼠 应用细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒毒力 被引量:9 2006年 目的应用细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒毒力。方法将34批病毒样品采用小鼠法检测半数致死量LD50。同时,将病毒样品感染BSR细胞,检测病毒的荧光灶单位(FFU/ml)。结果用细胞法所得的logFFU值与对应的小鼠法所得LD50之间呈正相关性;分次测得同一狂犬病毒logFFU值在3.03—3.28之间,而log LD50值在2~3之间。结论细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒的毒力是可行的。 朱蓉 薛红刚 徐葛林关键词:LD50 FFU