公共文化服务平台

何巍: 作品数：16 被引量：23H指数：2; 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>; 发文基金：吉林省卫生厅医学科研基金国家自然科学基金吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>

合作作者

氢氧化铝佐剂配制工艺的优化被引量：7: 2010年; 目的优化氢氧化铝[A(lOH)3]佐剂配制工艺。方法对A(lOH)3配制工艺中的反应温度、氢氧化钠(NaOH)溶液的滴入速度、气体流量和反应终点pH值进行优化,观察配制的A(lOH)3溶液的状态。分别以原工艺和优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),比较二者的外观和效力。结果优化的A(lOH)3配制工艺为:反应温度70～72℃;NaOH溶液滴入速度185ml/min,10个点滴入;气体流量0.2bar;反应终点pH值5.80±0.05,以该工艺配制的A(lOH)3胶体颗粒大小均匀,呈淡淡的蓝白色,不发生沉淀。以优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)无沉淀,为均匀的胶体,成品放置3年外观无显著变化;疫苗效力略有提高,但不显著。结论优化了A(lOH)3溶液佐剂的配制工艺。; 李德娟何巍张睿付琳娜赵丽剑王宇金立杰; 关键词：氢氧化铝乙型肝炎疫苗佐剂

重组CHO细胞HBsAg纯化工艺的优化被引量：1: 2003年; 目的 :优化重组CHO细胞HBsAg纯化工艺。方法 :由乙肝病毒S基因转化的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞培养收液 ,经初步提纯、密度梯度离心、凝胶过滤层析可得到HBsAg纯品。结果 :通过凝胶过滤层析收取HBsAg活性峰 ,控制HBsAg活性峰的收量 ,并把HBsAg活性峰的下降段再收集起来重新层析 ,改进后可使HBsAg的总回收率达到 6 0 %以上 ,而且牛血清蛋白残余量达到 10ng ml以下 ,HBsAg纯度 97%以上。结论 :重组CHO细胞HBsAg纯化工艺改进后 ,使HBsAg在产量及质量上均有明显提高。; 李德娟陈万革赵丽剑江波赵睿王智宇谷丽娟何巍; 关键词：重组CHO细胞 HBSAG 纯化工艺凝胶过滤层析卵巢细胞乙肝疫苗

定点突变内皮抑素Zn^(2+)的结合位点及突变基因的克隆表达被引量：1: 2005年; 从人胚肝组织中提取总RNA,以逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)法获得人内皮抑素编码序列,采用定点突变技术将His2和His4双突变为Leu2和Val4.将突变基因cDNA插入含有T7启动子的质粒pET 28b中构建表达质粒pMendo,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选表达菌株BL21 Mute,表达菌株经IPTG诱导后以包涵体方式产生大量内皮抑素突变蛋白.SDS PAGE分析表明,表达的重组蛋白占菌株可溶性蛋白质的30%.复性、纯化的内皮抑素突变蛋白纯度达到98%,失去抑制人脐静脉内皮细胞增殖的活性.; 王群马军何巍王晖; 关键词：内皮抑素突变大肠杆菌

大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响被引量：4: 2014年; 目的探讨大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响,为临床应用大豆多肽治疗前列腺癌提供实验依据。方法用不同浓度的大豆多肽(5、10、15、20μmol/L)处理前列腺癌PC-3细胞不同时间(24、48、72 h),采用MTT法检测细胞的增殖活力,倒置显微镜观察细胞的形态,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期。结果大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,中晚期细胞凋亡趋势明显,且呈明显的剂量与时间依赖性;随着大豆多肽浓度的增加,前列腺癌PC-3细胞密度逐渐降低,边缘趋于圆滑,细胞间隙逐渐增大,局部可见部分已固缩的细胞及死亡的细胞碎片。结论大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡,在临床治疗前列腺癌方面具有广阔的应用前景。; 胡克邦张玉宇徐广宇何巍; 关键词：大豆多肽前列腺癌 PC-3细胞细胞增殖

不同时间采集的小牛血清对CHO-C_(28)细胞培养及表达的影响被引量：2: 2005年; 通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。; 周长军戴长河何巍乔宏雷宋泽民赵小琳; 关键词：小牛血清细胞培养

结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6的原核表达及纯化被引量：2: 2010年; 目的原核表达并纯化结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6。方法将ESAT-6基因自pET-24b-ESAT-6质粒亚克隆至pGEX-3C载体中,构建重组表达质粒pGEX-ESAT-6,经酶切及测序鉴定正确后,分别转化大肠杆菌JM107和BL21(DE3),以不同浓度IPTG诱导表达,表达产物经GSH-Sepharose4 B亲和层析纯化。结果所构建的重组表达质粒pGEX-ESAT-6经酶切及测序鉴定正确;重组融合蛋白在大肠杆菌JM107中的表达量较高,可达菌体总蛋白的24.2%;最适IPTG诱导浓度为0.1mmol/L;纯化的目的蛋白纯度可达83.9%。结论已成功构建了重组表达质粒pGEX-ESAT-6,并在大肠杆菌JM107中高效表达,为结核分枝杆菌亚单位疫苗及核酸疫苗的研制提供了材料。; 马姬何巍吴文鹃孙迪王佳凤; 关键词：结核分枝杆菌原核表达纯化

卡介菌多糖核酸治疗过敏性鼻炎合并哮喘的临床疗效被引量：1: 2011年; 目的观察卡介菌多糖核酸对过敏性鼻炎合并哮喘的临床治疗效果。方法将98例2001年初～2009年初在吉林市中心医院耳鼻喉科就诊的过敏性鼻炎合并哮喘患者随机分为治疗1组、治疗2组及对照组,3组均给予相同的过敏哮喘基础治疗,治疗1组再经肌肉注射卡介菌多糖核酸(BCG polysaccharide and nucleic acid,BCG-PSN)注射液,疗程3个月;治疗2组再经肌肉注射BCG-PSN,疗程6个月;对照组只进行基础治疗,不给予BCG-PSN。观察疗程结束后1年内3组患者过敏性鼻炎及哮喘的发作情况,根据哮喘的发作次数及程度判断疗效。结果疗程结束后0～6个月内,治疗1组和治疗2组的过敏性鼻炎及哮喘的临床症状明显好转,显效率和总有效率均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);疗程结束后7～12个月,治疗2组的显效率和总有效率均明显高于对照组(P均<0.05)。BCG-PSN治疗中未见明显不良反应。结论BCG-PSN治疗过敏性鼻炎合并哮喘疗效确切,安全可靠,远期疗效与疗程有关。; 王敏何巍王伟善周欣; 关键词：卡介菌多糖核酸过敏性鼻炎哮喘

原子力显微镜技术研究重组人内皮抑素对内皮细胞的作用: 2014年; 目的应用原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）技术研究重组人内皮抑素（recombinant human endo-statin,rhES）对内皮细胞的作用。方法采用MTT法检测不同浓度的rhES（0.05～2.4μg/ml）对人脐静脉内皮细胞ECV304增殖活力的影响;分别用0.8和2μg/ml的rhES处理ECV304细胞,应用AFM观察内皮细胞整体形貌的变化,SPI 3800 New DFM动力显微镜观察ECV304细胞表面局部形貌的变化。结果rhES可明显抑制ECV304细胞增殖,且呈剂量效应（P〉0.001）;rhES可降低贴壁的ECV304细胞的厚度,且呈剂量±赖效应,使较光滑的细胞表面变粗糙,产生了一些微小的突起;经rhES处理的ECV304细胞表面结构呈现不规则的变化。结论AFM技术具有样品制备简便和分辨率较高等优点,适合贴壁培养细胞的原位观察。; 何巍王群路慧丽张晶韩慧利; 关键词：原子力显微镜内皮抑素内皮细胞

甲型肝炎病毒与水痘病毒感染2BS细胞的超微结构变化: 2012年; 目的观察甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)、水痘带状孢疹病毒(Varicella zoster virus,VZV)分别感染与共同感染二倍体细胞2BS株时细胞超微结构的变化。方法电镜观察HAV单独感染21、23、25 d,VZV单独感染1、3、5 d及HAV感染21 d后再以VZV感染1、3、5、7 d的2BS细胞的超微结构。结果与正常对照2BS细胞相比,单独感染HAV的2BS细胞超微结构无明显变化;单独感染VZV的2BS细胞的超微结构主要出现核膜破坏;HAV与VZV共同感染的2BS细胞核内出现VZV包涵体,核膜缺失,胞浆中可见HAV与VZV形态,且细胞粗面内质网和滑面内质网膨胀,内质网小池内有致密颗粒。结论HAV与VZV共同感染的2BS细胞的超微结构与两种病毒单独感染的细胞的超微结构存在不同的变化规律和形态特征,先感染HAV后感染VZV的2BS细胞比单独感染VZV的2BS细胞受到的破坏程度轻。; 蔡岩赵晓青何巍姜崴周长军张金岩付博刘建华; 关键词：超微结构

国产与进口血清在细胞培养中的比较: 1999年; 何巍李利等; 关键词：血清细胞培养

何巍

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

何巍

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈