童菊芳
- 作品数:44 被引量:405H指数:9
- 供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组人白细胞介素-2痘苗病毒的构建与鉴定
- 2001年
- 目的:构建表达人白细胞介素-2(hIL-2)的重组痘苗病毒,为肿瘤免疫基因治疗作必要准备。方法:应用分子克隆基因重组技术构建重组hIL-2痘苗病毒真核表达载体PMJ601(MJ601hlL-2)。在此基础上,应用分子病毒学同源重组技术构建能表达hIL-2的重组痘苗病毒(VMJ601hIL-2)。制备hIL-2探针,用DNA杂交技术鉴定VMJ601hIL-2,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测VMJ601hIL-2的基因产物。结果:成功构建了MJ601hIL-2和VMJ601hIL-2,VMJ601hIL-2感染的SGC7901胃癌细胞能分泌具有生物活性的hIL-2蛋白。结论:VMJ601hIL-2的构建与鉴定为进一步实施体内恶性肿瘤免疫基因治疗打下了坚实的基础。
- 郜恒骏童菊芳朱红音顾伟齐任卫平萧树东
- 关键词:白细胞介素2痘苗病毒免疫疗法胃癌
- 实验性高脂兔体外培养阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡的研究被引量:2
- 2008年
- 目的观察高脂诱导的血管性ED家兔阴茎海绵体平滑肌(Corpus Cavernosum Smooth Muscle,CCSM)细胞形态、结构变化及高脂对CCSM细胞凋亡、增殖的影响。方法雄性新西兰家兔10只,随机分为模型组和对照组,每组各5只。模型组为采用经高脂、高胆固醇饮食结合球囊导管扩张双侧髂内动脉建立、鉴定的血管性ED模型;对照组喂以正常饮食。8周后切取阴茎CCSM组织观察并做体外细胞培养。经处理后分别在光镜、透射电镜下观察,流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT比色法观察细胞增殖活性,RT-PCR法研究Caspase-3 mRNA的表达情况,免疫荧光法检测Caspase-3活性。结果与对照组相比,模型组光镜和电镜下CCSM细胞内含较多脂质囊泡,线粒体、内质网等细胞器出现损伤,凋亡小体明显增多。流式细胞仪检测证实模型组CCSM细胞凋亡率较对照组明显增高(1.44±0.20%Vs5.96±1.60%,P<0.01)。MTT比色法显示高脂对CCSM的增殖有明显抑制作用(模型组与对照组A值分别为:0.52±0.08Vs1.42±0.04,P<0.01)。模型组的Caspase-3 mRNA表达和活性值均显著高于对照组(0.74±0.00Vs0.65±0.00,P<0.01;活性值0.03±0.00Vs0.01±0.00,P<0.05)。结论高脂、高胆固醇饮食可严重影响CCSM结构,促进CCSM细胞凋亡并抑制其增殖。CCSM细胞凋亡/增生的失衡可能是高脂导致ED发生发展的重要病理环节。
- 陈斌胡剑麟童菊芳易静许雁萍王益鑫黄翼然
- 关键词:高脂血症勃起功能障碍细胞凋亡
- 全反式维甲酸诱导人胃癌细胞凋亡被引量:10
- 1998年
- 目的探讨不同分化程度的胃癌细胞凋亡情况和全反式维甲酸对其影响。方法以人胃癌细胞系低分化的MKN45和高分化的MKN28细胞作为研究对象,以不同浓度的全反式维甲酸干预其72小时后,以原位DNA断段切口标记法和DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡情况。结果两种细胞系的凋亡率均低于5%,全反式维甲酸干预后凋亡指数上升,且可能与药物浓度有关。结论全反式维甲酸可诱导胃癌细胞凋亡。
- 房静远萧树东陈向荣童菊芳
- 关键词:胃肠肿瘤全反式维甲酸细胞凋亡
- 黄芪对人肾小球系膜细胞CD_(44)mRNA表达的影响被引量:47
- 2001年
- 目的:了解黄芪(AM)对人肾小球系膜细胞(HMCs)分泌基质和表达CD44mRNA的影响。方法:应用不同浓度 AM或 AM血清处理经 PDGF-BB刺激的 HMCs,分别采用 MTT法和 ELISA方法检测 HMCs增殖和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)分泌,用RT-PC R法检测AM对HMCs表面CD4 4mRNA表达的影响。结果:经AM或AM血清处理后,由PDGF-BB诱导的HMCs增殖与未处理对照组相比呈显著抑制,并呈剂量依赖效应;HMCs分泌Col-AⅣ和CD44mRNA表达水平较未处理对照组相比也有显著下降,并与剂量呈一定相关。结论;AM可抑制HMCs增殖和Ⅳ型胶原蛋白的过度生成,并且这种作用可能部分是通过降低 HMCs表面 CD44 mRNA的过表达而介导的。本研究结果提示,AM对延缓慢性肾脏疾病向肾硬化进展可能有益。
- 倪兆慧张庆怡钱家麒王蔚王利民王健华许以评童菊芳
- 关键词:系膜细胞肾硬化药理
- 骨髓基质干细胞对H2O2诱导的肝细胞损伤保护作用的研究
- 2010年
- 背景:骨髓基质干细胞是一种多能干细胞,不但可分化为肝细胞,并且可通过旁分泌的方式分泌细胞因子,从而促进肝再生.目的:探讨骨髓基质干细胞对H2O2诱导的肝细胞损伤的保护作用.方法:以500μmol/L H2O2诱导人肝细胞株THLE-3损伤模型,24 h后与骨髓基质干细胞共培养.倒置相差显微镜下观察细胞形态改变,检测细胞毒性、caspase-3/7活性以及YO-PRO-1阳性细胞率.结果:与骨髓基质干细胞共培养后,H2O2损伤的THLE-3细胞形态明显改善,细胞毒性显著减少(P〈0.05),cagpase-3/7活性显著下降(P〈0.05),YO-PRO-1阳性细胞率显著降低(P〈0.05).结论:骨髓基质于细胞通过降低细胞毒性、caspase-3/7活性和细胞凋亡而对H2O2诱导的THLE-3细胞损伤起保护作用.
- 周艳童菊芳萧树东蒯小玲
- 关键词:骨髓基质干细胞过氧化氢肝细胞细胞凋亡
- 重组人白介素-2痘苗病毒对MKN45胃癌细胞感染性及白介素-2蛋白表达
- 2001年
- 目的 体外研究表达人白介素 2 (hIL 2 )的重组痘苗病毒 (vacciniavirus ,VV)对MKN45胃癌细胞的作用。方法 应用分子病毒学同源重组技术构建能表达hIL 2的重组VV(VMJ6 0 1hIL 2 )。用DNA杂交技术鉴定VMJ6 0 1hIL 2 ,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测VMJ6 0 1hIL 2基因产物。用VMJ6 0 1hIL 2体外感染MKN45胃癌细胞株 ,探讨其对体外胃癌细胞的作用。结果 VMJ6 0 1hIL 2对体外MKN45胃癌细胞株有较强的感染性 ,VMJ6 0 1hIL 2感染的MKN45胃癌细胞能分泌具有生物活性的hIL 2蛋白。结论 VMJ6 0 1hIL 2的构建与鉴定 ,进一步为胃癌的免疫基因治疗打下了坚实的基础。
- 郜恒骏朱红音童菊芳顾伟齐任卫平萧树东
- 关键词:白介素-2痘苗病毒胃癌蛋白表达免疫疗法
- 超声/微气泡SonoVue介导体内和体外基因转导的研究被引量:3
- 2005年
- 目的初步探讨超声联合微气泡超声造影剂SonoVue介导体外培养细胞和体内肌肉组织基因转导的可行性,并研究不同超声波参数和基因用量与转基因效率之间的关系。方法利用不同强度和不同剂量超声波和声学造影剂SonoVue,介导人肝癌细胞株HepG2和BALB/c小鼠右侧胫前肌内增强型绿色荧光蛋白报告质粒的转导,分别直接或组织冰冻切片后在荧光显微镜下观察,并计算转导效率。结果超声联合微气泡造影剂SonoVue可介导体外培养的HepG2细胞和小鼠胫前肌内pEGFPC1基因转导,HepG2细胞以1MHz1.5W/cm2超声波基因转导效果最好;小鼠胫前肌以1MHz3W/cm2的超声波转基因效果最好。结论超声联合微气泡造影剂SonoVue可介导体外培养细胞和体内肌肉组织基因转导,1MHz超声波是转基因的理想频率。
- 张国全邱德凯马雄陈颖晅李恩灵彭延申朱红音童菊芳肖树东
- 关键词:SONOVUE介导PEGFP-C1显微镜下观察组织冰冻切片声学造影剂
- 高糖刺激人肾脏成纤维细胞肝细胞生长因子和c-met的表达及其意义被引量:12
- 2002年
- 目的 在体外高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时观察其肝细胞生长因子 (HGF)和c met的表达。方法 将人肾脏间质成纤维细胞分别培养于不同浓度的葡萄糖中 ,于 2 4h后用RT PCR方法检测HGF、c met和 1型纤溶酶原激活物抑制物 (PAI 1)mRNA的转录水平 ,用不同浓度的HGF刺激细胞来观察PAI 1mRNA的表达。结果 高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有HGF、c met表达 ,之后表达逐渐下降 ,而PAI 1在此之后出现表达上升。同时外源性HGF可以抑制PAI 1mRNA的表达。结论 HGF在肾脏中是潜在的一种抗纤维化的细胞因子 ,可以通过降低PAI 1的表达 ,从而促进细胞外基质的降解。
- 牟姗张庆怡赵涵芳童菊芳
- 关键词:肾成纤维细胞肝细胞生长因子C-MET糖尿病肾病RT-PCR
- 维甲酸对人胃癌细胞p53基因表达的影响被引量:1
- 1999年
- p53基因与胃癌的关系早已引起人们的关注[1],人胃癌发生中有野生型p53基因的缺失或突变,该基因可启动细胞凋亡(apoptosis)[2,3]。全反式维甲酸(altrans-retinoicacid,ATRA,ATRA,以下简称RA)可诱导胃癌细胞...
- 房静远萧树东童菊芳
- 关键词:胃癌细胞系全反式维甲酸P53基因表达
- 炎症性肠病与Fas基因启动子670G/A多态性的关系被引量:1
- 2007年
- 有研究认为,在肠道菌群失调和遗传因素综合作用下肠黏膜免疫细胞异常激活,激活的免疫细胞凋亡受抑,导致肠道炎症反应失控。肠道病变处的肠上皮组织凋亡增加,而固有层淋巴细胞凋亡下降,故可认为其与Fas/FasL系统诱导的凋亡密切相关[2]。人类基因中已发现至少20种不同的Fas突变位点,其中研究较多的是Fas基因启动子区域-670位点的多态性。
- 薛惠平倪培华吴洁敏童菊芳
- 关键词:炎症性肠病FAS基因单核苷酸多态性