陈伟
- 作品数：33 被引量：67H指数：4
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 雌激素受体α磷酸化位点突变体T224A和S559A的构建及其转录激活活性检测
- 2015年
- 目的:构建雌激素受体α(ERα)T224A和S559A磷酸化位点突变体载体,在HEK293T细胞中检测其表达及突变体生物活性的改变。方法:以pc DNA3-Flag-ERα为模板,通过重组PCR技术扩增目的基因片段并突变碱基,插入pc DNA3-Flag载体;将构建的质粒转染HEK293T细胞进行瞬时表达,通过Western印迹检测融合蛋白的表达,采用萤光素酶报告基因方法检测ERα突变体的活性改变。结果:T224A和S559A磷酸化位点突变体在HEK293T细胞中得到表达,相对分子质量为66×103。在无雌激素(E2)时,野生型ERα及T224A和S559A突变体的转录活性分别为空载体的1.94、1.49和1.84倍;在雌激素存在时,野生型ERα活性增强了1.57倍,T224A和S559A突变体活性分别增强了0.54和0.61倍。结论:224位Thr磷酸化修饰对ERα的活性起重要作用,且2个磷酸化位点突变体受雌激素调控减弱。
- 陈伟周鹏宇朱永杰马胜利曹叶张萍萍何湘魏从文钟辉吴飞翔
- 关键词：雌激素受体Α磷酸化突变体雌激素转录激活活性
- 一种可转移的重组工程系统pYM-Red的建立被引量：4
- 2005年
- 重组工程是近几年发展的新型遗传工程技术.以PCR扩增的线性低拷贝质粒pACYCl84为载体,用Gap-repair方法从大肠杆菌DY330染色体上直接体内亚克隆了包括Red重组酶基因在内的长约6.7kb的基因序列,构建了pYM-Red重组质粒.在宿主菌W3110体内进行了染色体上galk基因的敲除,验证了Red重组酶的生物功能,并确定了影响pYM-Red重组效率的诱导时间和线性DNA片段用量.在42℃诱导10 min和线性DNA打靶分子浓度为300 ng时,pYM-Red的重组效率可达到大约每4 000个电转存活细胞中有1个重组阳性克隆,分别比pKD46和pBR322-Red系统高5～6倍.
- 于梅周建光陈伟李山虎黄翠芬
- 关键词：RED重组系统
- 基于Web的数据挖掘系统设计及其在绝经综合征中的应用被引量：3
- 2012年
- 基于B/S结构设计通用数据挖掘系统,实现在Web上进行数据挖掘,以绝经综合征数据源作为实例,选用贝叶斯算法和决策树算法进行挖掘。实例应用表明该系统操作简单、方便,具有推广应用价值。
- 陈伟沈亚诚蔡永铭谷凌雁
- 关键词：数据挖掘绝经综合征贝叶斯算法决策树算法数据仓库
- 基于先验概率模型的自适应背景图像分割算法被引量：1
- 2009年
- 在利用背景消减的视频图像分割过程中,背景模型假定为高斯模型下判断像素点是否为背景点一般采用规则。当模型中方差参数的值较大时,与背景相近的前景被误分割为背景的误差就较大。针对这一问题,提出了一种基于先验概率模型与距离因子对背景进行分割的算法,该算法判定当前帧像素点为背景的概率由其先验概率及该像素点在上一帧分割结果中与前景点的距离决定。实验结果表明,与判定规则相比,该方法在背景变化范围较大的情况下,可以减少前景点被误分割为背景点的误差。
- 陈伟唐红光
- 关键词：自适应分割高斯模型先验概率
- 一种基于Red的在大肠杆菌中修饰染色体和BAC的新型重组工程系统被引量：2
- 2004年
- 近 5年来兴起了一种新型的基于λ 噬菌体Red重组系统的重组工程技术 ,它将缺陷型λ 噬菌体整合入大肠杆菌染色体上 ,使 3种重组酶蛋白Exo、Beta和Gam的表达受到严格的调控。Red重组工程技术不受酶切位点的限制 ,只需用 35～ 5 0bp长的同源臂就能得到很高的重组效率。运用这种技术能在大肠杆菌体内通过同源重组对大肠杆菌染色体、BAC质粒等复杂DNA片段上的基因进行突变、敲除、替换等修饰 ;此外可运用该技术中缺口修复的方法构建质粒。Red重组工程技术有远大的应用前景 ,将极大地推动功能基因组研究的进展。
- 陈伟周建光王鸣刚
- 关键词：基因修饰大肠杆菌
- 针对软件可靠性测试的测试用例集精简方法被引量：3
- 2008年
- 在软件可靠性测试中,随着测试输入数或操作数的增加,测试成本会大大增加。就此提出了一种针对软件可靠性测试的测试用例集精简算法,该算法先用正交试验设计法生成最初的测试用例集,然后用基于测试需求集的约简方法进行约简,生成最终的测试用例集,来进行软件可靠性测试。实例表明,该方法简化了测试用例集,从而大大降低软件可靠性测试代价。
- 陈伟
- 关键词：软件可靠性测试测试用例集
- 棉铃虫转录因子c-Myc基因在滞育和非滞育蛹脑中的表达分析及多克隆抗体制备
- 2015年
- 【目的】c-Myc是近年来研究较多的转录因子,也是受Wnt/β-catenin信号通路调节的重要靶标。本研究旨在克隆棉铃虫Helicoverpa armigera c-Myc基因,从核酸水平初步调查c-myc在滞育和非滞育蛹脑中的表达情况,同时制备其蛋白的多克隆抗体。【方法】通过RACE方法克隆棉铃虫c-myc基因的c DNA,运用RT-PCR方法比较滞育和非滞育蛹脑中Har-c-myc基因的表达情况。根据获取的序列构建原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中进行表达,纯化后免疫新西兰兔,制备了多克隆抗体。【结果】克隆了棉铃虫c-myc基因,核酸水平的研究表明滞育蛹脑中c-myc表达水平明显低于非滞育蛹脑。成功地在大肠杆菌中表达了c-Myc部分肽段并通过镍柱纯化获得了较纯的重组蛋白。制备的c-Myc抗体效价达到了1∶125 000。【结论】滞育蛹脑中Har-c-myc的表达下调。获得了抗棉铃虫c-Myc的多克隆抗体。本研究的成果为后续进一步深入研究棉铃虫Wnt/β-catenin信号通路在棉铃虫发育中的作用奠定了基础。
- 陈伟徐卫华
- 关键词：棉铃虫滞育转录因子多克隆抗体
- 山梨糖脱氢酶在乙酸钙不动杆菌中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的:在乙酸钙不动杆菌Y2004中表达山梨糖脱氢酶。方法:将酮古龙酸菌山梨糖脱氢酶基因sdh以及从pWH1266质粒上扩增的复制原点ori先后酶切连接到pBBR1MCS2质粒上,构建pBBR1MCS2-ori-sdh穿梭质粒;再以pBBR1MCS2-ori-sdh/DH5α为供体菌、乙酸钙不动杆菌Y2004为受体菌、pRK2013/HB101为辅助菌进行三亲本接合转移;从氨苄青霉素和卡那霉素双抗平板上挑取转化子进行培养,通过菌落PCR和提取质粒复转筛选阳性克隆,再通过活性电泳和体外糖酸转化实验检测阳性克隆的山梨糖脱氢酶活性。结果:构建了pBBRMCS2-ori-sdh质粒并转入乙酸钙不动杆菌Y2004中,活性电泳和体外实验证实阳性克隆具有山梨糖脱氢酶活性。结论:实现了山梨糖脱氢酶在乙酸钙不动杆菌Y2004中的表达,为单菌糖酸转化的进一步研究奠定了基础。
- 熊向华陈伟汪建华游松张惟材
- 关键词：山梨糖脱氢酶
- 二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体的构建被引量：2
- 2010年
- 为构建一种食品残留检测用二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体(sdsFvCAP)。以抗氯霉素抗体可变区基因为模板,通过引物突变PCR在轻链和重链的可变区分别引入一个半胱氨酸定点突变,以重叠延伸PCR组装成sdsFvCAP。在大肠杆菌系统强启动子T7驱动下,sdsFvCAP基因不能单独表达,而通过同义突变降低其5'端序列GC含量则可实现高效表达。表达产物主要以包涵体形式存在,经β-环糊精分子伴侣系统复性可获得亲和力与母本抗体相似的sdsFvCAP。所构建的sdsFvCAP具有取代单克隆抗体用于氯霉素残留检测的潜力。
- 李黄金陈伟赵林柴伟佳唐伟
- 关键词：氯霉素复性
- 基于测试需求集的测试用例集极小化算法
- 2007年
- 测试用例集约简技术是生成最小测试用例集，最大限度地对软件进行科学有效的测试，从而降低软件测试的成本、提高测试效率的关键技术之一、结合国内外几种算法的策略的基础上，提出了一种基于测试需求集的最小测试用例集的生成方法，该方法能够保证得到优化代表集。
- 陈伟唐红光
- 关键词：软件测试
