姜虹
- 作品数：32 被引量：101H指数：5
- 供职机构：山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 实时三维超声测量动脉粥样硬化斑块体积——仿体实验被引量：13
- 2005年
- 目的明确实时三维超声技术用于定量颈动脉斑块体积的可行性及准确性。方法采用不同浓度比例的琼脂、明胶和碳化硅颗粒混合物制作成硬度、回声强度各异的含有斑块的血管仿体32个。先后应用11L-3探头和X4探头扫查仿体,并获取仿体的全容积(fullvolume)图像导入TomTec4DCardio-View工作站,由两名超声医师双盲、随机分别在2、4、8、16平面状态下测量体积,其中一位观察者在1月后按此原则再次进行测定。结果在斑块及其回声强度的判断上,实时三维成像与传统二维血管成像具有良好的一致性。2、4、8、16平面状态下所测得的仿体斑块体积与制作过程中的实际体积相比其P值分别为0.001、0.946、0.223、0.196;4、8及16平面测量值与实际体积数值之间的相关系数r分别为0.73、0.82和0.74(P均<0.001)。体积测量数据在观察者间和观察者内部的差异无显著性意义。结论实时三维超声技术可检测颈动脉仿体中存在的斑块,结合TomTec4DCardio-View工作站可准确计算斑块体积。该技术具有较高的可重复性。
- 张鹏飞张运姚桂华丁士芳张梅李大庆姜虹
- 关键词：实时三维超声动脉粥样硬化斑块心血管疾病
- 人卵丘颗粒细胞凋亡与卵子发育潜能的关系被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨人卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡状态与相应卵子发育潜能的关系。方法:收集卵泡浆内单精子注射(ICSI)患者每个卵子周围的卵丘颗粒细胞,流式细胞仪检测卵丘颗粒细胞的凋亡率,研究其凋亡率与卵子的成熟度、受精率及相应胚胎质量的关系。结果:MⅡ期卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率明显低于GV期、MⅠ期及退变死亡的卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率(P<0.05);MⅡ期受精卵子的卵丘颗粒细胞凋亡率显著低于未受精的卵子(P<0.01);发育成优质胚胎的MⅡ期卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率低于发育成评分较低胚胎的卵子的卵丘颗粒细胞(P<0.05)。结论:卵巢刺激周期获取的卵子的成熟状态和发育潜能与相应卵丘颗粒细胞的凋亡程度相关。
- 王国云姜虹于红玲晁岚孙丙翠邓晓惠
- 关键词：凋亡卵子流式细胞分析
- 携带人血管内皮生长因子165基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建和鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的:构建携带人血管内皮生长因子(VEGF)165基因的重组腺病毒载体。方法:应用EcoRⅠ和XbaⅠ酶切质粒PDC-VEGF和PDC315,连接DNA目的片段后转化大肠杆菌DH5α构建重组质粒PDC315-VEGF,对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定。通过脂质体将质粒PDC315-VEGF与质粒pBHGE3共转染293细胞获取重组腺病毒,以重组腺病毒DNA为模板,PCR鉴定构建的重组腺病毒。扩增、浓缩纯化重组腺病毒,微量滴定法测定腺病毒滴度。结果:通过连接反应构建重组质粒PDC315-VEGF,酶切分析和测序证明构建正确。经细胞内同源重组构建携带人VEGF165基因的重组腺病毒,PCR扩增421bpVEGF165片段,证实VEGF165基因成功克隆到复制缺陷型腺病毒载体,腺病毒滴度为5.0×109pfu/mL。结论:通过双质粒细胞同源重组,生产携带人VEGF165基因的重组腺病毒,为动物试验奠定基础。
- 周炜冯进波王旭平刘春喜姜虹王荣丁士芳
- 关键词：血管内皮生长因子类腺病毒载体基因重组
- 兔外周血内皮祖细胞培养及HTK基因体外修饰被引量：6
- 2007年
- 目的探讨兔外周血来源的内皮祖细胞(EPCs)经体外基因修饰后能否成功表达目的基因。方法分离兔外周血单个核细胞进行定向培养,观察细胞摄取DiI-Ac-LDL的能力,免疫荧光法检测EPCs的细胞表面标记。同时PCR扩增人组织激肽释放酶(HTK)基因,构建以GFP为报告基因的重组真核表达载体,转染体外培养的EPCs后,荧光显微镜下观察HTK-EGFP融合蛋白的表达,通过RT-PCR与ELISA方法检测HTK的表达水平。结果细胞培养5～6d开始出现成簇的短梭形贴壁细胞,15d后形成鹅卵石样细胞层,传代后的细胞能摄取DiI-Ac-LDL,免疫荧光显示vWF和CD133+;pEGFP-HTK重组质粒在EPCs中可以稳定表达,表达的融合蛋白具有HTK和EGFP的双重活性。结论HTK基因修饰兔外周血EPCs对于血管病的治疗可能具有良好的前景。
- 刘春喜李大庆张运姜虹王荣王旭平
- 关键词：激肽释放酶内皮祖细胞动脉损伤血管病
- 霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响
- 2012年
- 目的探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制。方法雄性SD大鼠28只,随机选取8只作为正常对照组(N组),其余20只注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病模型,并随机分为糖尿病组(DM组)、霉酚酸酯组(M组)。12周后测量大鼠血糖、体质量、肾质量/体质量、24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr),观察肾小管间质病理形态学变化,应用免疫组化技术和Western blot检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果 DM组血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白定量、血SCr、肾小管-间质损伤指数(TII)均明显高于N组(P<0.01),M组除血糖、体质量外(P>0.05),其余指标均明显低于DM组(P<0.01);免疫组化结果显示,DM组肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA、TGF-β1表达均明显高于N组(P<0.01),M组明显低于DM组(P<0.01);Western blot结果显示,DM组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较N组分别增加3.4倍与1.1倍,M组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较DM组分别下降55%与40%。结论 MMF能下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞α-SMA、TGF-β1的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化,起到肾脏保护作用。
- 王杰常相帝李冰肖晓燕张扬甄军晖姜虹胡昭
- 关键词：糖尿病肾病霉酚酸酯肾小管上皮细胞转分化Α-平滑肌肌动蛋白
- FK506对早期糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用
- 2012年
- 目的探讨FK506对早期糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞损伤的保护作用。方法将38只正常雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)8只、糖尿病肾病组(DN组)10只、FK506治疗组(F组)10只、洛汀新治疗组(L组)10只,其中DN组、F组、L组应用链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。F组成模4周后给予FK506 1 mg/(kg.d)灌胃,L组成模4周后给予洛汀新10 mg/(kg.d)灌胃,DN组与N组4周后给予等量蒸馏水灌胃,每4周末监测各组大鼠血糖(BS)、体质量(BW)、24 h尿蛋白定量,药物干预8周后测定各组大鼠的血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾质量/体质量(KW/BW),在光镜、电镜下观察肾脏病理组织学改变,应用West-ern blot印迹检测足细胞特异标记物Nephrin的蛋白表达。结果①与N组比较,DN组大鼠BS、SCr、BUN、KW/BW、24 h尿蛋白定量均明显上升(P<0.05);与DN组比较,F组和L组上述指标除BS外均明显降低(P<0.05),且F组和L组之间差异无统计学意义(P>0.05);②光镜下,肾组织病理学观察N组无明显异常,DN组可见明显的肾小球体积增大,肾小球系膜细胞增生,系膜区增宽,基底膜增厚;F组、L组较DN组病理改变明显减轻(P<0.05),且F组和L组之间病理改变无显著性差异(P>0.05);③电镜下,DN组肾小球基底膜显著增宽,足突排列紊乱,足突增宽、融合,F组、L组较DN组上述病变有所减轻(P<0.05);④Western blot结果显示,DN组肾组织Nephrin蛋白表达较N组下降60.1%(P<0.05),F组和L组可明显恢复肾组织Nephrin蛋白的表达(P<0.05)。结论 FK506可能部分通过恢复糖尿病大鼠肾组织Nephrin蛋白表达、维护足细胞结构和功能的完整而发挥减少尿蛋白、延缓DN进展的作用。
- 常相帝王杰李冰甄军晖姜虹胡昭
- 关键词：FK506足细胞链脲佐菌素
- pEGFP-Kallikrein重组真核表达载体的构建及其在兔内皮祖细胞中的表达被引量：3
- 2006年
- 目的:构建携带人组织激肽释放酶(tHK)基因,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导入兔内皮祖细胞(EPCs)中表达,验证tHK基因修饰EPCs用于血管病治疗的可行性。方法:PCR扩增tHK目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N3上,构建重组质粒载体。并利用脂质体转染体外培养的EPCs,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察tHK-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;用RT-PCR方法验证tHK在mRNA水平的表达;用ELISA方法验证tHK蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-Kallikrein重组质粒构建正确,重组质粒载体在EPCs中获得了表达,表达的融合蛋白具有tHK和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功构建了pEGFP-Kallikrein重组质粒载体,并且在EPCs中稳定表达,为进一步研究tHK基因修饰EPCs双重治疗血管病的技术策略奠定了基础。
- 姜虹李大庆张运刘春喜冯进波王荣
- 关键词：激肽释放酶类内皮干细胞基因转移技术
- HDM通过肺泡巨噬细胞TLR4诱导哮喘小鼠气道炎症的机制研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究HDM通过肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)的高表达及诱导AM的活化,探讨其对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组(OVA)A,HDM处理组(HDM+OVA)B,对照组(生理盐水)C。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型;HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量,实时定量PCR法测定AM的TLR4的表达,流式细胞技术(FCM)检测AM的CD80、CD86的表达。结果:与A组相比,B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,AM的TLR4mRNA表达明显增高(P<0.05),CD80的表达差异无统计学意义,CD86的表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDM通过AM的TLR4的高表达诱导AM的活化,加重哮喘的气道炎症。
- 郝俊青李鸿佳李艳丽王荣姜虹王旭平毕文祥董亮
- 关键词：肺泡巨噬细胞HDMTOLL样受体4支气管哮喘
- 心肝宝胶囊对STZ诱导的糖尿病大鼠早期肾损伤的保护作用及其机制研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨心肝宝胶囊对链尿佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠早期肾损伤的保护作用及其机制。方法选取24只雄性Wistar大鼠建立STZ DM动物模型。造模后随机分为模型组、心肝宝胶囊治疗组[中药组,0.5g/(kg·d)]及贝那普利治疗组[西药组,4mg/(kg·d)],每组8只,另选取8只大鼠作为空白对照组(空白组)。模型组与空白组给予等量自来水灌胃,连续干预8周。干预4、8周末检测各组大鼠血糖,8周后观察24h尿蛋白(24h urine protein,24hUP)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,SCr),采用免疫组化法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,Col-Ⅳ)的表达,采用RT-PCR法检测肾脏TGF-β1、组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)及纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)mRNA的表达,行HE、PAS和Masson染色观察肾脏病理变化。结果与空白组比较,DM大鼠造模后出现血糖升高、多饮、多食、多尿、体重减轻、消瘦、体毛枯燥无光泽、易激惹等表现,干预8周后两个用药组症状减轻。与空白组比较,模型组24hUP、SCr、血糖、Col-Ⅳ、LN、TGF-β1阳性表达量,TGF-β1、TIMP-1及PAI-1mRNA,肾小球面积(GA)、细胞外基质(ECM)及ECM/GA均升高,差异均有统计学意义(P<0.01),病理改变可见明显肾小球体积增大,毛细血管袢扩张,小球系膜细胞增生,系膜区基质增多,增宽,基底膜增厚,肾小管排列紊乱,部分上皮细胞可见空泡变性、脱落,可见蛋白管型,间质有炎性细胞浸润。与模型组比较,两个用药组各指标均降低,差异均有统计学意义(P<0.01),病理改变较轻,系膜细胞轻度增生,系膜基质轻度增多。中药组SCr、PAI-1mRNA表达低于西药组(P<0.05),两个用药组其他指标比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论心肝宝胶
- 高洁范例刘茂静甄军晖姜虹胡昭
- 关键词：心肝宝胶囊链尿佐菌素转化生长因子-Β1
- 人卵丘颗粒细胞凋亡与卵子发育潜能关系的研究被引量：25
- 2006年
- 目的:探讨人卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡状态与卵子发育潜能的关系。方法:收集130例接受体外受精(IVF)患者卵子周围的卵丘颗粒细胞,包埋后切片进行透射电镜观察,研究其凋亡状态与不孕原因、取卵数、受精数、优质胚胎数及治疗结局的关系。结果:子宫内膜异位症导致的不孕症患者卵丘颗粒细胞的凋亡率高于其他原因导致的不孕,差异有显著性(P<0.05)。卵丘颗粒细胞的凋亡率与取卵数有关,取卵数≤5个的患者与取卵数>5个的比较,卵丘颗粒细胞的凋亡率高,差异有显著性(P<0.05);卵丘颗粒细胞的凋亡与卵子受精密切相关,无或受精卵≤2个与受精卵>2个的患者两两比较,前者卵丘颗粒细胞凋亡率增高,差异有显著性(P<0.01);卵丘颗粒细胞的凋亡与胚胎质量有关,无或优质胚胎≤2个与优质胚胎>2个的患者两两相比,前者卵丘颗粒细胞凋亡率增高,差异有显著性(P<0.01);卵丘颗粒细胞的凋亡与移植结局有关,妊娠组卵丘颗粒细胞凋亡率与未妊娠组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:卵丘颗粒细胞的生长状态与卵子的发育潜能密切相关,卵丘颗粒细胞的凋亡影响卵子的成熟、受精和卵裂。卵丘颗粒细胞凋亡的检测可以作为预测IVF结果的指标。
- 王国云姜虹晁岚于红玲高云红
- 关键词：凋亡凋亡小体卵子体外受精
