王艳军
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同超声辐照时间和微泡剂量介导HepG2细胞基因转染的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨不同超声辐照时间和微泡剂量与基因转染效率之间的关系，初步摸索适宜转染的参数条件。方法质粒DNA用增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP），以人肝癌细胞（HepG2）为研究对象。超声频率1MHz，声强0．5w／cm^2，对加入pEGFP和不同剂量微泡的HepG2细胞辐照不同的时间，24h后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，流式细胞仪检测基因转染率，台盼蓝染色检测细胞存活率。结果各实验组均可见不同程度荧光蛋白表达，辐照时间为20S和微泡剂量为60μl时可达到较理想的转染效率。结论在超声频率和声强一定的条件下，不同超声辐照时间和微泡剂量有不同的基因转染效率，20S、60μl是一个较理想的参数，为基因治疗进一步研究提供了参考。
- 胡良军李开艳刘晓娜张喜君董为王艳军秦蓉
- 关键词：微气泡转染细胞系
- 多发侧方异位甲状腺1例被引量：1
- 2010年
- 异位甲状腺大部分位于颈中线，多发侧方异位甲状腺较罕见，现将收治的1例多发侧方异位甲状腺诊治报道如下。
- 王艳军张必翔陈孝平
- 关键词：甲状腺畸形
- HBx基因大鼠卵圆细胞株的建立及鉴定被引量：5
- 2008年
- 目的构建带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的真核表达质粒pEGF—HBx，建立稳定、高效表达乙型肝炎病毒X基因（HBx）的大鼠卵圆细胞株，以便进一步研究HBx基因和卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用和机制。方法用PCR方法从质粒pcDNA3．1-HBx中扩增含KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的HBx基因序列。对增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP—N1）及扩增的HBx目的基因片段进行双酶切，纯化后用连接酶连接得到重组体pEGFP—HBx，将其转化大肠杆菌DH5α，抗生素筛选培养得到阳性克隆，提取质粒后用双酶切和基因测序进行鉴定。通过脂质体介导将质粒pEGFP-HBx转染到大鼠卵圆细胞株（LE／6）中，经G418筛选，无限传代后得到稳定表达EGFP—HBx融合蛋白的细胞株。分别采用RT—PCR和免疫细胞化学技术检测细胞株中HBx基因的表达情况。结果双酶切及基因测序结果均显示构建的pEGFP—HBx质粒中含有完整的HBx基因片段。将得到的抗性细胞株培养传代20次后仍表达强的荧光；RT—PCR及免疫细胞化学检测均发现HBx基因在抗性细胞（LE／6）中得到了稳定转录和翻译。结论已成功构建带HBx基因的真核表达质粒pEGFP—HBx，获得了稳定、高效表达EGFP—HBx融合蛋白的大鼠卵圆细胞株，为进一步研究HBx基因和卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用和机制奠定了实验基础。
- 李常海陈孝平梁慧芳王恒毅王艳军董为
- 关键词：细胞系HBX基因
- 乙型肝炎病毒X基因诱导卵圆细胞恶性转化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究乙型肝炎病毒X（HBx）基因对卵圆细胞转化和分化的影响。方法用稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP—HBx卵圆细胞作为实验组，pEGFP卵圆细胞及LE／6卵圆细胞作为对照组，运用倒置相差显微镜和透射电镜、流式细胞术、糖原染色、软琼脂生长、实时定量PCR、细胞免疫化学技术观察和检测pEGFP-HBx卵圆细胞在细胞形态、细胞周期、分化标志物、癌基因c—myc及TGF-α的变化。结果（1）与对照组相比，pEGFP—HBx卵圆细胞体积增大，核具有明显异型性；（2）流式细胞仪检测显示，与对照组相比，pEGFP—HBx卵圆细胞GO／G1期细胞百分比下降，S期和G2／M期细胞百分比明显升高，而且非整倍体细胞明显增多；（3）糖原染色显示，pEGFP—HBx卵圆细胞胞质内可见大量糖原颗粒；（4）软琼脂中可见pEGFP—HBx卵圆细胞克隆形成；（5）癌基因c-myc及TGF-α表达量明显增高，卵圆细胞分化指标HNF-4α、AFP表达上升，CK-7、CK-19表达下降，未见有cpsl mRNA表达。结论HBx基因可以引起卵圆细胞异常分化，并直接诱导卵圆细胞发生恶性转化。
- 王艳军梁慧芳陈孝平董为李常海陈琳刘利平
- 关键词：肝炎病毒乙型卵圆细胞恶性转化
- 多发侧方异位甲状腺1例报道
- 2010年
- 异位甲状腺大部分位于颈中线，多发侧方异位甲状腺较罕见，现将收治的一例多发侧方异位甲状腺诊治报道如下。
- 王艳军张必翔陈孝平
- 关键词：甲状腺
- 体内微环境对肝卵圆细胞分化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究体内微环境对肝卵圆细胞分化的影响,探讨肝卵圆细胞是否可在体内分化为肝癌.方法 在使用黄曲霉素作为诱癌剂的情况下,将转染乙肝病毒X基因（HBx）的大鼠卵圆细胞种植于裸鼠皮下,形成肿瘤后再移植至同一裸鼠肝实质内,使其继续生长.收集皮下肿瘤和肝内肿瘤,用苏木素-伊红（HE）、免疫组织化学染色和透射电镜对其进行检查,明确其性质.结果 10周时,实验组中10只（10/15）裸鼠形成皮下肿瘤,对照组中8只（8/15）裸鼠形成皮下肿瘤,两组在肿瘤大小和生长速度方面差异无统计学意义（P＞0.05）;两组均在皮下分化成间质肿瘤,表达间质性标志物波形蛋白（Vimentin）和平滑肌肌动蛋白（SMA）.皮下间质肿瘤移植至肝内8周后,在肝内种植处长成肝内肿瘤;经病理确诊实验组肿瘤为肝癌肉瘤（由恶性间质细胞和肝癌细胞组成）,表达HepPar1、细胞角蛋白8（CK8）和甲胎蛋白（AFP）抗原,说明肝卵圆细胞在HBx和黄曲霉素的共同作用下可部分分化成肝细胞癌.结论 肝卵圆细胞具有可塑性,局部微环境对其分化方向起关键作用;肝癌可能来源于卵圆细胞的异常分化.
- 李常海廖铂王艳军董为董汉华梁慧芳陈孝平
- 关键词：肝卵圆细胞肝肿瘤乙肝病毒黄曲霉素
