王祥斌
- 作品数：22 被引量：30H指数：4
- 供职机构：北京安波特基因工程技术有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划吉林省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 基于良好表达框架的全合成人源抗体库的构建方法
- 2004年
- 构建大容量高质量抗体库，从而提高针对任意抗原的重组抗体的筛出率是一项有意义而又繁琐的工作。本文在现有建库方法的基础上，兼顾操作方法的简便和高质量抗体库的要求，设计了一种易于操作、步骤简洁的建库方法，并通过构建一个中等库容的单骨架全合成单链抗体模式库，验证了该方法的可行性。本工作选用两条表达性能良好，在入抗体库中高频率出现的胚系基因作为抗体库的骨架，以期保证合成库的代表性和良好的表达折叠性能。在可变区的设计上，对重轻链可变区的CDR3区同时进行了随机化。在CDR区随机化合成策略的选择上，采用一种新颖的分组式合成法。本工作为其他骨架或多骨架合成库的构建提供了一种可供参考的构建模式，本抗体库也可用于抗体前导物的筛斌。
- 王尚资尹长城林正红王祥斌刘晶张逸于文功管华诗黄华糅
- 关键词：单链抗体噬菌体展示噬菌体克隆效率表达率
- 一种趋化小肽与双特异抗体的融合蛋白
- 本发明涉及一种趋化小肽与抗肿瘤×抗CD3双特异抗体的融合蛋白，其特征在于由CC家族趋化因子SLC(Secondary lymphoid tissuechemokine，次级淋巴组织趋化因子)的N末端十八肽、(GGGGS)...
- 黄华樑宋景震王祥斌春雷朴锦华张众林晴
- 文献传递
- 抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体的生物学活性研究被引量：5
- 2005年
- 背景与目的目前,常规疗法已难以提高卵巢癌患者的生存率,已有实验数据及临床前试验结果表明,双特异性抗体能有效介导效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。本研究旨在通过检测抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-I)的生物学活性,为其临床前试验及应用提供实验依据。方法观察BHL-I介导的外周血淋巴细胞(peripheralbloodlymphocyte,PBL)与靶细胞SKOV3结合、MTT法检测外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs)增殖及PBL对靶细胞SKOV3杀伤效应,ELISA法检测杀伤过程中PBL分泌hIFN-γ、hTNF-α变化。结果BHL-I介导的花环形成率(15.7%)显著高于对照组(11.1%)(P<0.01);在抗原存在下,BHL-I显著促进PBMC增殖和PBL对靶细胞的杀伤(P<0.01),且杀伤率与花环形成率呈正相关(r=0.946);杀伤过程中上清液中hIFN-γ、hTNF-α显著增高(P<0.01)。结论BHL-I能介导PBL和SKOV3结合并活化PBL特异杀伤效应,杀伤可能与其hIFN-γ、hTNF-α表达增高有关。
- 杨介钻张众马骊姚新生周明乾王祥斌王小宁
- 关键词：卵巢癌细胞株
- 核糖体展示技术的原理与应用被引量：8
- 2002年
- 王祥斌孔健黄华樑
- 关键词：核糖体展示技术生物活性物质噬菌体展示技术
- 抗人卵巢癌-抗人CD3单链双特异性抗体体外介导的细胞毒作用及其机制
- 2008年
- 目的了解抗人卵巢癌-抗人CD3（BHL—I）单链双特异性抗体（scBsAb）体外介导的外周血淋巴细胞（PBL）对靶细胞SKOV3的细胞毒作用及可能的机制。方法二苯基溴化四氮唑蓝（MTr）法检测BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的杀伤作用；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测BHL—I介导的细胞毒作用过程中效应细胞PBL对穿孔素（perforin）、颗粒酶（GrB）mRNA表达的影响；酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞培养上清液中人肿瘤坏死因子-α（hTNF—α）和人干扰素-γ（hIFN-γ）含量的变化。结果BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的细胞毒作用显著高于对MCF-7细胞的作用（P〈0.01），并且在效靶比为12．5：1、作用时间为36h、BHL-I浓度为25μg/ml时，PBL对靶细胞的细胞毒作用最为显著；BHL—I体外介导的细胞毒作用中，PBL表达perforin、GrBmRNA及混合细胞培养上清液中hTNF—α和hIFN-γ的含量均显著升高，并且白介素2（IL-2）的存在有利于这些因子的表达。结论BHL—I介导PBL对靶细胞的细胞毒作用具有一定的特异性，并且IL-2能增强BHL—I介导PBL的细胞毒作用。
- 杨介钻李兰娟何剑琴王祥斌王小宁
- 关键词：单链双特异性抗体细胞毒作用细胞因子
- p53四聚化结构域介导的四价单链抗体
- 本发明涉及一种基因工程四价抗体，其特征在于由抗TNF－α抗体、HSA连接肽和人类抑癌蛋白p53四聚化结构域依次连接而成。更具体地说，本发明涉及抗TNF－α的基因工程四价单链抗体：TNF－TeAb，该抗体是将一种抗人TNF...
- 黄华樑刘梦元王祥斌尹长城林晴
- 文献传递
- 单链双特异性抗体(BHL-I)介导的细胞毒作用及其可能机制研究被引量：2
- 2007年
- 目的:观察单链双特异性抗体(BHL-I)介导的PBL对靶细胞SKOV3的杀伤作用,并研究其细胞毒作用的可能机制。方法:MTT法检测在不同效靶比、不同作用时间、不同靶细胞(SKOV3、BEL-7402)、不同BHL-I浓度等条件下,BHL-I介导PBL对靶细胞的杀伤作用;RT-PCR检测杀伤过程中PBL的穿孔素(Perforin)、颗粒酶(GranzymeB)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ含量变化。结果:BHL-I介导的PBL对SKOV3细胞毒作用明显高于对BEL-7402的,并且在效靶比10∶1、作用36小时、BHL-I浓度为25μg/ml时,PBL对靶细胞SKOV3的细胞毒作用最为显著;在IL-2存在下,BHL-I可引起Perforin、GranzymeB mRNA较高表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ含量升高,当作用时间为72小时时,这些细胞因子的表达有所下降。结论:BHL-I能介导PBL对表达有相应靶抗原的SKOV3细胞具有高效杀伤作用,其细胞毒作用可能与效应细胞表达Perforin、GranzymeB、TNF-α、IFN-γ等有关。
- 杨介钻马骊姚新生温茜罗微胡志明王祥斌王小宁
- 关键词：单链双特异性抗体细胞毒作用杀伤机制
- p53四聚化结构域介导的四价单链抗体
- 本发明涉及一种基因工程四价抗体，其特征在于由抗TNF-α抗体、HSA连接肽和人类抑癌蛋白p53四聚化结构域依次连接而成。更具体地说，本发明涉及抗TNF-α的基因工程四价单链抗体：TNF-TeAb，该抗体是将一种抗人TNF...
- 黄华樑刘梦元王祥斌尹长城林晴
- 文献传递
- 全合成人源单骨架抗体库的构建及初步筛选
- 2005年
- 王尚资尹长城林正红王祥斌刘晶管华诗黄华樑
- 关键词：噬菌体展示
- 一种趋化小肽与双特异抗体的融合蛋白
- 本发明涉及一种趋化小肽与抗肿瘤×抗CD3双特异抗体的融合蛋白，其特征在于由CC家族趋化因子SLC(Secondary lymphoid tissuechemokine，次级淋巴组织趋化因子)的N末端十八肽、(GGGGS)...
- 黄华樑宋景震王祥斌春雷朴锦华张众林晴
- 文献传递
