王玺
- 作品数：17 被引量：35H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-1 C/B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究
- 2008年
- 目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应。结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关。ELISA结果表明,MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性。结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应。
- 高燕孙明蒋国润张银川王玺李冰香黄小琴陈丹周东霞褚嘉祐
- 关键词：HIV-1免疫原性
- HIV1型C/B亚型DNA、MVA疫苗免疫原性和免疫策略研究
- 研究背景:HIV的基因组中含有gag、pol和env等基因,gag基因为组成病毒核心的核酸核蛋白的编码,pol基因为复制逆转录酶的编码,其编码的蛋白是联接包膜与核心的跨膜蛋白,这些基因编码蛋白在各种类型的艾滋病毒中是一致...
- 孙明蒋国润周东霞王玺李冰香黄小琴史荔褚嘉祐
- 文献传递
- 晚期食管鳞癌药物治疗进展被引量：9
- 2017年
- 食管癌是发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤,晚期预后差,一线治疗多采用含铂方案,但治疗失败后患者的中位生存时间不到1年,二线药物治疗尚无标准方案,需要积极寻找更为有效的新药。本文就国内外食管鳞癌药物治疗进展作一评述。
- 黄镜王玺李群
- 关键词：食管肿瘤化疗靶向治疗
- 人肠道病毒71型感染免疫抑制恒河猴的分析被引量：5
- 2011年
- 目的:通过建立人肠道病毒71型(EV71)感染在免疫抑制恒河猴的动物模型,进一步分析人EV71在免疫抑制动物体内病毒增殖、病理变化以及病毒抗原在不同组织的表达情况。方法:按照每天15 mg/kg的剂量给8只恒河猴口服环孢菌素A连续7 d后造成其免疫抑制状态,再经呼吸道和消化道感染EV71病毒FY23株,对其进行14 d的临床观察后处死,采集各器官组织进行病毒载量检测,同时对不同的组织进行病理学分析和免疫组化分析。结果:感染EV71病毒后,免疫抑制组的临床症状、病毒载量、病理分析和免疫组化结果都明显比非免疫抑制组严重,从病毒对机体造成的影响来看呼吸系统感染较消化系统感染明显严重。结论:本实验分析了人EV71在免疫抑制动物体内病毒增殖的情况,为建立用于EV71疫苗评价的恒河猴动物模型提供了依据,并对未来的EV71疫苗的使用人群范围做出了新的限定。
- 王晶晶张雪梅赵红玲董承红普晶廖芸王丽春纳锐雄刘龙丁张莹杨丽仙王庆林沈冬王玺李琦涵
- 关键词：人肠道病毒71型恒河猴免疫抑制
- 肠道病毒71型毒株体外不同温度连续传代其生物学特性变化研究被引量：1
- 2016年
- 目的探究肠道病毒71型(EV-A71)FY23-K株在不同温度下连续传代对其生物学特性的影响,旨在获得EV-A71的减毒候选株。方法在33℃条件下进行FY23-K株克隆筛选,之后分别在33℃及35℃下连续传代,并进行病毒生长增殖特性、乳鼠致病性及在小鼠体内的免疫原性检测,对比分析其各项生物学特性的变化。结果挑选出感染性滴度较高的6个克隆,在33℃条件下连续传代后发现,其感染性滴度逐渐降低,且相同接种条件下,达到75%病变程度的收获时间随代次的增加逐渐延长,至26代后,接种至第8天细胞病变程度只达到40%。而在35℃条件下连续传代的病毒能够稳定增殖,保持良好的生长特性,毒株感染性滴度>6.5lg CCID50/ml;35℃传代后毒株的免疫原性良好,6株克隆株有4株样品的灭活抗原免疫小鼠后抗体的阳转率可达100.0%,GMT可达1∶128,最高的中和抗体效价为1∶512;活病毒免疫小鼠抗体阳转率达88.9%以上,中和抗体效价均>1∶16;传代样品攻击乳鼠后,乳鼠无发病、死亡情况,其脑、脊髓也未产生明显病理性损伤,仅在肌肉组织细胞间隙发现少量的炎性细胞浸润,在脑前额叶出现数个胶质小结。结论 FY-23K克隆株在35℃低温连续传代后有稳定的生长特性和良好的免疫原性,对乳鼠未表现出明显致病性,可作为EV-A71减毒活疫苗进一步研究的候选毒株。
- 朱凡丽李华谢天宏杨婷宋霞王玺沈冬刘正玲岳磊谢忠平
- 关键词：手足口病肠道病毒71型减毒活疫苗
- 层析技术纯化核酸疫苗被引量：4
- 2007年
- 目的利用层析技术制备高纯度的核酸疫苗。方法用层析技术中的凝胶过滤、亲和、离子交换层析3种方法，依次对核酸疫苗进行纯化，并检测其纯度。结果连续使用3种层析方法获得的DNA达到了理想的分离效果，琼脂糖凝胶电泳未检出RNA，A260与A280的比值介于1．80～2．00之间，其中环状DNA达90％以上。经离子交换层析后的内毒素含量小于10EU／mg DNA，宿主DNA残留量小于0．002μg/μg DNA。结论纯化的核酸疫苗均符合国家标准，为制备核酸疫苗奠定了基础。
- 蒋国润周东霞孙明王玺戴青黄小琴褚嘉祐
- 关键词：核酸疫苗纯化
- 一种自发永生化树鼩脑微血管内皮细胞系的建立方法
- 本发明公开了一种自发永生化树鼩脑微血管内皮细胞系的建立方法，该方法通过树鼩大脑皮层的分离、树鼩脑微血管段的富集、树鼩脑微血管段的消化分离、树鼩脑微血管内皮细胞的培养、树鼩脑微血管内皮细胞的初步纯化培养、树鼩脑微血管内皮细...
- 王文广陆彩霞代解杰李娜陈柳邱敏孙晓梅仝品芬钱兴丽王玺
- 一株引起病毒性脑炎的柯萨奇B3病毒的生物学特性分析被引量：2
- 2014年
- 目的通过分析分离自病毒性脑炎病人的一株柯萨奇病毒B3株KMA103-09生物学特性,研究其致病机理。方法将KMA103-09病毒分别按一定量接种至KMB17细胞、RD细胞、VERO细胞、Hep-2细胞、Hela细胞及MRC-5细胞进行培养,观察细胞的生长情况,并采用微滴法检测病毒在不同时间、不同细胞中的病毒感染滴度;将一定量KMA103-09病毒注射乳鼠和成鼠脑内,观察病毒的致病性,并检查鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-r、TNF、IL-17A、IL-10含量。结果该病毒株在6种细胞上皆能适应生长,并产生明显的细胞病变效应。病毒在Hela细胞上生长繁殖最快,42h时细胞全部发生病变,感染性滴度达8.625lgCCID50/ml;在MRC-5细胞上病毒的感染性滴度最低,120h才全部发生病变,感染性滴度为5.50lgCCID50/ml。该病毒对一日龄乳鼠致死并在脑、肺和心脏等组织产生病理改变,实验乳鼠血清IL-6、IL-10、TNF含量分别为4.71pg/ml、21.08pg/ml和36.79pg/ml,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余4种皆无表达。该病毒对成鼠不致病,脑、肺、心脏病理检查无异常。结论 KMA103-09病毒在Hela细胞生长适应性良好,对乳鼠致病而对成鼠不致病。
- 李华杨卉娟王东宝柯华昕王玺沈冬王庆玲马绍辉
- 关键词：柯萨奇病毒B3生物学特性
- 抗HIV痘苗病毒载体(MVA)生产及纯化工艺的研究
- 研究背景:MVA是一种宿主自限性的病毒株,来自疫苗病毒Ankara株,是痘苗病毒科正痘病毒属成员,是目前已知结构最为复杂的病毒之一,其在鸡胚成纤维细胞(CEF)中进行多代次传代后,失去了包括宿主决定基因在内的大量DNA片...
- 孙明李冰香王玺蒋国润张银川黄小琴史荔周东霞褚嘉祐
- 文献传递
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型基因修饰突变株M3与野生型毒株Mckrae感染特征的比较分析被引量：1
- 2017年
- 目的通过系统比较观察一个利用CRISPR/Cas9系统构建的单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus,HSV-1)基因修饰减毒株M3和野生型毒株Mckrae感染BALB/c小鼠的感染特征,进一步确定M3毒株的减毒表型。方法利用基因修饰的减毒株M3和野生型毒株Mckrae,经角膜、滴鼻、肌内注射途径感染BALB/c小鼠,模拟急性感染模式;经足垫途径感染BALB/c小鼠,模拟慢性感染模式,观察感染小鼠的相应病理学指征。结果实验小鼠的观察结果表明,虽然Mckrae经不同途径感染的小鼠存活率存在差异,但这些小鼠所出现的弓背、倒毛、单侧眼失明、单侧后肢瘫痪等临床特征和一定的死亡比例等现象,在M3减毒株感染的小鼠中均未出现;q-PCR检测表明,M3不同途径感染小鼠的心、脑、肺、肾、肝组织病毒载量的增殖趋势均显著低于Mckrae感染的小鼠;组织病理学检查结果提示,Mckrae感染小鼠的肝、肺组织出现的病理损伤程度明显强于M3减毒株感染的小鼠。免疫组织化学结果提示,M3减毒株感染小鼠的肝组织病毒抗原表达和Mckrae感染小鼠存在明显差异。结论 HSV-1 M3基因突变株相较于Mckrae野生型毒株表现了明显的临床病理意义上的减毒表型。
- 何玉凤何玉凤张勇徐兴丽胡雅洁胡雅洁王玺王丽春张莹
- 关键词：BALB/C小鼠减毒株Q-PCR
